本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)的CDK2-shRNA促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞A375凋亡

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【摘要】：目的探討慢病毒介導(dǎo)的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)2-shRNA對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞A375凋亡的影響。方法依據(jù)CDK2基因序列,設(shè)計(jì)3條靶向干擾CDK2的序列,構(gòu)建CDK2-shRNA慢病毒載體,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞株(HEK293)細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,滴度測(cè)定包裝的重組p GMLV-CDK2-shRNA慢病毒,免疫印跡檢測(cè)對(duì)CDK2的干擾效率及對(duì)細(xì)胞周期蛋白(cyclin)E、E2F1、RB蛋白表達(dá)的影響,四甲基偶氮唑藍(lán)比色(MTT)檢測(cè)細(xì)胞增殖活力,Annexin V-FITC/PI染色流式細(xì)胞儀檢測(cè)A375凋亡的發(fā)生。結(jié)果成功獲得包裝的重組p GMLV-CDK2-shRNA慢病毒,病毒滴度為5×108TU/ml。重組的p GMLV-CDK2-shRNA慢病毒能有效下調(diào)CDK2、cyclin E、E2F1蛋白表達(dá),抑制A375細(xì)胞增殖和觸發(fā)凋亡。結(jié)論基于慢病毒介導(dǎo)的CDK2-shRNA能夠促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞A375凋亡發(fā)生,為黑色素瘤的基因治療提供理論支撐。
【作者單位】： 福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬?gòu)B門市第三醫(yī)院皮膚科;吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院普通外科;黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)生化教研室;
【基金】：廈門市衛(wèi)生局資助項(xiàng)目(No.3502Z20130190) 廈門市同安區(qū)科技局資助項(xiàng)目(No.20120081)
【分類號(hào)】：R739.5
【正文快照】： 黑色素瘤的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)〔1〕。淺表擴(kuò)散性黑色素瘤(SSM)、惡性雀斑樣痣黑色素瘤(LMM)、結(jié)節(jié)性黑色素瘤(NM)和肢端雀斑樣痣型黑色素瘤(ALM)為目前嚴(yán)重威脅人類生命健康的黑色素瘤〔2〕。細(xì)胞周期蛋白(cyc-lins)、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)和細(xì)胞周期蛋

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1247025