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高表達(dá)OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1細(xì)胞能有效活化小鼠抗原提呈細(xì)胞

發(fā)布時(shí)間:2017-11-05 13:34

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【摘要】:目的:在細(xì)胞水平上分析高表達(dá)OAZI-1的小鼠B16-F1細(xì)胞能否活化抗原提呈細(xì)胞,促進(jìn)抗原提呈細(xì)胞對(duì)腫瘤的吞噬以及抗原遞呈作用。方法:轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒后,用RT-PCR和Western blot技術(shù)篩選獲得高表達(dá)OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1腫瘤細(xì)胞(B16/OAZI-1),同時(shí)構(gòu)建轉(zhuǎn)染空載體質(zhì)粒p CDNA3.1(+)的小鼠黑色素瘤B16-F1腫瘤細(xì)胞(B16/3.1)用作實(shí)驗(yàn)對(duì)照。制備BALB/c小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、脾淋巴細(xì)胞和骨髓來(lái)源的樹突狀細(xì)胞(DC),將B16/OAZI-1和B16/3.1分別與小鼠腹腔巨噬細(xì)胞和DC按照1∶5和1∶1的細(xì)胞個(gè)數(shù)比例混合培養(yǎng)4 h,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)巨噬細(xì)胞和DC對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬率。將B16/OAZI-1和B16/3.1分別與小鼠DC按照1∶5的細(xì)胞個(gè)數(shù)比例混合培養(yǎng)24 h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC表面分子CD40、CD80和CD86表達(dá)的變化。將經(jīng)腫瘤細(xì)胞活化的DC與小鼠脾淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)24 h后,ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清中IFN-γ的含量。結(jié)果:巨噬細(xì)胞和DC對(duì)B16/OAZI-1細(xì)胞吞噬率分別為24.7%和53.9%,與B16/3.1細(xì)胞(8.2%和13.8%)相比有較顯著性差異。與B16/3.1細(xì)胞相比,DC細(xì)胞與B16/OAZI-1細(xì)胞混合培養(yǎng)24 h后,成熟DC細(xì)胞表面分子標(biāo)志CD40、CD80、CD86的表達(dá)分別從24.2%、20.8%和16.4%增加到46.8%、32.5%和36.1%(P0.05);經(jīng)B16/OAZI-1細(xì)胞活化的DC與小鼠脾淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)后,細(xì)胞上清中IFN-γ的含量為32.9 pg/ml,與B16/3.1細(xì)胞處理的DC相比(15.1 pg/ml)有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:高表達(dá)OAZI-1的腫瘤細(xì)胞能更有效地被巨噬細(xì)胞和DC細(xì)胞吞噬,且這一過程能誘導(dǎo)DC細(xì)胞成熟活化,成熟的DC細(xì)胞將腫瘤抗原遞呈給T淋巴細(xì)胞并誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化,從而激活機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答。
【作者單位】: 三峽大學(xué)分子生物學(xué)研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81372265)
【分類號(hào)】:R739.5
【正文快照】: 多胺是廣泛存在于生物組織中的一類帶多價(jià)正電荷的脂肪族小分子化合物,高多胺含量是腫瘤快速生長(zhǎng)所必需的條件之一[1]。鳥氨酸脫羧酶(Orni-thine decarboxylase,ODC)是多胺合成的限速酶,其活性對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)多胺水平起重要作用。細(xì)胞內(nèi)同時(shí)存在一種ODC抑制蛋白,即鳥氨酸脫羧酶

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 何玲;韓鈺;張軍;王艷林;;高表達(dá)OAZI-1增加小鼠黑素瘤B16-F1細(xì)胞對(duì)多胺類似物CPENSpm的敏感性[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年16期

2 陳健霞;榮新洲;樊桂成;李松澤;李慶輝;;不同濃度腐胺對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年05期

3 Jennifer M.Bratt;Amir A.Zeki;Jerold A.Last;Nicholas J.Kenyon;;Competitive metabolism of L-arginine:arginase as a therapeutic target in asthma[J];Journal of Biomedical Research;2011年05期

4 龔裴培;韓鈺;張賀吉;張軍;王艷林;;多胺類似物四丁基丙二胺對(duì)人A549肺癌細(xì)胞的影響[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2012年21期

5 吳兵平;王星;馬文麗;張思毅;鄭文嶺;姜立;;OAZ1基因誘導(dǎo)慢粒白血病K562細(xì)胞向成熟紅系方向分化[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2013年04期

6 楊建林;韓鈺;王凱;張賀吉;張軍;王艷林;;多胺類似物BENS和TBP對(duì)胰腺癌PANC-1細(xì)胞增殖、凋亡和遷移能力的影響[J];生命科學(xué)研究;2014年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 顏彬;IL-6聯(lián)合G-CSF通過調(diào)控中性粒細(xì)胞的脫顆粒功能誘導(dǎo)其產(chǎn)生促瘤活性[D];華中科技大學(xué);2013年

2 胥伶杰;自噬反應(yīng)在百草枯致急性呼吸窘迫綜合征和肺泡上皮細(xì)胞死亡過程中的作用及其機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 吳兵平;OAZ1基因?qū)β0籽562細(xì)胞紅系分化及凋亡作用的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

2 王義兵;MiR-221沉默PUMA在膀胱癌免疫逃逸中作用與機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2013年

3 王曦;B7-H1的表達(dá)下調(diào)影響腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及凋亡的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 秦啟智;不同來(lái)源的中性粒細(xì)胞對(duì)腫瘤生長(zhǎng)功能轉(zhuǎn)變機(jī)制的初步探討[D];華中科技大學(xué);2012年

5 李小勤;篩選和鑒定抗卵巢癌活性六肽的靶點(diǎn)蛋白[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

6 倪修文;激發(fā)型CD28單抗參與的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用研究[D];蘇州大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙萬(wàn)洲,劉紅巖,徐少鋒,Frank Entschladen,Bernd Niggemann,KurtS.Zaenker,韓銳;小鼠黑色素瘤某些生物學(xué)特性與其侵襲潛能的相關(guān)性研究[J];中華腫瘤雜志;2001年04期

2 房東亮;馬躍美;趙秀蘭;孫濤;劉艷榮;王倩;田原;;慢性炎癥對(duì)小鼠黑色素瘤血管生成的影響[J];天津醫(yī)藥;2013年03期

3 成秉辰;;千里光總堿對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠黑色素瘤細(xì)胞增殖的影響[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2009年01期

4 何永林;楊春;張黎;徐蕾;王瑜偉;;攜帶顆粒溶素活性肽基因的減毒沙門菌對(duì)小鼠黑色素瘤的治療作用[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2011年12期

5 王光鳳;肖t,

本文編號(hào):1144440


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