本文關(guān)鍵詞：GLP-1受體激動(dòng)劑Exendin-4對(duì)min6細(xì)胞GSIS的保護(hù)作用及MAPK信號(hào)通路的作用

  更多相關(guān)文章： 促分裂素原活化蛋白激酶 MIN6細(xì)胞 GSIS 糖尿病

【摘要】：目的了解干擾素1β對(duì)min6系在高糖下胰島素合成(GSIS)得影響,Exendin-4影響下min6細(xì)胞胰島素分泌變化,及促分裂素原活化蛋白激酶MAPK(ERK1/2,p38,JNK)信號(hào)通路磷酸化程度的改變。方法(1) MIN6細(xì)胞分別在不同濃度葡萄糖(0、5.5、11.1、22.2mmol/1)的K RBH緩沖液中孵育1h,收集培養(yǎng)的上清液,用酶免法測(cè)定其胰島素濃度,提取細(xì)胞總蛋白,用蛋白質(zhì)免疫印跡法測(cè)定MAPK(ERK1/2,P38,JNK)信號(hào)通路磷酸化水平。(2)MIN6 細(xì)胞分別在不同濃度的IL-1β(0、0.25、2.5ng/ml)培養(yǎng)液中培養(yǎng)24小時(shí),在高糖KRBH培養(yǎng)一個(gè)小時(shí),收集細(xì)胞培養(yǎng)后的上清液,酶免法測(cè)定胰島素濃度,在高糖KRBH下培育5min,收集細(xì)胞總蛋白,蛋白質(zhì)免疫印跡法測(cè)定ERK1/2、P38、JNK的磷酸化水平。(3)MIN6細(xì)胞0.25ng/ml的IL-1β培養(yǎng)液中培養(yǎng)24h同時(shí)加入不同濃度的的胰高糖素樣肽-1的受體激動(dòng)劑Exendin-4(50、500pmol/ml),在高糖的KRBH培養(yǎng)一小時(shí),收集培養(yǎng)上清液,酶免法測(cè)定胰島素濃度,收集細(xì)胞總蛋白蛋白質(zhì)免疫印跡法測(cè)定磷酸化的促分裂素原活化蛋白激酶(ERK1/2,P38,JNK)的磷酸化水平。結(jié)果(1)IL-1 β抑制了min6細(xì)胞胰島素的分泌,下調(diào)了ERK1/2磷酸化水平,提高了JNK和p38磷酸化水平。(2)Exendin-4對(duì)IL-1β?lián)p傷min6細(xì)胞胰島素分泌作用中起了保護(hù)作用,提高了ERK1/2的磷酸化活化程度,降低了p38的磷酸化活化程度。結(jié)論Exendin-4對(duì)胰島素分泌有保護(hù)作用,機(jī)制與MAPK信號(hào)通路相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：促分裂素原活化蛋白激酶 MIN6細(xì)胞 GSIS 糖尿病
【學(xué)位授予單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R587.1
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-8
• 縮略詞8-11
• 第一章 緒論11-19
• 1.1 糖尿病的概述11-12
• 1.2 糖尿病的致病機(jī)理與治療12
• 1.3 MAPK信號(hào)通路與糖尿病的關(guān)系12-16
• 1.3.1 ERK1/2信號(hào)通路13-14
• 1.3.2 P38信號(hào)通路14-15
• 1.3.3 JNK信號(hào)通路15-16
• 1.4 炎性細(xì)胞因子和糖尿病發(fā)病機(jī)制的關(guān)系16-17
• 1.5 GLP-1對(duì)胰島β細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制17-19
• 第二章 正文19-53
• 2.1 材料與方法19-25
• 2.1.1 細(xì)胞來(lái)源19
• 2.1.2 主要的試劑19-21
• 2.1.3 主要的儀器21-23
• 2.1.4 主要試劑配制23-24
• 2.1.5 研究方案24-25
• 2.2 研究方法25-42
• 2.2.1 min6細(xì)胞的培養(yǎng)25-27
• 2.2.2 Min6細(xì)胞的胰島素分泌反應(yīng)(GSIS)27-29
• 2.2.3 酶免分析藥盒測(cè)定胰島素濃度29
• 2.2.4 min6細(xì)胞MAPK信號(hào)通路的變化29-31
• 2.2.5 Western Blotting蛋白質(zhì)免疫印跡分析31-34
• 2.2.6 min6細(xì)胞胰島素基因表達(dá)34-36
• 2.2.7 min6細(xì)胞RNA總提取36-38
• 2.2.8 RNA的質(zhì)量檢測(cè)38
• 2.2.9 cDNA的合成38-39
• 2.2.10 引物設(shè)計(jì)39-40
• 2.2.11 熒光定量40-42
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析42-53
• 2.3.1 min6細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析42-44
• 2.3.2 不同糖濃度刺激下min6細(xì)胞的GSIS44-45
• 2.3.3 IL-1β對(duì)min6細(xì)胞GSIS的損傷45-46
• 2.3.4 exendin-4對(duì)min6細(xì)胞GSIS保護(hù)作用46-47
• 2.3.5 不同糖濃度刺激對(duì)min6細(xì)胞MAPK信號(hào)通路影響47-48
• 2.3.6 IL-1β對(duì)min6細(xì)胞MAPK信號(hào)通路影響48-50
• 2.3.7 exendin-4對(duì)min6細(xì)胞MAPK信號(hào)通路影響50-51
• 2.3.8 胰島素基因的表達(dá)51-53
• 第三章 結(jié)論和討論53-59
• 3.1 討論53-57
• 3.1.1 不同糖濃度刺激結(jié)果分析討論53-54
• 3.1.2 IL-β刺激min6細(xì)胞結(jié)果討論54-55
• 3.1.3 Exendin-4對(duì)min6細(xì)胞的影響55-56
• 3.1.4 不同葡萄糖對(duì)min6細(xì)胞胰島素基因表達(dá)影響結(jié)果分析56-57
• 3.1.5 展望與未來(lái)57
• 3.2 結(jié)論57-59
• 致謝59-60
• 參考文獻(xiàn)60-71
• 附錄71

