本文關(guān)鍵詞：核桃多肽防治糖尿病物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機制研究

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【摘要】：糖尿病已成為繼腫瘤、心血管疾病之后嚴重威脅人類健康的第三大疾病,但目前傳統(tǒng)降糖藥物不能滿足現(xiàn)代社會對糖尿病治療需求,尋找高效、安全的防治糖尿病藥物仍是全球關(guān)注的熱點。本課題以藥食兩用的核桃作為原料,以復(fù)合酶酶解法制備的核桃多肽作為研究對象,考察核桃蛋白及多肽的降糖活性。論文的主要內(nèi)容和結(jié)論:1.核桃多肽最佳制備工藝:以中性蛋白酶在底物濃度為2%,酶解時間為1 h,酶解pH為7,酶用量為8000μg/g條件下對核桃蛋白酶解,再加入堿性蛋白酶在底物濃度為2%,酶解時間為2 h,酶解pH為9,酶用量為10000μg/g條件下酶解,核桃蛋白水解度達40%左右,同時酶解產(chǎn)物核桃多肽對α-淀粉酶抑制率達85.9%。2.采用Superdex ~(TM) Peptide 10/300 GL柱對酶解產(chǎn)物核桃多肽最佳分離條件為:Nacl濃度為0.15 mol/L,多肽上樣濃度8 mg/ml,流速0.5 ml/min。核桃多肽中分離組分JRP-1,平均分子量約為10077,含量為38.94%;JRP-2平均分子量約為1083,含量為40.92%。3.核桃蛋白及多肽皆具有一定的抗氧化活性,并且核桃多肽的抗氧化活性明顯高于蛋白。以GSH作為陽性對照,發(fā)現(xiàn)核桃多肽對DPPH·清除能力接近75.00%,達到GSH的80%;核桃多肽對O2ˉ·清除率為70.70%,是GSH的87%;核桃蛋白及多肽的總還原能力明顯低于對照品GSH,但相同濃度的核桃多肽總還原能力幾乎是核桃蛋白的2倍;核桃多肽對·OH清除率明顯優(yōu)于核桃蛋白,且達到對照品GSH的50%以上。4.核桃蛋白及多肽均具有體外降糖效果,能促進釀酒酵母對葡萄糖的利用,并且多肽效果略優(yōu)于蛋白。當核桃多肽的添加量為15 mg/50 ml時,促進作用最佳,超過空白組的2倍,葡萄糖平均消耗速率達0.026 mg/(ml·h)。5.分別采用核桃蛋白、多肽對T2DM小鼠進行治療,核桃蛋白及多肽能顯著改善T2DM小鼠進食后對葡萄糖調(diào)節(jié)能力,有效的控制葡萄糖水平,具有較好的降血糖效果,能顯著降低血清中TC、TG水平,具有改善糖尿病發(fā)病過程中糖脂代謝功能障礙的作用,對糖尿病所致的心臟、肝臟及腎臟病變具有一定的改善作用,能夠減輕糖尿病并發(fā)癥。
【關(guān)鍵詞】：核桃 蛋白 多肽 降血糖
【學位授予單位】：武漢工程大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 第1章 文獻綜述12-25
• 1.1 胡桃科資源概述12-13
• 1.2 核桃營養(yǎng)價值13-18
• 1.3 核桃仁藥理活性18-22
• 1.4 本課題研究目的與意義22-23
• 1.5 本課題研究內(nèi)容及主要創(chuàng)新點23-24
• 1.6 課題實驗流程圖24-25
• 第2章 核桃多肽制備25-41
• 2.1 引言25
• 2.2 實驗材料25-27
• 2.2.1 實驗藥材25
• 2.2.2 實驗試劑25-27
• 2.3 實驗方法27-34
• 2.3.1 核桃蛋白的提取27
• 2.3.2 核桃蛋白質(zhì)含量測定27-29
• 2.3.3 核桃多肽的制備29-34
• 2.4 結(jié)果與討論34-39
• 2.4.1 標準曲線的繪制34
• 2.4.2 核桃蛋白含量測定結(jié)果34
• 2.4.3 核桃蛋白酶解結(jié)果34-39
• 2.5 本章總結(jié)39-41
• 第3章 核桃多肽的分離純化41-50
• 3.1 引言41
• 3.2 實驗材料41-42
• 3.3 實驗方法42-43
• 3.3.1 實驗試劑的配制42
• 3.3.2 確定核桃多肽分離最佳條件42-43
• 3.3.3 JRP-1 和JRP-2 分子量的測定43
• 3.4 結(jié)果與討論43-49
• 3.4.1 核桃多肽最佳分離條件結(jié)果43-46
• 3.4.2 最佳分離條件的驗證46-47
• 3.4.3 JRP-1 和JRP-2 分子量的測定結(jié)果47-49
• 3.5 本章總結(jié)49-50
• 第4章 核桃蛋白及多肽抗氧化活性測定50-58
• 4.1 引言50
• 4.2 實驗材料50-52
• 4.3 實驗方法52-54
• 4.3.1 DPPH·清除率測定52
• 4.3.2 O_2~-·清除率測定52-53
• 4.3.3 總還原能力測定53
• 4.3.4 ·OH清除率測定53-54
• 4.4 結(jié)果與討論54-57
• 4.4.1 核桃蛋白及多肽對DPPH·清除能力54-55
• 4.4.2 核桃蛋白及多肽對O_2~-·清除能力55
• 4.4.3 核桃蛋白及多肽的總還原能力55-56
• 4.4.4 核桃蛋白及多肽對·OH清除能力56-57
• 4.5 本章小結(jié)57-58
• 第5章 核桃蛋白及多肽降糖研究58-76
• 5.1 引言58
• 5.2 實驗材料58-60
• 5.2.1 實驗動物及菌種58
• 5.2.2 實驗試劑與儀器58-60
• 5.3 實驗部分60-63
• 5.3.1 體外降糖活性初探60-61
• 5.3.2 體內(nèi)降糖活性初探61-63
• 5.4 結(jié)果與討論63-74
• 5.4.1 體外降糖活性初探63-67
• 5.4.2 體內(nèi)降糖活性初探67-74
• 5.5 本章小結(jié)74-76
• 第6章 總結(jié)76-78
• 參考文獻78-86
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文86-87
• 致謝87

【參考文獻】

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本文編號：971273