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白介素35蛋白在糖尿病視網(wǎng)膜病變中作用的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-21 21:38

  本文關(guān)鍵詞:白介素35蛋白在糖尿病視網(wǎng)膜病變中作用的初步研究


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【摘要】:目的:白介素35在調(diào)節(jié)T細(xì)胞及B細(xì)胞免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)中起重要作用,本文將通過測定其在糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清及玻璃體中的表達(dá),以及體外實(shí)驗(yàn)探討白介素35蛋白對人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(Acute retinal pigment epithelial cell,ARPE-19)功能的影響,以期探討其與糖尿病視網(wǎng)膜病的關(guān)系。方法:選擇在2014年9月至2015年11月期間重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科住院部的2型糖尿病患者,根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)將其分為糖尿病無視網(wǎng)膜病變組(DWR)、非增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變組(NPDR)及增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變組(PDR),納入特發(fā)性黃斑前膜需行玻璃體切割術(shù)患者作為對照組。分別抽取2型糖尿病及患者對照組患者及靜脈血,離心分離出血清;于手術(shù)中抽取增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變患者及對照組患者玻璃體液,離心取上清。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)分別測定各血清及玻璃體液中白介素35的蛋白表達(dá)水平。將ARPE-19細(xì)胞分為低糖組(5.5mmol/L D-葡萄糖)、高滲對照組(5.5mmol/L D-葡萄糖加20mmol/L甘露醇)、高糖組(25mmol/L D-葡萄糖)、高糖+IL-35蛋白組A(25mmol/L D-葡萄糖加重組白介素35蛋白20ng/ml)、高糖+IL-35蛋白組B(25mmol/L D-葡萄糖加重組白介素35蛋白50ng/ml)、高糖+IL-35蛋白組C(25mmol/L D-葡萄糖加重組白介素35蛋白100ng/ml)。利用RT-PCR測定ARPE-19細(xì)胞中IL-35及其受體各亞基、IL-6、MCP-1及VEGF mRNA的表達(dá),利用CCK8測定各組細(xì)胞活力,ELISA測定各組細(xì)胞上清中IL-6、MCP-1及VEGF的表達(dá)水平。結(jié)果:PDR患者血清中白介素35蛋白表達(dá)水平顯著降低(P0.05),PDR組患者玻璃體液中IL-35蛋白表達(dá)水平較對照組顯著降低(P0.001)。而白介素35蛋白表達(dá)水平在DWR組患者及NPDR組患者血清中表達(dá)水平與對照組無顯著性差異(P0.05)。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:高糖培養(yǎng)下的ARPE-19細(xì)胞中IL-35及其受體各亞基mRNA表達(dá)顯著降低(P0.05);重組IL-35蛋白可顯著緩解高糖處理對ARPE-19細(xì)胞活力的抑制作用,并可對高糖促進(jìn)ARPE-19細(xì)胞分泌炎癥因子IL6及MCP-1、生長因子VEGF的能力有顯著的抑制(P0.05)。結(jié)論:白介素35可能與增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病機(jī)制相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變 白介素35蛋白 炎癥 免疫調(diào)節(jié)
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R587.2;R774.1
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照4-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-12
  • 第一部分 白介素35蛋白在糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清及玻璃體中的表達(dá)12-18
  • 1 材料及方法12-14
  • 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果14-18
  • 第二部分 白介素35蛋白在高糖培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞中作用初步探究18-33
  • 1 材料及方法18-25
  • 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-33
  • 第三部分 討論33-37
  • 全文總結(jié)37-38
  • 參考文獻(xiàn)38-42
  • 文獻(xiàn)綜述42-48
  • 參考文獻(xiàn)46-48
  • 致謝48-49
  • 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文49

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 萬俊;羅英;楊春平;柳佳麗;杜云艷;王坤;;變應(yīng)性鼻炎患者外周血IL-35及EBI3 mRNA和IL-12A mRNA表達(dá)的研究[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2014年13期

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本文編號:897048

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