本文關(guān)鍵詞：可示蹤轉(zhuǎn)基因斑馬魚胰島β細胞破壞和再生模型分析

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【摘要】：本研究目的是在斑馬魚體內(nèi)建立符合高通量藥物篩選條件的胰島β細胞破壞模型,用于篩選出針對糖尿病胰島β細胞再生的藥物。利用胰島素-硝基還原酶-綠色熒光蛋白(insulin-nfs B-green fluorescent protein;INS-nfs B-GFP)轉(zhuǎn)基因系F1/F2代胚胎分為A組(正常對照組),根據(jù)胚胎時相大小分為3個大組,B組受精后24 h(24 hours postfertilization,24 hpf)、C組受精后36 h(36 hours postfertilization,36 hpf)、D組受精后48 h(48 hours postfertilization,48 hpf),分別在不同毫摩爾(mmol/L)濃度(5 mmol/L,7.5 mmol/L,10 mmol/L,15 mmol/L)的甲硝唑中孵育24~48 h,通過體式倒置熒光顯微鏡和共焦顯微鏡觀察斑馬魚胰島β細胞破壞及熒光表達的情況,同時用原位雜交方法進一步在分子水平證實。結(jié)果顯示,斑馬魚胚胎36 hpf加10 mmol/L濃度的甲硝唑并孵育36 h,熒光明顯消失,并且畸形率和死亡率較低,是創(chuàng)造胰島條件β細胞破壞的轉(zhuǎn)基因斑馬魚模型的理想條件,在此基礎(chǔ)上去甲硝唑10~86 h后繼續(xù)觀察胰島β細胞再生,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在去除甲硝唑24 h(即斑馬魚胚胎96 hpf)時胰島β細胞開始再生。本模型的建立對于糖尿病的臨床價值和應(yīng)用前景有著非常重要的意義,利用這一條件使高通量篩選具有胰島功能恢復(fù)作用藥物成為可能,將為糖尿病的治療開辟新的道路。
【作者單位】： 貴陽中醫(yī)學院;
【關(guān)鍵詞】： 胰島β細胞 斑馬魚 轉(zhuǎn)基因
【基金】：國家自然科由學基金(編號:30860376)資助
【分類號】：R587.1
【正文快照】： Analysis of Damage and Regeneration Model of Traceable Transgenic Zebr-afish PancreaticβCellLi Shanshan Kong Deming*Qin Shuai Deng MinGuiyang University of Chinese Medicine,Guiyang,550003*Corresponding author,kongdeminggy@sina.com圖1甲硝唑處理后斑馬魚胰

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