發(fā)布時間：2017-08-30 05:45

  本文關鍵詞：次氯酸修飾白蛋白誘導糖尿病大鼠足細胞凋亡的機制及線粒體靶向肽的保護作用

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【摘要】：研究背景根據(jù)2014年的報告估計,全球糖尿病患病率為8.3%,影響全球3億8700萬以上成年人,預計到2030年底數(shù)字將上升到55%,累及超過5億9200萬名患者。其中糖尿病腎病(DN)是糖尿病最常見的慢性并發(fā)癥之一,也是全球終末期腎病(ESRD)最主要的死亡原因之一,嚴重影響了人類的生活質量。近年來氧化應激被認為是引起DN發(fā)生及發(fā)展共同的病理生理機制,其中氧化應激反應導致的腎小球足細胞損傷在DN進展中發(fā)揮的作用越來越受到重視。因此,在DN防治中,減少線粒體內的氧化應激作用引起了國內外學者的廣泛關注,抗氧化療法已然成為治療DN的新方向。氧化應激是由促氧化和抗氧化系統(tǒng)失衡所致。正常狀態(tài)下人體可產生少量活性氧(ROS)進行生理代謝,同時體內存在抑制自由基和清除自由基的反應體系,該體系使多余的自由基被清除,因此ROS的產生和清除始終達到動態(tài)平衡狀態(tài)。如果這一動態(tài)平衡遭到破壞,則引起ROS的蓄積,導致一系列病理生理損傷,這一過程即為氧化應激。氧化應激過程中大量脂質和蛋白質氧化產物、活性醛類化合物、氧化修飾的巰基、羥基化合物等積聚。糖尿病時,體內過多的ROS通過直接損傷或作為第二信使,激活細胞內信號傳遞系統(tǒng),誘導足細胞損傷。過度的氧化應激通過氧化作用破壞組織結構、干擾正常的組織功能、影響信號轉導。研究提示糖尿病時腎臟存在明顯的氧化應激狀態(tài),其通過P38/MAPK絲裂原活化蛋白激酶、TGF-β、MCP-1和caspase家族等促進足細胞的凋亡和丟失,從而引起腎臟結構和功能損害以及蛋白尿的產生,參與了DN發(fā)生及發(fā)展的多個環(huán)節(jié)。DN早期表現(xiàn)包括腎小球高濾過和尿微量白蛋白排泄增加,基底膜增厚、細胞外基質積聚、系膜增生和腎小球肥大。隨著病程進展,產生大量蛋白尿,繼而腎小球及間質硬化,最終發(fā)展為ESRD。以往著重于腎小球系膜損傷的研究,認為系膜基質的增多是DN發(fā)生的核心病變。然而近年來越來越多的研究提示,足細胞損傷是DN發(fā)病早期的重要改變,其對濾過屏障的完整性、蛋白尿的產生和腎小球硬化具有重大意義。線粒體是活性氧產生最主要部位,對氧化應激反應也最為敏感。腎臟是高能量代謝器官,線粒體含量豐富,線粒體功能失常在腎間質纖維化中可能起關鍵作用,近年受到廣泛關注。在線粒體中,細胞色素C通過和心肌磷脂陰離子結合固定于線粒體內膜上。心肌磷脂僅存在于線粒體,其最早發(fā)現(xiàn)于線粒體內膜,有保持線粒體膜流動性和穩(wěn)定性的作用。心肌磷脂和細胞色素C間的分子聯(lián)系包括,C端氫鍵結合作用和疏水作用,A端的靜電作用。大部分細胞色素C與線粒體內膜結合,當細胞色素C和心肌磷脂之間的靜電作用、疏水作用和氫鍵結合作用被破壞,細胞色素C就會離開線粒體,進入胞漿。研究顯示氧化應激減少了心肌磷脂和細胞色素C的結合力,同時心肌磷脂的抗氧化作用促進了細胞色素C在線粒體內膜的固定。細胞色素C在凋亡中釋放過程分為兩步。首先細胞色素C和線粒體內膜的心肌磷脂分離,接著通過線粒體外膜中Bax等的透化作用,釋放到胞質中。越來越多的實驗顯示ROS促進細胞色素C與心肌磷脂分離,接著細胞色素C通過促凋亡蛋白在線粒體外膜中打開的孔道進入胞漿溶質。再灌注的兔心心肌缺血模型中ROS生成過多引起了心肌磷脂的氧化和變性,并伴隨線粒體COX活力的下降。此外,在中毒神經元細胞的研究中發(fā)現(xiàn),ROS介導了細胞色素C從線粒體中的釋放。Bcl-2能調節(jié)線粒體膜對一些促凋亡蛋白的通透性,位于線粒體上游的Bax能調控一些小分子如細胞色素C等通過線粒體膜進入胞質,進一步激活下游caspase級聯(lián)反應,從而引起細胞凋亡。