本文關(guān)鍵詞：皮膚組織中小汗腺自發(fā)熒光現(xiàn)象及其共聚焦λ掃描分析

  更多相關(guān)文章： 小汗腺 自發(fā)熒光 熒光顯微鏡 激光掃描共聚焦顯微鏡 皮膚組織

【摘要】：背景100年前,Stubel發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞和組織產(chǎn)生的自發(fā)熒光可以應(yīng)用于疾病的診斷[1];Policard在1924年報(bào)道了關(guān)于腫瘤組織的自發(fā)熒光是來(lái)源于自發(fā)熒光基團(tuán)的研究[2];50年前,有研究描述了嗜酸性粒細(xì)胞的自發(fā)熒光現(xiàn)象并且提出其應(yīng)用于診斷和治療的可能性[3,4]。然而,由于自發(fā)熒光具有熒光強(qiáng)度低、光譜復(fù)雜的難測(cè)性,限制了其研究的進(jìn)展。最近,由于熒光顯微鏡,激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscope,CLSM)等高敏感度,低信噪比設(shè)備的出現(xiàn),我們實(shí)現(xiàn)了對(duì)自發(fā)熒光可靠的觀察和測(cè)量。因此,測(cè)量組織和細(xì)胞自發(fā)熒光特性和強(qiáng)度的相關(guān)技術(shù)在科學(xué)研究和臨床診斷方面有了應(yīng)用價(jià)值,被再次重視起來(lái)。近年來(lái)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域當(dāng)中關(guān)于自發(fā)熒光的研究還主要集中于視網(wǎng)膜疾病、消化系統(tǒng)疾病、呼吸系統(tǒng)腫瘤等幾種疾病的病理過(guò)程中,并應(yīng)用于這些疾病的診斷和治療中。[5-13]。皮膚自發(fā)熒光產(chǎn)生的原因在于皮膚組織中內(nèi)在的熒光基團(tuán),以及在某些病理變化中產(chǎn)生的內(nèi)源性和外源性的自發(fā)熒光物質(zhì)。[14-16]皮膚組織中由于糖化反應(yīng)沉積的晚期糖化終產(chǎn)物(advanced glycolsylation end products,AGEs)具有自發(fā)熒光現(xiàn)象,并與許多疾病具有密不可分的關(guān)系,例如動(dòng)脈粥樣硬化、心血管系統(tǒng)疾病、糖尿病及相關(guān)并發(fā)癥、腎病、血液透析等[16-27]。而皮膚中小汗腺自發(fā)熒光鮮有報(bào)道,我實(shí)驗(yàn)室在汗腺細(xì)胞的提取過(guò)程中偶然發(fā)現(xiàn)小汗腺細(xì)胞在熒光顯微鏡下的自發(fā)熒光現(xiàn)象,這引起我們的重視,進(jìn)行了關(guān)于小汗腺自發(fā)熒光光學(xué)特性的研究。目的我們了解到皮膚產(chǎn)生的自發(fā)熒光監(jiān)測(cè)應(yīng)用于很多疾病診斷和治療的過(guò)程中,而皮膚組織中的小汗腺并沒(méi)有自發(fā)熒光的相關(guān)文獻(xiàn)資料,在本次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們首次發(fā)現(xiàn)并且描述了小汗腺的自發(fā)熒光現(xiàn)象,通過(guò)對(duì)小汗腺自發(fā)熒光特點(diǎn)和自發(fā)熒光強(qiáng)度的研究,可以在小汗腺相關(guān)疾病的診斷和治療起著重要的作用。方法將皮膚組織進(jìn)行蘇木紅染色,并在熒光顯微鏡下觀察其中小汗腺的自發(fā)熒光現(xiàn)象;從志愿者的皮膚中提取出單個(gè)小汗腺細(xì)胞,進(jìn)行小汗腺細(xì)胞體外培養(yǎng),在熒光顯微鏡下分別以紫外光、綠光、藍(lán)光三種不同激發(fā)光觀察小汗腺自發(fā)熒光以及熒光隨小汗腺生長(zhǎng)的變化情況;利用激光掃描共聚焦顯微鏡(confocal laser scanning microscope,CLSM)l掃描測(cè)量小汗腺自發(fā)熒光的強(qiáng)度,進(jìn)一步了解小汗腺自發(fā)熒光的光譜學(xué)信息并根據(jù)其熒光強(qiáng)度推測(cè)引發(fā)小汗腺自發(fā)熒光的熒光基團(tuán)是哪些。結(jié)果蘇木紅染色后的小汗腺組織在綠色熒光蛋白GFP(green fluorescent protein,GFP)濾光系統(tǒng)(470/40 nm)下顯示出綠色自發(fā)熒光,N2.1濾光系統(tǒng)(515 560 nm)下顯示出紅色自發(fā)熒光;單獨(dú)的小汗腺細(xì)胞在熒光顯微鏡下則表現(xiàn)出更多顏色的自發(fā)熒光,紫外光的激發(fā)下顯示出藍(lán)色的自發(fā)熒光,藍(lán)色的激發(fā)光下顯示出綠色自發(fā)熒光,綠色的激發(fā)光下顯示出紅色的自發(fā)熒光,同時(shí)我們觀察到,隨小汗腺的生長(zhǎng),熒光強(qiáng)度沒(méi)有明顯減弱;CLSM?分層掃描種植于confocal皿中的小汗腺測(cè)量其自發(fā)熒光的強(qiáng)度,我們發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)自發(fā)熒光峰值,分別在530nm和590nm附近,這表明了黃素和脂褐素可能是內(nèi)在的熒光基團(tuán)。結(jié)論蘇木紅染色后的小汗腺組織的自發(fā)熒光可以簡(jiǎn)單并且快速的幫助判斷小汗腺結(jié)構(gòu)。單個(gè)小汗腺細(xì)胞的自發(fā)熒光強(qiáng)度隨汗腺生長(zhǎng)沒(méi)有明顯減弱。根據(jù)小汗腺自發(fā)熒光的測(cè)量可以初步判定小汗腺自發(fā)熒光的發(fā)光基團(tuán)是黃素和脂褐素。
【關(guān)鍵詞】：小汗腺 自發(fā)熒光 熒光顯微鏡 激光掃描共聚焦顯微鏡 皮膚組織
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R751
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 前言11-14
• 材料和器材14-15
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)器材14-15
• 實(shí)驗(yàn)方法15-16
• 2.1 汗腺組織蘇木紅染色15
• 2.2 汗腺細(xì)胞的提取和培養(yǎng)15
• 2.3 熒光顯微鏡觀察15
• 2.4 激光掃描共聚焦顯微鏡λ掃描15-16
• 結(jié)果16-22
• 3.1 熒光顯微鏡下汗腺組織自發(fā)熒光特點(diǎn)16
• 3.2 熒光顯微鏡觀察汗腺細(xì)胞自發(fā)熒光隨生長(zhǎng)變化情況16
• 3.3 激光掃描共聚焦顯微鏡λ掃描小汗腺熒光大小16-22
• 討論22-25
• 結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-32
• 綜述32-43
• 參考文獻(xiàn)37-43
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況43-44
• 致謝44-45

