本文關(guān)鍵詞：水楊酸對小鼠皮膚屏障功能的影響

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【摘要】：背景和目的： 特應(yīng)性皮炎(atopic dermatitis, AD)是一種與遺傳過敏素質(zhì)有關(guān)的特發(fā)性皮膚炎癥性疾病,以不同程度的瘙癢、多形性皮損并有滲出性傾向為特點,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和工作情況。AD的病因比較復(fù)雜,發(fā)病機制尚不完全清楚,近年來認(rèn)為皮膚屏障功能缺陷與AD的發(fā)病有很大的關(guān)系。表皮分化過程中涉及的相關(guān)蛋白：中間絲聚合蛋白(filaggrin, FLG)、兜甲蛋白(loricrin, LOR)及外皮蛋白(involucrin,INV),參與形成穩(wěn)定的角質(zhì)化蛋白殼膜,即角化包膜(cornified envelope,CE),它可以促進表皮的分化,也是抵御外環(huán)境物理刺激的主要屏障；在顆粒層及角質(zhì)層細胞間隙中表達的激肽釋放酶相關(guān)的肽酶,如組織激肽釋放酶7(Kallikrein7,KLK7),具有裂解角橋粒和橋黏素I的作用,所以能夠調(diào)節(jié)角質(zhì)層的脫落。這幾種蛋白對于維持皮膚的屏障功能都具有重要的作用。蛋白殼膜不僅在正常皮膚外部屏障功能起重要作用,而且對于角化上皮的形成也起重要作用。先前的研究證明了屏障的破壞會立即刺激脂質(zhì)和DNA的合成,導(dǎo)致表皮增生。 本實驗通過測定水楊酸對C57BL/6J小鼠受損表皮的經(jīng)皮水分丟失量(TEWL)恢復(fù)的作用,及對表皮分化相關(guān)蛋白INV、LOR、FLG及KLK7的影響,探討水楊酸對表皮屏障功能的作用,從而為臨床上水楊酸治療AD提供實驗依據(jù)。 方法：將C57BL/6J小鼠分成4組(1%水楊酸組、3%水楊酸組、基質(zhì)組和空白組),用膠帶粘貼的方法造成C57BL/6J小鼠皮膚屏障受損模型,分別外用不同的藥物(空白組不用任何藥物),用皮膚生理測試儀測量粘貼前及粘貼后0h、2h、4h、6h、12h、24h、48h和72h的TEWL。并且取不同時間點小鼠的皮損組織分別用Real-TimePCR的方法和免疫組化的方法檢測INV、LOR、FLG和KLK7四種蛋白的表達情況。其中TEWL的結(jié)果采用單因素方差分析的方法,結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示,所有P值均為雙側(cè)檢驗結(jié)果,以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.水楊酸對小鼠的TEWL的影響：皮膚屏障受損后,外用3%水楊酸乳膏組的TEWL下降的最明顯,其次為外用1%水楊酸乳膏組,之后為基質(zhì)組,空白組的TEWL下降的最不明顯,外用3%水楊酸乳膏組在4h、6h、12h、24h和48h時的TEWL與1%水楊酸乳膏組、基質(zhì)組、空白組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05或P0.01),外用1%水楊酸乳膏組與基質(zhì)組TEWL比較接近,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),外用1%水楊酸乳膏組和基質(zhì)組在4h、6h、12h、24h和48h時與空白組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)�；|(zhì)組在4h、6h、12h和24h時與空白組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。其中外用3%水楊酸乳膏組在6h、12h和24h時作用最明顯。 2.皮膚屏障修復(fù)率： 外用1%水楊酸乳膏組在屏障破壞后2h、4h、6h、12h、24h、48h和72h的皮膚屏障修復(fù)率分別是27.50%、44.80%、59.47%、73.47%、85.15%、90.71%、95.41%。 外用3%水楊酸乳膏組在屏障破壞后2h、4h、6h、12h、24h、48h和72h的皮膚屏障修復(fù)率分別是35%、62.34%、83.48%、90.84%、96.80%、96.67%、96.70%。 外用基質(zhì)組在屏障破壞后2h、4h、6h、2h、4h、48h和72h的皮膚屏障修復(fù)率分別是30.17%、47.88%、62.82%、73.11%、82.10%、87.51%、94.05%。 空白組在屏障破壞后2h、4h、6h、12h、24h、48h和72h的皮膚屏障修復(fù)率分別是20.99%、37.74%、48.08%、58.71%、74.62%、83.60%、93.63%。 