實驗表明細胞色素C從線粒體釋放是細胞凋亡的關鍵步驟,其與caspase-9結合形成凋亡小體,同時激活的caspase-9能激活其它的caspase如caspase-3、caspase-7,其中caspase-3是caspase級聯(lián)反應下游最關鍵的凋亡執(zhí)行者。傳統(tǒng)的抗氧化劑療效欠佳,大多是因為這些化合物大量分布在細胞外或胞漿內,不能進入線粒體,難以發(fā)揮抗氧化作用。SS肽屬于可滲入細胞的小分子多肽家族,其能夠靶向定位和聚集在線粒體內膜上,清除細胞內ROS并抑制線粒體ROS的產生,從而防止線粒體通透性改變和細胞色素C的釋放。研究顯示對于糖尿病大鼠的視網(wǎng)膜損傷,SS-31能夠有效的改善視網(wǎng)膜的氧化應激狀態(tài)以及保護其結構的完整性。次氯酸修飾白蛋白(HOCl-alb)是氧化應激過程中形成的蛋白質氧化修飾產物,是1996年Witko-Sarsat及其同事首次在尿毒癥血液透析患者血漿中檢測到的,后來發(fā)現(xiàn)它們在糖尿病患者體內也有明顯升高。在體外用次氯酸(HOCl)作用于人血清白蛋白同樣可以得到與尿毒癥患者血漿中類似的HOCl-alb. HOCl-alb不僅是氧化應激的產物和標志物,其作為強的促氧化應激和促炎癥反應介質,研究已經較為充分,HOCl-alb能夠誘導糖尿病大鼠巨噬細胞趨化浸潤、MCP-1和TGF-β表達上調、ROS產生增加、蛋白尿以及腎小球病理性改變加重。但它是否能夠通過線粒體相關的信號傳遞途徑誘導或加重糖尿病腎病足細胞凋亡,尚不清楚。本課題采用鏈脲佐菌素誘導的糖尿病大鼠作為模型,驗證我們的假設：糖尿病環(huán)境中,HOCl-alb通過誘導線粒體功能失常和細胞內活性氧產生,激活凋亡信號,誘導足細胞凋亡,導致腎小球基底膜屏障功能受損,最終導致蛋白尿發(fā)生和腎小球硬化。線粒體靶向抗氧化劑SS-31可能通過阻斷線粒體氧化應激損傷,抑制HOCl-alb對足細胞的促凋亡通路,減少足細胞的丟失和蛋白尿的形成,從而起到預防或延緩糖尿病腎病進展的作用。材料和方法一.體外制備無內毒素HOCl修飾的大鼠血清白蛋白(HOCl-RSA)及其鑒定：采用Witko-Sarsat等介紹的方法。將無內毒素的RSA溶液與次氯酸溶液按照1：140摩爾比混合,室溫放置30分鐘。制備的HOCl-RSA在4℃無內毒素磷酸鹽(PBS)緩沖液中透析24小時,以除去游離的次氯酸。用0.22μm一次性針頭濾器過濾除菌,分裝后4℃保存。將無內毒素的RSA溶液與無菌PBS等體積混合,作為對照。試驗中所有玻璃器皿均放入180℃烤箱4小時以去除內毒素。含量測定以不同濃度氯胺T為標準品制作標準曲線,測定酸性條件下340nm處的吸光度值。所制備的HOCl-RSA中HOCl-alb含量為5.14±0.25nmol/mg蛋白,未修飾的RSA中HOCl-alb含量為0.21±0.05nmol/mg蛋白。采用鱟試驗法測定制備的HOC1-RSA內毒素含量,并證實內毒素水平低于0.025EU/ml。二.SS肽的合成和進入線粒體的鑒定1.SS肽的合成SS肽由杭州中肽公司協(xié)助合成,SS肽氨基酸序列和化學結構如下：SS-02(Dmt-D-Arg-Phe-Lys-NH2, Dmt=2',6'-dimethyltyrosine), SS-31 (D-Arg-Dmt-Lys-Phe-NH2).2.線粒體提取取腎組織(皮質),按照試劑盒說明書提取線粒體。3.SS肽體外進入線粒體的鑒定用固相法合成SS-02(Dmt-D-Arg-Phe-Lys-NH2, Dmt=2',6'-dimethyltyrosine),用[3H]標記SS-02,采用液體閃爍計數(shù)儀進行在線粒體中定位的實驗研究。結果顯示,SS-02分布于線粒體外膜約20-30%,線粒體內膜約50%,線粒體基質20-30%。三.糖尿病模型的制備和分組1、模型制備成年雄性SD (SpragueDawley)大鼠,購于南方醫(yī)科大學實驗動物中心,體重180-220g,在恒溫SPF級環(huán)境(南方醫(yī)科大學SPF級實驗動物中心)飼養(yǎng),自由進食及飲水。