本文關(guān)鍵詞：mGluR6通過(guò)ERK通路調(diào)節(jié)人角質(zhì)形成細(xì)胞的吞噬功能

  更多相關(guān)文章： 代謝型谷氨酸受體6 角質(zhì)形成細(xì)胞 吞噬 細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶

【摘要】：目的：探討代謝型谷氨酸受體6調(diào)節(jié)人角質(zhì)形成細(xì)胞吞噬作用的分子機(jī)制。方法：1.人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞系（HaCaT細(xì)胞）的體外培養(yǎng).凍存和復(fù)蘇。 2.Western blot法檢測(cè)HaCaT細(xì)胞中代謝型谷氨酸受體6（metabotropic glutamate receptor6，mGluR6）蛋白水平的表達(dá)。 3.構(gòu)建慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系：將下調(diào)mGluR6 基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染至人角質(zhì)形成細(xì)胞系，并建立穩(wěn)定低表達(dá)細(xì)胞系（HaCaT-mGluR6），同時(shí)建立空病毒載體對(duì)照組（HaCaTNC- ）。 4.Western blot法檢測(cè)HaCaT細(xì)胞中mGluR6 的敲低效率。 5.運(yùn)用激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞骨架蛋白F-actin在下調(diào)mGluR6的HaCaT細(xì)胞中的分布及變化。 6.Western blot法檢測(cè)HaCaT.HaCaTNC-.HaCaTm-GluR- 6 各組細(xì)胞中pERK.ERK水平的表達(dá)。 7.Western blot法檢測(cè)HaCaT.HaCaTNC-.HaCaTm-GluR-6各組細(xì)胞中p Ca M KII.Ca MKII水平的表達(dá)。 8.Western blot法檢測(cè)HaCaT.HaCaTNC-.HaCaTm-GluR-6 各組細(xì)胞中pMLC.MLC水平的表達(dá)。結(jié)果：1.HaCaT細(xì)胞表達(dá)mGluR6且表達(dá)量豐富。 2.成功構(gòu)建穩(wěn)定下調(diào)mGluR6的HaCaT細(xì)胞，敲低效率達(dá)到~80%。 3.運(yùn)用激光共聚焦顯微鏡觀察到下調(diào)mGluR6 的HaCaT細(xì)胞與對(duì)照組相比，細(xì)胞骨架蛋白F-actin重新分布，細(xì)胞周邊表達(dá)量較少，核周增多。 4.下調(diào)mGluR6 的HaCaT細(xì)胞中p ERK的表達(dá)量較對(duì)照組降低，ERK的表達(dá)量大致相同，pERK/ERK的比值明顯降低。 5.下調(diào)mGluR6 的HaCaT細(xì)胞中pCaM KII的表達(dá)量較對(duì)照組降低，Ca M KII的表達(dá)量大致相同，pCaM KII/CaM KII的比值明顯降低。 6.下調(diào)mGluR6 的HaCaT細(xì)胞中p MLC的表達(dá)量較對(duì)照組降低，，MLC的表達(dá)量大致相同，pMLC/MLC的比值明顯降低。結(jié)論：1.人角質(zhì)形成細(xì)胞系表達(dá)mGluR6。 2.mGluR6參與調(diào)節(jié)人角質(zhì)形成細(xì)胞骨架蛋白F-actin的重新分布。 3.mGluR6可能通過(guò)CaM KII/ERK/MLC信號(hào)通路調(diào)節(jié)人角質(zhì)形成細(xì)胞的吞噬功能。
【關(guān)鍵詞】：代謝型谷氨酸受體6 角質(zhì)形成細(xì)胞 吞噬 細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R751
【目錄】：

• 論文一 光動(dòng)力療法治療多發(fā)性光線性角化病合并鮑溫病一例6-12
• 查體6
• 診斷6
• 治療6-9
• 討論9-11
• 參考文獻(xiàn)11-12
• 論文二 mGluR6通過(guò)ERK通路調(diào)節(jié)人角質(zhì)形成細(xì)胞的吞噬功能12-31
• 摘要12-14
• ABSTRACT14-16
• 前言16-17
• 材料與方法17-21
• 結(jié)果21-25
• 討論25-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述 表皮中黑素小體的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究31-38
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況38-39
• 致謝39-40

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