本文關(guān)鍵詞：枸杞多糖對HepG2細胞胰島素抵抗的改善作用及機制研究

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【摘要】：目的:采用高糖高胰島素誘導HepG2細胞建立胰島素抵抗細胞模型,通過觀察不同濃度的枸杞多糖(lyceum barbarum polysaccharide,LBP)對HepG2細胞胰島素抵抗的影響,探討其改善胰島素抵抗可能的分子機制,為進一步認識、利用枸杞多糖提供理論依據(jù),也為將來枸杞多糖治療2型糖尿病提供科學依據(jù),具有重要意義。方法:采用高糖高胰島素處理HepG2細胞24小時建立胰島素抵抗細胞模型,通過葡萄糖消耗實驗判斷模型是否建立、噻唑藍(MTT)比色法檢測不同濃度的LBP對HepG2細胞活性的影響,選擇三個合適的濃度、確定藥物作用時間用于后續(xù)實驗。用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法檢測不同濃度LBP對胰島素抵抗HepG2細胞葡萄糖消耗的影響。比色法測定細胞內(nèi)氧化應(yīng)激指標丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量;Westen-Blot法測定胰島素信號轉(zhuǎn)導通路中相關(guān)蛋白(IRS-2、PI3K、Akt、GLUT2)的表達水平。結(jié)果:1.枸杞多糖對HepG2細胞活性的影響:LBP處理HepG2細胞24h和48h后,低濃度(100,300μg/ml)枸杞多糖不影響細胞活性;而高濃度(500、1000、3000、5000μg/ml)枸杞多糖呈濃度依賴性抑制HepG2細胞活性。當處理時間延長至72h時,高濃度的枸杞多糖對hepg2細胞活性的抑制作用愈加明顯,且呈劑量依賴效應(yīng),與對照組(24h,0μg/ml)相比,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。因此,為了排除枸杞多糖對細胞活力的影響,本實驗選擇30μg/ml、100μg/ml、300μg/ml分別作為低濃度枸杞多糖組(l-lbp)、中濃度枸杞多糖組(m-lbp)和高濃度枸杞多糖(h-lbp組)的濃度值,處理細胞時間選擇48h。2.枸杞多糖對胰島素抵抗hepg2細胞葡萄糖消耗的影響:與正常對照組相比,ir模型組細胞葡萄糖消耗量顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),說明hepg2細胞胰島素抵抗模型建立成功。與ir模型組相比,高濃度和中濃度的lbp顯著提高了胰島素抵抗hepg2細胞的葡萄糖消耗量,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),而低濃度lbp對hepg2細胞的葡萄糖消耗量無顯著影響,差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。與羅格列酮組相比,高、低濃度lbp組葡萄糖消耗量顯著降低(p0.05),中濃度lbp組葡萄糖消耗量無顯著性差異(p0.05)。3.枸杞多糖對胰島素抵抗hepg2細胞mda含量和sod活力的影響:與正常對照組相比,ir模型組細胞mda含量顯著升高,sod活力顯著降低(p0.05)。與ir模型組相比,高、中濃度lbp組細胞mda含量顯著降低(p0.05);而低濃度lbp組差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);高濃度、中濃度和低濃度lbp組細胞sod活力均顯著升高(p0.05)。與羅格列酮組相比,中濃度lbp組mda含量顯著降低(p0.05);高、中濃度lbp組sod活力顯著升高(P0.05)。4.枸杞多糖對胰島素抵抗HepG2細胞IRS-2、PI3K、Akt、GLUT2蛋白表達的影響:與正常對照組相比,IR模型組IRS-2、PI3K、Akt、GLUT2蛋白表達顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與IR模型組相比,高、中濃度LBP組IRS-2、PI3K、Akt、GLUT2蛋白表達水平明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而低濃度LBP組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。與羅格列酮組相比,高、中、低濃度LBP組IRS-2、PI3K、Akt、GLUT2蛋白表達水平明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:枸杞多糖能改善HepG2細胞胰島素抵抗,其作用機制可能與增強細胞抗氧化能力及提高胰島素信號傳導通路相關(guān)蛋白(IRS2、PI3K、Akt、GLUT2)的表達有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：枸杞多糖 2型糖尿病 胰島素抵抗
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.1
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 主要縮語及英文索引11-13
• 第1章 緒論13-17
• 第2章 材料與方法17-25
• 2.1 實驗材料17-19
• 2.2 實驗方法19-25
• 第3章 結(jié)果25-33
• 3.1 枸杞多糖對HepG2細胞活性的影響25
• 3.2 枸杞多糖對胰島素抵抗HepG2細胞葡萄糖消耗的影響25-26
• 3.3 枸杞多糖對胰島素抵抗HepG2細胞SOD活力的影響26-27
• 3.4 枸杞多糖對胰島素抵抗HepG2細胞MDA含量的影響27-29
• 3.5 枸杞多糖對胰島素抵抗HepG2細胞IRS-2、PI3K、Akt和GLUT2蛋白表達的影響29-33
• 第4章 討論33-37
• 第5章 結(jié)論37-39
• 參考文獻39-43
• 文獻綜述 枸杞多糖與糖尿病的研究進展43-47
• 參考文獻46-47
• 攻讀碩士學位期間完成、發(fā)表論文情況47-49
• 研究基金資助項目49-51
• 致謝51

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本文編號：902361