禁食16小時后單次腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ) 60mg/kg(溶于0.01mol/L檸檬酸緩沖液,PH4.5,現(xiàn)配現(xiàn)用),72小時后剪尾取血,用電子血糖儀測量血糖,血糖值16.7mmol/L作為糖尿病(DM)動物模型。2、實驗動物分組①正常大鼠對照組1：尾靜脈注射PBS,1次/日；②正常大鼠對照組2：尾靜脈注射未經修飾的大鼠白蛋白：RSA 40mg/kg,1次/日；③DM大鼠RSA注射組：尾靜脈注射未經修飾的大鼠白蛋白：RSA 40mg/kg,1次/日；④DM大鼠HOCl-RSA注射組：尾靜脈注射HOCl修飾的大鼠白蛋白:HOCl-RSA 40mg/kg,1次/日；⑤DM大鼠SS-31干預組：腹腔注射3mg/kg SS-31,1次/日；⑥DM大鼠HOCl-RSA注射及SS-31干預組：尾靜脈注射HOCl-RSA 40mg/kg,1次/日；同時給予腹腔注射3mg/kg SS-31,1次/日；3、標本留取于分組后進行大鼠干預16周,取標本前一天將大鼠放于代謝籠中留取24小時尿并記錄尿量,離心20分鐘(4℃ 3000rpm),分裝后-70℃冰箱凍存。將大鼠充分麻醉后固定于鼠板上,腹主動脈取血,EDTA-K2抗凝管收集血標本,30min內離心15分鐘(4℃3000rpm),留取血漿,分裝后-70℃凍存。4℃生理鹽水灌注腹主動脈至腎臟蒼白色,以去除循環(huán)中的紅細胞,迅速摘取左右側腎臟,分離腎皮質和髓質,留取皮質。四.檢測指標1.生化指標：血漿及尿液標本用全自動生化分析儀檢測血糖(GLU)、白蛋白(ALB)、微量白蛋白(mALB)、血肌酐(SCr)、尿肌酐(SCr),并計算內生肌酐清除率(CCr),CCr (ml/min/kg)=尿肌酐／血肌酐/24h(1440min)×24小時尿量／大鼠體重。2.腎皮質勻漿、血漿HOCl-alb濃度檢測：采用分光光度法。3.尿8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)定量：應用商品化的ELISA試劑盒檢測。4.病理組織學觀察：腎皮質經固定、脫水、石蠟包埋,4gm切片,行PAS及Masson染色。5.足細胞凋亡的變化：冰凍切片TUNEL熒光標記法計數(shù)凋亡的足細胞6. Western Blotting檢測相關蛋白：腎皮質勻漿,提取總蛋白,檢測caspase-3, caspase-7, caspase-9, WT-1和PARP-1表達；腎皮質勻漿,分別提取線粒體蛋白和胞漿蛋白,檢測Cytochrome C表達。7.免疫組織化學計數(shù)腎小球足細胞數(shù)目：腎皮質經固定、脫水、石蠟包埋,4μm切片,Wilms' Tumor (WT-1)染色腎小球足細胞核,計算足細胞數(shù)目。結果一、大鼠物理和生化指標變化：1、體重糖尿病組大鼠體重均較正常組對照組①、②下降(①623.72±21.20,②619.23±23.47 vs③249.62±29.11,④173.35±27.60,⑤310.14±32.75,⑥241.38±27.29,P均0.001),注射HOCl-alb及干預性SS-31治療均對體重無顯著影響(P0.05 vs組③)。2、血糖糖尿病組大鼠血糖均高于正常組對照組①、②(①5.6±0.8,②5.8±1.0 vs③29.78±2.51,④31.46±3.23,⑤32.34±2.76,⑥30.40±2.48,P均0.001),證明糖尿病大鼠成模,而注射HOCl-alb及干預性SS-31治療均對血糖無顯著影響(P0.05 vs組③)。3、尿白蛋白排泄量糖尿病組大鼠24小時尿蛋白定量高于正常對照組①、②(①0.19±0.05,②0.21±0.03,③0.34±0.09,④0.51±0.10,⑤0.27±0.08,⑥0.30±0.11,P0.05 vs組①、②),同時注射HOCl-alb使糖尿病大鼠尿蛋白排泄量增加(③0.34±0.09 vs④0.51±0.10,P0.01),SS-31干預治療則可顯著減輕HOCl-RSA引起的尿蛋白排泄量增加(④0.51±0.10 vs⑤0.27±0.08,⑥0.30±0.11,P0.01)。