本文關(guān)鍵詞：他扎羅汀與鹵米松對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞維A酸受體表達(dá)的影響

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【摘要】：研究背景與目的皮膚是人體最大的器官,具有屏障、吸收、感覺(jué)及內(nèi)分泌等重要功能,參與全身的多種功能活動(dòng)和維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,對(duì)機(jī)體的健康非常重要。角質(zhì)形成細(xì)胞是皮膚之表皮的主要構(gòu)成細(xì)胞,不但與表皮屏障功能正常發(fā)揮密切相關(guān),還與多種皮膚病的病理生理學(xué)改變密切相關(guān)。核受體是機(jī)體內(nèi)廣泛存在并具有重要調(diào)節(jié)功能的一大類細(xì)胞內(nèi)受體,迄今已發(fā)現(xiàn)一百余種核受體超家族成員。人們所熟知的糖皮質(zhì)激素受體(Glucocorticoid receptors,GRs)、維甲酸受體(Retinoic acid receptors,RARs)、維甲酸類X受體(Retinoid X receptors,RXRs)和維生素D3受體(Vitamin D3 receptors,VDRs)等均屬于核受體超家族的范疇。核受體與各自相對(duì)應(yīng)的反應(yīng)元件相識(shí)別并結(jié)合,進(jìn)而對(duì)靶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄調(diào)控,在機(jī)體發(fā)生發(fā)育和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。核受體在表皮中也有豐富的表達(dá)。眾多研究表明核激素受體在皮膚中也發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,如抑制表皮細(xì)胞增殖、調(diào)節(jié)角質(zhì)形成細(xì)胞分化、促進(jìn)細(xì)胞凋亡及參與炎癥過(guò)程等。銀屑病是皮膚科臨床上常見(jiàn)的慢性、炎癥性、復(fù)發(fā)性的皮膚疾病,以鱗屑性紅斑、丘疹及斑塊為主要臨床特征,其病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。尋常型銀屑病在病理上以表皮細(xì)胞過(guò)度增殖、異常分化等為主要特征。外用藥物是輕中度尋常型銀屑病的主要治療手段。外用激素、維甲酸類藥物、維生素D3衍生物以及上述藥物的聯(lián)合使用,已得到國(guó)內(nèi)外銀屑病治療指南的肯定。糖皮質(zhì)激素與維A酸均通過(guò)與其各自的受體結(jié)合而發(fā)揮藥理效應(yīng),鑒于核受體超家族成員間可能存在著一定程度的相互影響,當(dāng)外用激素與他扎羅汀聯(lián)合治療銀屑病時(shí),二者的治療效應(yīng)僅僅是簡(jiǎn)單的協(xié)同作用嗎?糖皮質(zhì)激素是否會(huì)對(duì)他汀羅汀的治療效應(yīng)產(chǎn)生影響呢?他扎羅汀的使用是否會(huì)引起角質(zhì)形成細(xì)胞出現(xiàn)配基依賴的受體表達(dá)下調(diào)呢?針對(duì)上述問(wèn)題,本實(shí)驗(yàn)以HaCaT角質(zhì)形成細(xì)胞為研究對(duì)象,以表皮中表達(dá)量最高的維A酸受體RAR-γ和RXR-α為主要研究指標(biāo),觀察不同濃度鹵米松和他扎羅汀作用對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞中RAR-γ和RXR-α表達(dá)的影響,以探討鹵米松對(duì)他扎羅汀治療銀屑病效應(yīng)的可能影響。(9)基金項(xiàng)目:中華醫(yī)學(xué)會(huì)皮膚性病學(xué)分會(huì)銀屑病研究基金資助項(xiàng)目(張斌,2014年)研究方法與結(jié)果1.cell counting kit-8檢測(cè)不同濃度鹵米松、他扎羅汀、鹵米松聯(lián)合他扎羅汀對(duì)體外培養(yǎng)的人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT細(xì)胞)增殖的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),鹵米松、他扎羅汀均能抑制角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖,呈濃度依賴性效應(yīng);鹵米松聯(lián)合他扎羅汀對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖能力的抑制效應(yīng)強(qiáng)于單用他扎羅汀或(和)單用鹵米松。2.Real-time PCR法檢測(cè)不同濃度鹵米松、他扎羅汀、鹵米松聯(lián)合他扎羅汀作用對(duì)體外培養(yǎng)人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞維A酸受體RAR-γ和RXR-α在mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),鹵米松作用角質(zhì)形成細(xì)胞后RAR-γ和RXR-α的mRNA表達(dá)量增加;他扎羅汀作用于角質(zhì)形成細(xì)胞后,RAR-γ和RXR-α的mRNA表達(dá)量降低;鹵米松聯(lián)合他扎羅汀作用角質(zhì)形成細(xì)胞后,RAR-γ和RXR-α的mRNA表達(dá)量12h增加,在24h RAR-γ和RXR-α的mRNA表達(dá)量卻降低。3.Western Blot法檢測(cè)不同濃度鹵米松、他扎羅汀、鹵米松聯(lián)合他扎羅汀作用對(duì)體外培養(yǎng)人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞RAR-γ和RXR-α蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),鹵米松作用角質(zhì)形成細(xì)胞后,RAR-γ和RXR-α的蛋白表達(dá)量均增加;他扎羅汀作用角質(zhì)形成細(xì)胞12h后RAR-γ和RXR-α的蛋白表達(dá)量增加,而24h后RAR-γ和RXR-α的蛋白表達(dá)量降低;鹵米松聯(lián)合他扎羅汀作用,對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞RAR-γ和RXR-α蛋白的表達(dá)無(wú)明顯影響。結(jié)論1.第三代維A酸類藥物他扎羅汀與強(qiáng)效激素鹵米松均能抑制角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖。鹵米松聯(lián)合他扎羅汀對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的抑制效應(yīng)強(qiáng)于單獨(dú)使用他扎羅汀或(和)單獨(dú)使用鹵米松。這為臨床上聯(lián)合使用鹵米松與他扎羅汀治療銀屑病提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。2.他扎羅汀作用于角質(zhì)形成細(xì)胞后,可下調(diào)維A酸受體RAR-γ和RXR-α的表達(dá)。這提示他扎羅汀作用于角質(zhì)形成細(xì)胞在短期內(nèi)可能引發(fā)配體誘導(dǎo)的受體表達(dá)下調(diào)。3.鹵米松作用角質(zhì)形成細(xì)胞后,可上調(diào)維A酸受體RAR-γ和RXR-α表達(dá)。這提示鹵米松上調(diào)維A酸受體表達(dá)的效應(yīng),在一定程度上可增強(qiáng)他扎羅汀對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的作用。4.鹵米松聯(lián)合他扎羅汀作用,對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞RAR-γ和RXR-α蛋白的表達(dá)無(wú)明顯影響。這為兩者聯(lián)合用藥的可行性提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R751

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 鄭志忠;;尋常性銀屑病的常用外用藥物治療[J];臨床皮膚科雜志;2012年04期

2 郁博;何威;張斌;楊玲;吳軍;;地塞米松對(duì)HaCaT細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體α表達(dá)的影響[J];臨床皮膚科雜志;2008年04期

3 楚瑞琦;彭振輝;譚升順;王詠梅;丑廣程;劉春梅;趙建偉;;他扎羅汀對(duì)培養(yǎng)角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)RAR和RXR mRNA的影響[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;2008年01期

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本文編號(hào)：1146686