高表達(dá)OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1細(xì)胞能有效活化小鼠抗原提呈細(xì)胞
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【摘要】:目的:在細(xì)胞水平上分析高表達(dá)OAZI-1的小鼠B16-F1細(xì)胞能否活化抗原提呈細(xì)胞,促進(jìn)抗原提呈細(xì)胞對腫瘤的吞噬以及抗原遞呈作用。方法:轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒后,用RT-PCR和Western blot技術(shù)篩選獲得高表達(dá)OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1腫瘤細(xì)胞(B16/OAZI-1),同時構(gòu)建轉(zhuǎn)染空載體質(zhì)粒p CDNA3.1(+)的小鼠黑色素瘤B16-F1腫瘤細(xì)胞(B16/3.1)用作實驗對照。制備BALB/c小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、脾淋巴細(xì)胞和骨髓來源的樹突狀細(xì)胞(DC),將B16/OAZI-1和B16/3.1分別與小鼠腹腔巨噬細(xì)胞和DC按照1∶5和1∶1的細(xì)胞個數(shù)比例混合培養(yǎng)4 h,流式細(xì)胞術(shù)檢測巨噬細(xì)胞和DC對腫瘤細(xì)胞的吞噬率。將B16/OAZI-1和B16/3.1分別與小鼠DC按照1∶5的細(xì)胞個數(shù)比例混合培養(yǎng)24 h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測DC表面分子CD40、CD80和CD86表達(dá)的變化。將經(jīng)腫瘤細(xì)胞活化的DC與小鼠脾淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)24 h后,ELISA檢測細(xì)胞上清中IFN-γ的含量。結(jié)果:巨噬細(xì)胞和DC對B16/OAZI-1細(xì)胞吞噬率分別為24.7%和53.9%,與B16/3.1細(xì)胞(8.2%和13.8%)相比有較顯著性差異。與B16/3.1細(xì)胞相比,DC細(xì)胞與B16/OAZI-1細(xì)胞混合培養(yǎng)24 h后,成熟DC細(xì)胞表面分子標(biāo)志CD40、CD80、CD86的表達(dá)分別從24.2%、20.8%和16.4%增加到46.8%、32.5%和36.1%(P0.05);經(jīng)B16/OAZI-1細(xì)胞活化的DC與小鼠脾淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)后,細(xì)胞上清中IFN-γ的含量為32.9 pg/ml,與B16/3.1細(xì)胞處理的DC相比(15.1 pg/ml)有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:高表達(dá)OAZI-1的腫瘤細(xì)胞能更有效地被巨噬細(xì)胞和DC細(xì)胞吞噬,且這一過程能誘導(dǎo)DC細(xì)胞成熟活化,成熟的DC細(xì)胞將腫瘤抗原遞呈給T淋巴細(xì)胞并誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化,從而激活機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答。
【作者單位】: 三峽大學(xué)分子生物學(xué)研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81372265)
【分類號】:R739.5
【正文快照】: 多胺是廣泛存在于生物組織中的一類帶多價正電荷的脂肪族小分子化合物,高多胺含量是腫瘤快速生長所必需的條件之一[1]。鳥氨酸脫羧酶(Orni-thine decarboxylase,ODC)是多胺合成的限速酶,其活性對調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)多胺水平起重要作用。細(xì)胞內(nèi)同時存在一種ODC抑制蛋白,即鳥氨酸脫羧酶
【共引文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條
1 何玲;韓鈺;張軍;王艷林;;高表達(dá)OAZI-1增加小鼠黑素瘤B16-F1細(xì)胞對多胺類似物CPENSpm的敏感性[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2011年16期
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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條
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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條
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【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 趙萬洲,劉紅巖,徐少鋒,Frank Entschladen,Bernd Niggemann,KurtS.Zaenker,韓銳;小鼠黑色素瘤某些生物學(xué)特性與其侵襲潛能的相關(guān)性研究[J];中華腫瘤雜志;2001年04期
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5 王光鳳;肖t,
本文編號:1144440
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