4、肌酐清除率：糖尿病組大鼠肌酐清除率均高于正常組對照組①、②(①6.24±1.09,②6.37±1.22 vs③10.61±2.36,④13.95±4.62,⑤7.67±1.84,⑥8.80±2.03,P均0.05),注射HOCl-alb使糖尿病大鼠肌酐清除率升高(③10.61±2.36 vs④13.95±4.62,P0.05),SS-31干預治療則可改善HOCl-alb引起的肌酐清除率升高(④13.95±4.62 vs⑤7.67±1.84,⑥8.80±2.03,P0.01)。二、腎組織病理學改變腎組織經Masson染色和PAS染色,光鏡下觀察顯示,正常對照組大鼠腎小球結構完整,大小均一,基底膜、系膜無增生,腎小管管壁光滑無變性。糖尿病組大鼠腎小球體積增大,腎小球基底膜增厚和系膜輕度增生,腎小管上皮細胞呈灶性脫落壞死、顆粒樣和空泡樣變性。注射HOC1-RSA組糖尿病大鼠比注射RSA組糖尿病大鼠病理改變更明顯,部分腎小球已階段性硬化,而注射SS-31組糖尿病大鼠的大部分病理改變則被阻斷。三、氧化應激指標變化：1、血漿HOCl-alb含量糖尿病組大鼠血漿HOCl-alb高于正常對照組①、②(①85.34±11.28,②100.63±14.7 vs③193.54±10.69,④426.67±14.94,⑤143.33±4.39,⑥237.5±12.16,P均0.05),注射HOC1-RSA可升高糖尿病大鼠血漿HOCl-alb水平(③193.54±10.69 vs④426.67±14.94,P0.01),SS-31干預則可減輕HOCl-RSA引起的血漿HOCl-alb水平的升高(④426.67±14.94 vs⑤143.33±4.39,⑥237.5±12.16,P0.01)。2、腎組織勻漿HOCl-alb含量糖尿病組大鼠腎勻漿HOCl-alb含量高于正常對照組①、②(①5.67±0.19,②6.75±0.37 vs③16.32±1.07,④20.25±1.02,⑤9.38±0.75,⑥15.71-0.38,P均0.05),注射HOCl-RSA可升高糖尿病組大鼠腎勻漿HOCl-alb水平(③16.32±1.07 vs④20.25-1.02,P0.01),SS-31干預治療則可減輕HOCl-RSA引起的腎勻漿HOCl-alb水平升高(④20.25±1.02 vs⑤9.38±0.75,⑥15.71±0.38,P0.01)。3、尿8-OHdG定量糖尿病組大鼠24小時尿8-OHdG定量高于正常對照組①、②(①52.88±13.45,②58.56±20.65 vs③170.83±23.29,④473.2±66.69,⑤93.77±48.9,⑥132.86±54.18,P均0.05),注射HOCl-RSA使糖尿病大鼠尿8-OHdG增加(③170.83±23.29 vs④473.2±66.69,P0.01),SS-31干預治療則可減輕HOCl-RSA引起的尿8-OHdG水平升高(④473.2±66.69 vs⑤93.77±48.9,⑥132.86±54.18,P0.01)。四、Cyt C蛋白表達的變化：應用Western Blotting檢測了細胞色素C的表達。結果顯示,與正常對照大鼠相比,糖尿病大鼠胞漿內Cyt C蛋白水平明顯增加(P0.015 vs組①、②)；與注射RSA組糖尿病大鼠相比,注射HOCl-RSA組糖尿病大鼠胞漿內Cyt C水平進一步增加(P0.008 vs組③)；SS-31干預則可改善HOCl-RSA引起的胞漿內Cyt C水平增加(P0.021 vs組④)各組線粒體內Cyt C蛋白水平的變化與胞漿內Cyt C蛋白水平的變化相反。五、足細胞凋亡的變化采用TUNEL熒光標記法檢測凋亡的足細胞。