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張仲林;鐘玲;彭成;劉宏偉;;生草烏對(duì)小鼠MAPK信號(hào)通路毒性影響的研究[J];中藥藥理與臨床;2008年03期

2 盧群;羅少洪;;藁本內(nèi)酯調(diào)控MAPK信號(hào)通路的血管平滑肌細(xì)胞增生[J];廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào);2010年06期

3 李倩玉;魏旭東;陳琳;尹青松;;PD98059對(duì)急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞MAPK信號(hào)通路的抑制作用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2013年06期

4 闞秀芳;趙麗晶;李倩;謝愛(ài)國(guó);李丁洋;趙麗娟;;人多囊腎囊泡上皮細(xì)胞中MAPK信號(hào)通路的調(diào)節(jié)[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2013年22期

5 陶昕;孟祥志;孫麗;于麗;;MAPK信號(hào)通路與神經(jīng)系統(tǒng)損傷的研究進(jìn)展[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2010年06期

6 衛(wèi)智權(quán);閻莉;鄧家剛;鄧靜;;芒果苷對(duì)慢性炎癥MAPK信號(hào)通路的影響[J];中國(guó)中藥雜志;2011年13期

7 王文;任玲;王健楠;;MAPK信號(hào)通路與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2010年15期

8 謝興文;侯費(fèi)yN;李寧;李勝華;宋敏;;MAPK信號(hào)通路在MSCs成骨分化和增殖中作用的研究進(jìn)展[J];中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志;2012年04期

9 吳婭;楊孟昌;;MAPK信號(hào)通路在異氟烷心肌保護(hù)效應(yīng)中的作用[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2009年02期

10 陳茜;屠偉峰;;氧化應(yīng)激性腸上皮細(xì)胞損傷與MAPK信號(hào)通路的關(guān)系研究[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2011年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 劉尚全;楊穎;周麗斌;尚文斌;李鳳英;唐金鳳;陳名道;;淫羊藿甙對(duì)地塞米松誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞增殖分化抑制的作用及其對(duì)MAPK信號(hào)通路的影響[A];第八次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合虛證與老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

