發(fā)布時(shí)間：2017-10-20 12:36

  本文關(guān)鍵詞：中國(guó)人群尋常型魚(yú)鱗病及尋常型銀屑病Filaggrin突變研究

  更多相關(guān)文章： 魚(yú)鱗病 filaggrin(FLG) 基因突變 銀屑病 filaggrin(FLG) 基因突變

【摘要】：尋常型魚(yú)鱗病(Ichthyosis Vulgaris, IV, OMIM#146700)是一種常見(jiàn)的遺傳性角化障礙性皮膚病,發(fā)病率在1：5300到1：250之間,通常在出生后一年內(nèi)發(fā)病,好發(fā)于四肢伸側(cè)及背部,以小腿最為明顯。Ⅳ臨床異質(zhì)性較大,病情輕者僅表現(xiàn)為冬季皮膚干燥、粗糙,表面有細(xì)碎的糠樣鱗屑；典型的皮損表現(xiàn)為灰褐色或深褐色菱形或多角形鱗屑,鱗屑中央固著,邊緣游離,如魚(yú)鱗狀；其他臨床特征還表現(xiàn)為掌跖線狀裂、掌紋加深、遺傳性過(guò)敏癥和熱耐受不良。 FLG失去功能的突變被公認(rèn)為是Ⅳ的致病因素。到目前為止,在尋常型魚(yú)鱗病患者中報(bào)道的FLG突變種類已接近30種。Filaggrin基因(OMIM#135940)位于1q21.3,由3個(gè)外顯子組成,3號(hào)外顯子長(zhǎng)12.7-14.7kb,由10-12個(gè)幾乎完全一樣的重復(fù)區(qū)組成,編碼幾乎整個(gè)profilaggrin,是人類基因組外最大的外顯子之一；Filaggrin蛋白由S100鈣離子結(jié)合區(qū)、B結(jié)構(gòu)域、2個(gè)FLG不完全重復(fù)區(qū)、10-12個(gè)FLG重復(fù)區(qū)和C-端組成。C-末端結(jié)構(gòu)域是profilaggrin水解成filaggrin單體所必需的結(jié)構(gòu),FLG失去功能的突變使profilaggrin缺失C-末端結(jié)構(gòu)域而無(wú)法正常水解,最終使表皮顆粒層filaggrin單體減少或缺失。 為了鑒定3個(gè)尋常型魚(yú)鱗病家系的致病變異,本研究首先對(duì)家系的先證者開(kāi)展了FLG突變研究,結(jié)果在家系1的先證者中鑒定了2個(gè)未見(jiàn)報(bào)道的變異(c.477-478insA, c.6218-6219delAA)和一個(gè)外來(lái)的已知致病變異c.3321delA。隨后對(duì)家系1進(jìn)行疾病共分離研究,發(fā)現(xiàn)c.477-478insA與家系1疾病共分離；c.6218-6219delAA是一個(gè)新發(fā)突變；c.3321delA與家系中外來(lái)的一支共分離。為了進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)果,我們將變異c.477-478insA與家系進(jìn)行了連鎖分析,結(jié)果得到LOD值大于1的結(jié)果,支持該位點(diǎn)與疾病連鎖；同時(shí)使用TA克隆測(cè)序方法對(duì)c.6218-6219delAA進(jìn)行了驗(yàn)證,結(jié)果證實(shí)了該位點(diǎn)是家系1先證者新發(fā)的變異；這2個(gè)突變?cè)?00個(gè)正常對(duì)照中均未檢測(cè)到,進(jìn)一步證明了它們是致病變異。此外,在家系2和3中均鑒定到了已知致病變異c.3321delA。這些結(jié)果豐富了中國(guó)人群FLG突變譜。 第二部分中國(guó)人群尋常型銀屑病Filaggrin突變研究 銀屑病(Psoriasis, OMIM#177900),是一種以紅斑、鱗屑為主要表現(xiàn)的慢性炎癥性、免疫介導(dǎo)的皮膚疾病。臨床可分為四種亞型：尋常型銀屑病、關(guān)節(jié)型銀屑病、膿皰型銀屑病及紅皮病型銀屑病,其中尋常型銀屑病為最常見(jiàn)的類型。因人種遺傳背景不同該病的人群患病率為0.1%～3%,中國(guó)漢族人發(fā)病率為0.123%。 銀屑病的具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,已有研究表明：環(huán)境、遺傳因素和免疫炎癥反應(yīng)均在其發(fā)生和病理過(guò)程中起到十分重要的作用。通過(guò)全基因組掃描和連鎖分析至少已鑒定了9個(gè)銀屑病易感位點(diǎn)(PSORS1-9)。Filaggrin (FLG)是位于易感區(qū)間1q21的一個(gè)重要候選基因。FLG自發(fā)突變體小鼠(5303delA)皮損部位出現(xiàn)類似銀屑病的炎性特征,其他研究小組在銀屑病患者皮膚中檢測(cè)到filaggrin表達(dá)量和表達(dá)模式都發(fā)生了顯著變化,提示FLG可能與銀屑病的發(fā)生相關(guān)。為了證明FLG與銀屑病的相關(guān)性,研究小組分別在德國(guó)、愛(ài)爾蘭和英國(guó)人群銀屑病患者中開(kāi)展的關(guān)聯(lián)研究,結(jié)果顯示FLG突變與銀屑病的發(fā)生無(wú)關(guān)。到目前為止,還沒(méi)有遺傳學(xué)證據(jù)表明FLG與銀屑病的發(fā)生有關(guān)。 本課題組許曉娟博士2009年采集到1個(gè)來(lái)自湖南岳陽(yáng)的家系,這個(gè)家系的特點(diǎn)是銀屑病與魚(yú)鱗病患者共存：先證者表現(xiàn)為典型的銀屑病癥狀,而先證者的外婆和姑姑為魚(yú)鱗病患者。這個(gè)家系提示銀屑病與魚(yú)鱗病可能存在共同的發(fā)病機(jī)制。許曉娟隨后對(duì)這個(gè)特殊的銀屑病家系進(jìn)行了FLG突變研究,發(fā)現(xiàn)先證者攜帶FLG p.K4022X純合突變,而家系的魚(yú)鱗病患者攜帶p.K4022X雜合突變,這個(gè)結(jié)果提示我們p.K4022X的純合突變可能導(dǎo)致銀屑病的發(fā)生。 本研究為了進(jìn)一步明確FLG與銀屑病易感性的關(guān)系,我們首先在441例患者和500個(gè)正常對(duì)照中針對(duì)p.K4022X進(jìn)行了突變檢測(cè),結(jié)果檢測(cè)到了2例患者攜帶p.K4022X的純合改變,而在正常人中未發(fā)現(xiàn)純合改變,提示純合突變可能導(dǎo)致銀屑病的發(fā)生。