與正常對照組相比,糖尿病大鼠TUNEL陽性細胞數(shù)目明顯減少(P0.028 vs組①、②)；注射HOCl-RSA組糖尿病大鼠TUNEL陽性的足細胞比注射RSA組糖尿病大鼠顯著增高(p=0.012)；線粒體靶向肽SS-31干預顯著降低了HOCl-RSA誘導的足細胞凋亡(p=0.023)。提示了SS-31能降低足細胞氧化應激,進而減少了足細胞凋亡。六、凋亡相關蛋白表達：在氧化應激誘導凋亡的信號通路中,caspase-3是caspase級聯(lián)反應下游最關鍵的凋亡執(zhí)行者。應用Western Blotting檢測caspase-3, caspase-7, caspase-9, PARP-1蛋白的表達。結果顯示,與正常對照大鼠相比,糖尿病大鼠caspase-3. caspase-7, caspase-9, PARP-1均伴隨裂解片段的顯著增加(P0.023 vs組①、②)；與注射RSA組糖尿病大鼠相比,注射HOCl-RSA組糖尿病大鼠caspase 3, caspase 7, caspase 9, PARP-1裂解片段進一步增加(P0.005 vs組③)：而注射SS-31組糖尿病大鼠裂解片段的表達則大幅減少(P0.019 vs組④)。七、足細胞丟失數(shù)量的變化：為了驗證HOCl-alb誘導足細胞凋亡導致腎小球足細胞丟失,足細胞數(shù)目減少,應用足細胞細胞核特異性抗原WT-l染色腎小球足細胞來計數(shù)腎小球足細胞數(shù)目。每個腎小球記錄WT-1陽性核染色數(shù)目。每組選取8只大鼠,隨機選擇50個腎小球計算WT-1陽性核數(shù)目,取平均值。結果顯示,與正常對照組相比,糖尿病大鼠WT-1陽性細胞數(shù)目明顯減少(P0.030 vs組①、②)；與注射RSA組糖尿病大鼠相比,注射HOCl-RSA組糖尿病大鼠WT-1陽性細胞數(shù)目進一步降低(P0.011 vs組③)；SS-31干預顯著改善了HOCl-RSA誘導的足細胞丟失(P0.009 vs組④)。采用Western Blotting檢測WT-1蛋白的表達。結果顯示,與正常對照組相比,糖尿病大鼠WT-1蛋白水平明顯減少(P0.018 vs組①、②)：注射HOCl-RSA組糖尿病大鼠比注射RSA組糖尿病大鼠WT-1蛋白水平進一步降低(P0.003 vs組③)；SS-31干預顯著改善了HOCl-RSA誘導的WT-1蛋白水平降低(P0.007vs組④)。結論一、HOCl-alb加重糖尿病大鼠蛋白尿、腎小球高濾過和腎損傷,其機制可能是通過誘導體內氧化應激和線粒體損傷,細胞色素C外流,胞漿中細胞色素C水平上調激活凋亡相關信號,進而導致足細胞凋亡、足細胞丟失和數(shù)量減少。二、線粒體靶向肽的干預阻止了HOCl-alb誘導的足細胞凋亡,從而起到腎保護作用。因此,阻斷線粒體氧化應激損傷,可能成為能夠延緩糖尿病腎病進展、改善糖尿病腎病預后的新靶標。
【關鍵詞】：次氯酸修飾白蛋白 糖尿病大鼠 氧化應激 足細胞 凋亡
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 摘要3-12
• ABSTRACT12-25
• 前言25-30
• 材料與方法30-47
• 一、實驗材料30-35
• 二、體外制備無內毒素HOCl修飾的大鼠白蛋白(HOCl-RSA)35-36
• 三、SS肽的合成和進入線粒體的鑒定36-38
• 四、動物模型制備及分組38-39
• 五、標本的收集和處理39
• 六、檢測步驟39-46
• 七、統(tǒng)計學方法46-47
• 結果47-59
• 一、無內毒素HOCl-alb修飾蛋白的鑒定47
• 二、大鼠物理和生化指標變化47-48
• 三、腎組織病理學改變48-50
• 四、氧化應激指標變化50-52
• 五、Cyt C蛋白表達的變化52-53
• 六、足細胞凋亡的變化53-54
• 七、凋亡相關蛋白表達54-56
• 八、足細胞丟失數(shù)量的變化56-59
• 討論59-61
• 結論61-62
• 參考文獻62-67
• 綜述67-79
• 參考文獻73-79
• 縮略語詞匯表79-80
• 攻讀學位期間成果80-81
• 致謝81-82

