本文關(guān)鍵詞：藏雪蓮水提取物減輕UVB輻射后HaCaT細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 藏雪蓮水提取物 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 中波紫外線 細(xì)胞凋亡

【摘要】：目的:研究藏雪蓮(Saussurea medusa Maxim.)水提取物對中波紫外線(ultraviolet B,UVB)照射人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)后細(xì)胞凋亡影響研究。方法:將HaCaT細(xì)胞分為空白組、UVB照射組(30m J/cm2)、藏雪蓮水提取物組(30m J/cm2UVB+10mg/m L藏雪蓮水提取物組)。臺盼藍(lán)染色觀察細(xì)胞形態(tài)及死亡情況;MTS法檢測細(xì)胞增殖活性;酶標(biāo)法測定超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活力、細(xì)胞丙二醛(MDA)及谷胱甘肽(GSH)含量;流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率、線粒體膜電位及細(xì)胞內(nèi)鈣離子(Ca2+)含量;Elisa法測定B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)表達(dá),Western Blotting及免疫熒光法檢測Bcl-2、Bax、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:藏雪蓮水提取物明顯恢復(fù)HaCaT細(xì)胞形態(tài),降低細(xì)胞藍(lán)染數(shù)量,改善細(xì)胞死亡碎片及脫片現(xiàn)象,促進(jìn)HaCaT增殖,降低SOD、CAT活性及GSH含量,增加MDA含量(P0.05),降低UVB輻射后HaCaT細(xì)胞凋亡及細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,升高線粒體膜電位,能夠升高UVB輻射后的Bcl-2蛋白,降低Bax蛋白(P0.05)及Caspase-3的表達(dá)。結(jié)論:藏雪蓮水提取物能夠通過降低HaCaT細(xì)胞凋亡來減輕UVB輻射后HaCaT細(xì)胞的氧化損傷。
【關(guān)鍵詞】：藏雪蓮水提取物 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 中波紫外線 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R758.1
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 主要符號對照表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料和方法12-20
• 2.1 材料12-13
• 2.1.1 細(xì)胞株12
• 2.1.2 主要儀器12
• 2.1.3 主要試劑12-13
• 2.2 主要試劑和溶液配制13-14
• 2.2.1 藏雪蓮水提物的提取13-14
• 2.2.2 完全培養(yǎng)基的制備14
• 2.2.3 細(xì)胞凍存液的制備14
• 2.2.4 Western Blotting相關(guān)溶液的制備14
• 2.2.5 免疫熒光相關(guān)溶液的配制14
• 2.3 試驗(yàn)方法14-18
• 2.3.1 Ha Ca T細(xì)胞的培養(yǎng)14-15
• 2.3.2 實(shí)驗(yàn)分組15
• 2.3.3 臺盼藍(lán)染色15
• 2.3.4 MTS法檢測細(xì)胞增殖15
• 2.3.5 SOD、GSH、CAT、MDA檢測15
• 2.3.6 細(xì)胞凋亡檢測15-16
• 2.3.7 細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測16
• 2.3.8 線粒體膜電位(Δψ)檢測16
• 2.3.9 Elisa法檢測Bax、Bcl-216-17
• 2.3.10 Western Blotting檢測17-18
• 2.3.11 免疫熒光檢測18
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)處理18-19
• 2.5 技術(shù)路線19-20
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-27
• 3.1 臺盼藍(lán)染色20
• 3.2 MTS法20-21
• 3.3 SOD、GSH、CAT、MDA檢測21-22
• 3.4 細(xì)胞凋亡檢測22-23
• 3.5 細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測23
• 3.6 線粒體膜電位(Δψ)檢測23-24
• 3.7 Elisa法檢測Bcl-2 蛋白、Bax蛋白24-25
• 3.8 Western Blotting檢測25-26
• 3.9 免疫熒光染色26-27
• 第4章 討論27-30
• 第5章 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-33
• 致謝33-34
• 作者簡介34-35
• 綜述35-40
• 參考文獻(xiàn)38-40

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 寧鵬;楊太東;趙希國;;藏雪蓮水提取物對小白鼠組織中一氧化氮含量的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年29期

2 李宗輝;;藏雪蓮水提取物對小白鼠組織內(nèi)MDA含量的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年35期

3 寧鵬;楊雪梅;;藏雪蓮水提取物對小白鼠組織中GSH-PX活力的影響[J];青海大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年04期

4 寧鵬;李引乾;;藏雪蓮水提取物對小白鼠耐受力和免疫功能的影響[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2008年09期

5 ;[J];;年期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王麗雯;藏雪蓮水提取物減輕UVB輻射后HaCaT細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[D];青海大學(xué);2016年

2 寧鵬;藏雪蓮和牦牛胎盤抗疲勞、抗缺氧和抗氧化作用的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

，

本文編號：1132353