另外分別在29例患者(6.6%)和15個(gè)正常對(duì)照(3%)中檢測(cè)到了p.K4022X的雜合改變。隨后我們開(kāi)展了p.K4022X病例-對(duì)照關(guān)聯(lián)研究,結(jié)果顯示p.K4022X在441例銀屑病患者和500個(gè)對(duì)照樣本間的基因型頻率和等位基因頻率比較的P值分別為0.011和0.002(p0.05),說(shuō)明差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)相對(duì)危險(xiǎn)度(OR)大于1,且95%可信區(qū)間下限大于1(OR=2.552(95%CI=1.377-4.731)),提示p.K4022X是中國(guó)人群銀屑病發(fā)生的危險(xiǎn)因素。 其次,為了進(jìn)一步研究FLG突變與銀屑病的關(guān)系,我們分析了441例患者的整個(gè)FLG編碼區(qū)序列,發(fā)現(xiàn)了5個(gè)無(wú)義或移碼突變：一個(gè)未見(jiàn)報(bào)道的無(wú)義突變(p.W2583X)和4個(gè)在尋常型魚(yú)鱗病或特異性皮炎中報(bào)道過(guò)的突變(p.R826X, c.3321delA, p.Q2417X, c.7945delA)。 此外,我們?cè)阢y屑病患者中還鑒定了18個(gè)錯(cuò)義突變。其中p.E2652D在2個(gè)銀屑�。~(yú)鱗病共存的家系中都鑒定到,2個(gè)家系中3個(gè)銀屑病患者均攜帶該純合突變,而2個(gè)魚(yú)鱗病患者和3個(gè)表型正常的個(gè)體攜帶該雜合變異,提示p.E2652D的純合突變可能導(dǎo)致銀屑病的發(fā)生。 這些結(jié)果提示使FLG失去功能的純合突變導(dǎo)致銀屑病的可能性大。同時(shí),純合的錯(cuò)義突變也可能導(dǎo)致銀屑病的發(fā)生。這是首次在遺傳學(xué)上證明了FLG與銀屑病的相關(guān)性,為中國(guó)人群銀屑病發(fā)生機(jī)制的深入研究奠定了科學(xué)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：魚(yú)鱗病 filaggrin(FLG) 基因突變 銀屑病 filaggrin(FLG) 基因突變
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R758.52;R758.63;R394
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-13
• 目錄13-15
• 第一章 三個(gè)中國(guó)尋常型魚(yú)鱗病家系Filaggrin突變研究15-51
• 前言15-19
• 1. 研究對(duì)象19-21
• 2. 實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑、耗材21-23
• 2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器21-22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材22-23
• 3 實(shí)驗(yàn)方法23-45
• 3.1 標(biāo)本采集23
• 3.2 外周血gDNA抽提23-24
• 3.3 gDNA原液的處理24-25
• 3.4 gDNA濃度標(biāo)準(zhǔn)化25
• 3.5 FLG引物設(shè)計(jì)與合成25-27
• 3.6 PCR擴(kuò)增27-35
• 3.7 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)35-37
• 3.8 測(cè)序37-38
• 3.9 疾病共分離研究38
• 3.10 TA克隆測(cè)序38-42
• 3.11. 連鎖分析42-44
• 3.12 正常人群篩查44-45
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果45-47
• 4.1 家系1突變篩查結(jié)果45
• 4.2 家系1疾病共分離研究結(jié)果45
• 4.3 TA克隆測(cè)序結(jié)果45-47
• 4.4 連鎖分析結(jié)果47
• 4.5 家系2和家系3突變篩查結(jié)果47
• 4.6 正常對(duì)照突變鑒定結(jié)果47
• 5 分析和討論47-50
• 6 結(jié)論50-51
• 第二章 中國(guó)人群尋常型銀屑病Filaggrin突變研究51-79
• 前言51-62
• 1 研究對(duì)象62-63
• 2 實(shí)驗(yàn)方法63-64
• 3 結(jié)果分析64-65
• 3.1 測(cè)序結(jié)果分析64
• 3.2 p.K4022X突變分析64
• 3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析64-65
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果65-74
• 4.1 p.K4022X測(cè)序結(jié)果65
• 4.2 p.K4022X統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果65-66
• 4.3 無(wú)義/移碼突變及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果66-71
• 4.4 錯(cuò)義突變71-72
• 4.5 p.R501X和c.2282de14在中國(guó)人群的突變研究結(jié)果72-73
• 4.6 基因芯片分型數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)分析結(jié)果73-74
• 5 分析和討論74-78
• 6 結(jié)論78-79
• 參考文獻(xiàn)79-87
• 綜述87-111
• 參考文獻(xiàn)102-111
• 攻讀學(xué)位期間主要的研究成果111-113
• 致謝113

