本文關(guān)鍵詞：TH1082的合成及其誘導(dǎo)人黑色素瘤A375細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制研究

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【摘要】：氮雜吲哚是一類在材料科學(xué)、配位化學(xué)、藥物設(shè)計(jì)及合成方向有重要作用的雜環(huán)分子，在抗腫瘤、抗菌、抗病毒和治療高血壓等方面具有良好的效果。7-氮雜吲哚是經(jīng)過(guò)sp2-雜化后，N原子取代吲哚母環(huán)上的7-位C原子而形成，同樣具有生物學(xué)活性。本研究設(shè)計(jì)并合成了一個(gè)新的7-氮雜吲哚衍生物TH1082，分子式為C21H27O2N5，選用人黑色素瘤A375細(xì)胞作為研究對(duì)象，探討TH1082誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡作用及其機(jī)制。 本研究采用MTT法、熒光染色法、流式細(xì)胞術(shù)、Western Blot和QPCR等方法，從形態(tài)學(xué)、基因和蛋白水平，探討TH1082誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制。 結(jié)果表明，TH1082可降低線粒體膜電位，上調(diào)Bax/Bcl-2比率，促進(jìn)Cyt c、Smac和AIF釋放到細(xì)胞漿中，活化caspase-3和caspase-9，使caspase-3和caspase-9蛋白表達(dá)增加，促使caspase-3底物PARP剪切，激活內(nèi)源性途徑誘導(dǎo)人黑色素瘤A375細(xì)胞凋亡；TH1082也可以活化caspase-8，使caspase-8、Fas和FasL蛋白表達(dá)增加，激活外源性途徑誘導(dǎo)人黑色素瘤A375細(xì)胞凋亡。TH1082亦可使MAPK信號(hào)通路活化，促使ERK1/2磷酸化，加入抑制劑PD98059后，TH1082誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡作用減輕。TH1082可以使p53和p27kip1蛋白表達(dá)增加，使c-myc、CDK4和cyclin D1蛋白表達(dá)降低，，將細(xì)胞阻滯在G0/G1期，加入抑制劑PD98059后，這種阻滯效果降低。TH1082能抑制PI3K/Akt信號(hào)通路活化，使p-PTEN、GSK-3β蛋白表達(dá)上升，PTEN、p-Akt（Thr308）和p-Akt（Ser473）蛋白表達(dá)下降，誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡。 TH1082能激活MAPK信號(hào)通路，將A375細(xì)胞阻滯在G0/G1期，通過(guò)內(nèi)源性和外源性途徑誘導(dǎo)A375細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：7-氮雜吲哚衍生物 人黑色素瘤A375細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 周期阻滯 MAPK信號(hào)通路 PI3K/Akt信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R739.5
【目錄】：

• 提要4-5
• 中文摘要5-10
• Abstract10-18
• 英文縮寫(xiě)表18-21
• 第1章 緒論21-39
• 綜述 1 黑色素瘤與細(xì)胞凋亡21-39
• 1.1 黑色素瘤的治療進(jìn)展21-22
• 1.2 細(xì)胞凋亡的概念及其生物學(xué)特征22-23
• 1.2.1 細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)特征22
• 1.2.2 細(xì)胞凋亡的生物化學(xué)特征22-23
• 1.3 啟動(dòng)細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制23-32
• 1.3.1 外源性通路-死亡受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路23-29
• 1.3.2 內(nèi)源性通路-線粒體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路29-32
• 1.4 細(xì)胞凋亡的調(diào)控因素32-33
• 1.4.1 凋亡抑制蛋白32
• 1.4.2 活性氧32-33
• 1.4.3 p53 蛋白33
• 1.5 腫瘤細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路33-39
• 1.5.1 PI3K/Akt 通路與細(xì)胞凋亡33-34
• 1.5.2 MAPK 通路與細(xì)胞凋亡34-39
• 綜述2 7-氮雜吲哚衍生物的研究進(jìn)展39-43
• 第2章 TH1082 的合成及其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用的研究43-69
• 2.1 引言43
• 2.2 材料與方法43-50
• 2.2.1 主要試劑與儀器43-46
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法46-50
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果50-67
• 2.3.1 TH1082 的結(jié)構(gòu)50-51
• 2.3.2 TH1082 對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響51-62
• 2.3.3 形態(tài)學(xué)觀察62-63
• 2.3.4 AO/EB 染色63-65
• 2.3.5 Hoechst33342/PI 染色65
• 2.3.6 DAPI 染色65-67
• 2.4 小結(jié)67-69
• 第3章 TH1082 誘導(dǎo)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞凋亡機(jī)制研究69-103
• 3.1 引言69
• 3.2 材料與方法69-80
• 3.2.1 主要試劑與儀器69-73
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法73-80
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果80-102
• 3.3.1 TH1082 對(duì) A375 細(xì)胞線粒體途徑的影響80-88
• 3.3.2 TH1082 對(duì) A375 細(xì)胞死亡受體途徑的影響88-90
• 3.3.3 TH1082 對(duì) A375 細(xì)胞周期的影響90-93
• 3.3.4 TH1082 對(duì) A375 細(xì)胞 PI3K/Akt 信號(hào)通路的影響93-94
• 3.3.5 TH1082 對(duì) A375 細(xì)胞 MAPK 信號(hào)通路的影響94-102
• 3.4 小結(jié)102-103
• 第4章 結(jié)論103-105
• 第5章 討論105-111
• 本論文創(chuàng)新性111-113
• 參考文獻(xiàn)113-125
• 作者簡(jiǎn)介及在讀期間取得科研成果125-126
• 致謝126

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 譚雪;周瑩;姚其正;;7-氮雜吲哚及其類似物的合成與抗腫瘤和抗菌活性研究[J];國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè));2010年05期

本文編號(hào)：1032988