外用3%水楊酸乳膏組在2h、4h、6h、12h、24h和48h皮膚屏障修復(fù)率高于1%水楊酸乳膏組、基質(zhì)組和空白組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。外用1%水楊酸乳膏組在4h、6h、12h和24h時皮膚屏障修復(fù)率高于空白組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)�；|(zhì)組的皮膚屏障修復(fù)率4h、6h、12h和24h時高于空白組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)�；|(zhì)組和1%水楊酸乳膏組皮膚屏障修復(fù)率比較相近,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3.Real-Time PCR的方法檢測水楊酸對小鼠受損皮膚中INV、LOR、FLG和KLK7的表達的影響：INV、LOR和FLG這三種蛋白在6h、12h和24h時mRNA的表達均為外用3%水楊酸乳膏組高于1%水楊酸乳膏組、基質(zhì)組和空白組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。INV、LOR和FLG這三種蛋白在6h、12h和24h時1%水楊酸乳膏組mRNA的表達高于基質(zhì)組和空白組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)�；|(zhì)組與空白組在各個時間點的mRNA的表達相似,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。INV、LOR和FLG這三種蛋白均為3%水楊酸乳膏組在12h時mRNA表達最明顯。在6h、12h和24h時KLK7mRNA表達均為外用3%水楊酸乳膏組低于1%水楊酸乳膏組、基質(zhì)組和空白組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6h、12h和24h時1%水楊酸乳膏組KLK7mRNA的表達低于基質(zhì)組和空白組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。基質(zhì)組與空白組在各個時間點的mRNA的表達相似,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3%水楊酸乳膏組klk7mRNA在12h時表達最不明顯。 4.免疫組化方法檢測水楊酸對INV、LOR、FLG、KLK7的表達的影響：12h時3%水楊酸乳膏組INV、LOR和FLG的表達高于基質(zhì)組和空白組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。12h時基質(zhì)組和空白組的INV、LOR和FLG的表達相似,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。12h時外用3%水楊酸乳膏組KLK7的表達低于基質(zhì)組和空白組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。12h時基質(zhì)組KLK7的表達與空白組相似,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 1、低濃度的水楊酸乳膏和基質(zhì)均具有減少屏障受損的皮膚的TEWL的作用,其中水楊酸乳膏減少TEWL的作用強于基質(zhì),而3%水楊酸乳膏作用最強,減少TEWL的效果最好。 2、低濃度的水楊酸乳膏具有促進INV、LOR和FLG的mRNA和蛋白的表達的作用,能夠增加角質(zhì)層的FLG、LOR和INV蛋白含量,同時能夠抑制KLK7mRNA和蛋白的表達,減少角質(zhì)層的KLK7蛋白含量,從而能夠增加角質(zhì)層的水合作用,使角質(zhì)層的修復(fù)增快,進而加快破壞的皮膚屏障的恢復(fù)速度。其中3%水楊酸乳膏的這種作用最明顯,效果最好。這也為臨床用低濃度的水楊酸乳膏治療皮膚屏障破壞的疾病提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R758.22

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 馬琳;申春平;;特應(yīng)性皮炎與皮膚屏障相關(guān)性研究進展[J];皮膚病與性病;2011年02期

2 陳小娥;朱文元;;皮膚的保濕機制研究進展[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2011年18期

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本文編號：1162481