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1 周鳴岐;;中醫(yī)藥治療魚(yú)鱗病70例療效觀察[J];中醫(yī)雜志;1980年08期

2 黃永昌;;當(dāng)歸飲子治愈魚(yú)鱗病介紹[J];中醫(yī)雜志;1985年06期

3 王珍;奇凈康治療尋常型銀屑病20例報(bào)告[J];海南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1995年01期

4 徐愛(ài)莉,鄧列華;鈣泊三醇軟膏治療尋常型銀屑病的組織病理改變[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào);2004年06期

5 李巍;;遺傳咨詢[J];遺傳;2007年12期

6 任波,趙斌,陳惠蘭,王春,吳宏,吳懷安,陳衛(wèi)國(guó),曾憲昌,祝逸民;女性X連鎖隱性魚(yú)鱗病伴發(fā)Turner綜合征遺傳學(xué)探討[J];遺傳;1991年02期

7 武守山,李艷華,趙亞龍,趙淑賢,郭青梅;尋常型銀屑病遺傳度的研究[J];遺傳;1997年02期

8 王培光!230022合肥,張學(xué)軍!230022合肥,楊森!230022合肥,王再興!230022合肥,楊春俊!230022合肥;從牛舌中提取尋常型天皰瘡抗原的方法及其應(yīng)用[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2001年01期

9 寧蔚夏;;天賜人類的“冷卻劑”——排汗[J];生命世界;2008年08期

10 劉俊杰;;CO_2激光治療尖銳濕疣123例報(bào)告[J];西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1992年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊濤;劉平;馮愛(ài)平;楊擎宇;陳清華;徐寒陽(yáng);崔小妞;代小華;劉靜宇;;尋常型魚(yú)鱗病filaggrin突變?cè)谥袊?guó)人群中的檢測(cè)與分析[A];基因開(kāi)啟未來(lái)：新時(shí)代的遺傳學(xué)與科技進(jìn)步——湖北省遺傳學(xué)會(huì)第八次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2009年

2 劉翠杰;陳明玉;曹瑞華;王溪濤;王海燕;;尋常型魚(yú)鱗病合并進(jìn)行性肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(疑難病例討論)[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 ;尋常型魚(yú)鱗病合并進(jìn)行性肌營(yíng)養(yǎng)不良癥?(疑難病例)[A];2009全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

4 吳燕;王小平;;一例新生兒魚(yú)鱗病的護(hù)理[A];全國(guó)兒科護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2002年

5 張錫寶;田歆;李雪梅;周欣;何玉清;羅權(quán);張三泉;羅育武;劉玉梅;崔麗;;阿維A治療大皰性魚(yú)鱗病前后形態(tài)學(xué)比較研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集[C];2010年