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 雷復(fù)華;高思宗;楊海英;;惡性小汗腺汗孔瘤1例[J];診斷病理學(xué)雜志;2005年06期

2 成志明;張仁亞;劉明生;宋化著;;頭皮鱗樣小汗腺導(dǎo)管癌臨床病理學(xué)分析[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2007年01期

3 游弋;楊希川;郝飛;鐘白玉;;小汗腺汗囊瘤1例[J];實(shí)用皮膚病學(xué)雜志;2008年01期

4 陳俊帆;王向東;許愛(ài)娥;;小汗腺汗囊瘤2例[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志;2010年05期

5 龐洪菊;方杰;袁偉;;小汗腺汗囊瘤1例[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;2013年09期

6 楊帆;曾維惠;耿松梅;馬毳毳;聶建軍;王倩倩;王俊民;;鼻部多發(fā)性小汗腺汗囊瘤5例[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;2009年11期

7 董方立;;人類(lèi)小汗腺汗液中的癌胚抗原[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚病學(xué)分冊(cè);1982年03期

8 金小青;;小汗腺螺旋腺瘤病理分析[J];求醫(yī)問(wèn)藥(下半月);2011年11期

9 陳俊男;陳亮;楊東運(yùn);;多發(fā)性小汗腺螺旋腺瘤一例[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2013年14期

10 靖亞莎;小汗腺螺旋腺瘤1例報(bào)告[J];皮膚病與性病;2001年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬秀亮;紀(jì)華安;肖尹;張理濤;;暈痣樣小汗腺腺孔瘤一例[A];2003中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

2 姚明珠;陳明亮;謝紅付;陳翔;;小汗腺螺旋腺瘤1例[A];2009全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 鄭敏;;小汗腺螺旋腺瘤1例[A];2008年浙江省皮膚病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

4 蔡綏R，

本文編號(hào)：1055444