2 高振芹;周建華;胡永斌;;MAPK信號(hào)通路在二氧化硅誘導(dǎo)的人支氣管上皮細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)型中的作用機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

3 王育蓉;李艷艷;孫輝;劉沛;;MAPK信號(hào)通路在TNFα誘導(dǎo)人腎小球系膜細(xì)胞IP3R1表達(dá)中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十六次全國(guó)病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

4 皇幼明;;MAPK信號(hào)通路在隱球菌致病機(jī)制中的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2012年

5 李建彩;婁永根;;植物MAPK信號(hào)通路在調(diào)控抗蟲(chóng)反應(yīng)中的作用[A];中國(guó)第五屆植物化感作用學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2011年

6 林明群;張宗粱;;巨噬細(xì)胞免疫調(diào)變信號(hào)-PKA與PKC對(duì)MAPK信號(hào)通路的調(diào)節(jié)研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第七次會(huì)議論文摘要匯編[C];1999年

7 吳海露;高欣;姜宗丹;段兆濤;王書(shū)奎;何幫順;張振玉;謝紅光;;氯吡格雷引起的胃粘膜損傷與緊密連接蛋白的低表達(dá)有關(guān)是通過(guò)激活了MAPK信號(hào)通路中的p38[A];第十三次全國(guó)臨床藥理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2012年

8 袁長(zhǎng)青;杜華;凌朝輝;馬樹(shù)東;丁振華;;酸性鞘磷脂水解酶和MAPK信號(hào)通路在UVA誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中的作用[A];第六屆全國(guó)光生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

9 金潤(rùn)銘;白燕;熊安秀;林雯;余慧;吳曉燕;費(fèi)洪寶;;MAPK信號(hào)通路參與哇巴因誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞的增殖[A];湖北省遺傳學(xué)會(huì)第七次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 聶燕芳;藥物阻斷結(jié)腸癌細(xì)胞MAPK信號(hào)通路的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];暨南大學(xué);2008年

2 鄭詠秋;大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞G蛋白偶聯(lián)信號(hào)通路與MAPK信號(hào)通路的關(guān)系及白芍總苷的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2004年

3 蔡斌;子宮內(nèi)膜癌中雌激素受體與MAPK信號(hào)通路間的調(diào)控[D];上海交通大學(xué);2008年

4 馮毅慧;電針對(duì)JNK基因敲除小鼠腦缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡與MAPK信號(hào)通路影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 聶華萍;RhoGDIα和peripherin參與MAPK信號(hào)通路介導(dǎo)NGF啟動(dòng)腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞冗余性[D];中南大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉娟;布魯氏菌外膜蛋白OMP25對(duì)MAPK信號(hào)通路的影響[D];石河子大學(xué);2015年

2 范懷艷;美洲大蠊提取物對(duì)肝星狀細(xì)胞MAPK信號(hào)通路的影響及意義的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

3 阿曼古麗·如則;MAPK信號(hào)通路在低剪切力誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞Fractalkine表達(dá)中的作用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

4 黎煜楓;鉬對(duì)小鼠睪丸的毒性及睪丸組織MAPK信號(hào)通路的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2015年

5 王晶晶;MAPK信號(hào)通路參與TNFα對(duì)GLUT1表達(dá)及成骨細(xì)胞分化的調(diào)控[D];蘇州大學(xué);2016年

6 蘇健;GLP-1受體激動(dòng)劑Exendin-4對(duì)min6細(xì)胞GSIS的保護(hù)作用及MAPK信號(hào)通路的作用[D];昆明理工大學(xué);2016年

7 王藝歡;清肺通絡(luò)敷胸膏對(duì)RSV感染幼齡大鼠肺組織MAPK信號(hào)通路的影響[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2016年

8 邵家日;牛支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白激活MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)EBL細(xì)胞釋放IL-1β的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

9 高振芹;MAPK信號(hào)通路在二氧化硅誘導(dǎo)的人支氣管上皮細(xì)胞上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)型中的作用機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2010年

10 馬愛(ài)敏;超短波聯(lián)合復(fù)方樟柳堿治療前部缺血性視神經(jīng)病變及MAPK信號(hào)通路調(diào)控的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：877716