6 袁光雷;劉紅芳;梅元武;;神經(jīng)皮膚魚(yú)鱗病家系研究[A];湖北省神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

7 鄒鋒;郝飛;宋志強(qiáng);楊希川;鐘白玉;葉慶佾;;層板狀魚(yú)鱗病1例[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

8 安金剛;肖生祥;;表皮分化復(fù)合體在尋常型魚(yú)鱗病發(fā)病中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

9 裴世澄;;神經(jīng)皮膚魚(yú)鱗病家系研究[A];第五屆全國(guó)優(yōu)生科學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2000年

10 范建國(guó);;尋常魚(yú)鱗病合并銀屑病一例[A];2008年浙江省皮膚病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳勇;魚(yú)鱗病的治療和日常生活調(diào)養(yǎng)[N];家庭醫(yī)生報(bào);2007年

2 ;魚(yú)鱗病是遺傳性疾病[N];保健時(shí)報(bào);2008年

3 蘭東;魚(yú)鱗病能治嗎？[N];中國(guó)婦女報(bào);2002年

4 四榮聯(lián);魚(yú)鱗病能根治嗎[N];河北科技報(bào)(農(nóng)村版);2000年

5 阿歡;魚(yú)鱗病能根治嗎？[N];健康時(shí)報(bào);2003年

6 本報(bào)記者 趙晴晴　;怎樣緩解魚(yú)鱗病病情？[N];健康時(shí)報(bào);2004年

7 ;魚(yú)鱗病為何冬重夏輕?[N];健康時(shí)報(bào);2005年

8 ;魚(yú)鱗病能否根治[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2001年

9 李江;魚(yú)鱗病難根治[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2004年

10 醫(yī)師　李江;魚(yú)鱗病如何防治[N];河北日?qǐng)?bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 熊志敏;中國(guó)人群尋常型魚(yú)鱗病及尋常型銀屑病Filaggrin突變研究[D];中南大學(xué);2013年

2 劉海杰;仙方消銀片治療尋常型銀屑病的相關(guān)性研究[D];湖南中醫(yī)學(xué)院;2002年

3 高奎斌;尋常型銀屑病患者皮損和血清中腫瘤壞死因子alpha及其受體的檢測(cè)及其相關(guān)性研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2002年

4 王官清;天皰瘡、大皰性類天皰瘡和尋常型銀屑病與I型單純皰疹病毒、人類皰疹病毒8的相關(guān)性研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2001年

5 張安平;漢族人尋常型銀屑病與HLA基因分型的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2002年

6 楊莉莉;Teff/Treg在尋常型白癜風(fēng)黑素細(xì)胞破壞中的作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

7 王克玉;NB-UVB治療對(duì)尋常型穩(wěn)定期白癜風(fēng)SCF/c-kit信號(hào)通路影響的研究[D];山東大學(xué);2005年

8 崔勇;進(jìn)行性對(duì)稱性紅斑角化癥致病基因的染色體定位[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年

9 李薇;尋常型天皰瘡抗原橋粒芯糖蛋白4片段的克隆和免疫識(shí)別初步研究[D];四川大學(xué);2006年

10 鐘連生;尋常型天皰瘡患者外周血單一核細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體及部分細(xì)胞因子受體mRNA表達(dá)的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鐘偉;尋常型魚(yú)鱗病致病基因的定位研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2003年

2 張黎黎;表皮松解性角化過(guò)度型魚(yú)鱗病一家系KRT10基因突變的研究及應(yīng)用維甲酸治療的臨床觀察[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

3 張芳芳;BaP聯(lián)合UVB對(duì)人角質(zhì)形成細(xì)胞Caspase-14和Filaggrin表達(dá)的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

4 徐愛(ài)莉;鈣泊三醇軟膏治療尋常型銀悄病的臨床研究[D];暨南大學(xué);2003年

5 李志鴻;解毒消u曁樂(lè)瘟埔疾⊙俺Ｐ徒蠱詰牧俅慚芯縖D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2004年

6 司陡方民;尋常型銀屑病皮損中Bcl-2、Bax、Fas及Fas-L的表達(dá)研究[D];暨南大學(xué);2002年

7 班秀芬;數(shù)據(jù)挖掘方法研究尋常型銀屑病證侯規(guī)律[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2003年

8 張春紅;土苓飲治療進(jìn)行期尋常型銀屑病的臨床研究及對(duì)TNF-α、IL-8水平的影響[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2003年

9 王紅艷;尋常型銀屑病遺傳流行病學(xué)及遺傳模式分析[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2002年

10 龍福泉;云南漢族人TNF-α基因啟動(dòng)子多態(tài)性與尋常型銀屑病的研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2004年

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