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9 本報記者 劉艷芳;糖尿病干預不能忽視抗氧化[N];中國食品報;2012年

10 譚小月;糖尿病與腎病關系研究的新進展[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮偉偉;蘋果酸鉻對2型糖尿病大鼠的降血糖活性、作用機制及安全性初探[D];江蘇大學;2015年

2 劉宇;糖尿病來源的骨髓間充質干細胞治療心肌梗死的相關研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

3 李維辛;GLP-1受體激動劑治療糖尿病的循證評價和對糖尿病大鼠胃動力影響的機制研究[D];蘭州大學;2012年

4 田麗;糖尿病周圍神經病運動纖維的早期評價[D];天津醫(yī)科大學;2014年

5 柳忠豪;糖尿病對口腔種植體骨整合影響的作用機制研究[D];山東大學;2015年

6 李波;飽和富氫液對糖尿病神經病變的保護作用及機制研究[D];天津醫(yī)科大學;2015年

7 米佳;Vaspin調控糖尿病炎癥通路及苦酸通調法的干預機制研究[D];長春中醫(yī)藥大學;2015年

8 林宣佑;從SCAP/SREBP脂代謝信號轉導途徑探討苦酸通調方調控2型糖尿病胰島素抵抗的作用機制[D];長春中醫(yī)藥大學;2015年

9 齊月;木丹顆粒治療痛性糖尿病周圍神經病變的實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2015年

10 王云;糖基化終末產物介導的平滑肌病變在糖尿病結腸動力障礙中的作用研究[D];南京醫(yī)科大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 石鷹;二膦酸鹽對糖尿病大鼠下頜骨骨折愈合影響的實驗研究[D];河北聯(lián)合大學;2014年

2 鄭嫦;CNP對Ach引起的糖尿病大鼠胃平滑肌收縮增強的影響及IGF-1的干預效應[D];延邊大學;2015年

3 李寧;益氣養(yǎng)陰活血方對糖尿病大鼠大血管NF-κB表達的影響[D];河北醫(yī)科大學;2015年

4 王婉秋;辛伐他汀對2型糖尿病動脈硬化大鼠血漿VEGF、TGF-β1及CTRP3水平的影響研究[D];石河子大學;2015年

5 宋倩;2型糖尿病患者血清TLR-4水平與骨密度及影響因素關系研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

6 王麗霞;TLR4及相關炎癥因子在糖尿病大鼠心臟、肝臟和腎臟中的表達[D];河北醫(yī)科大學;2015年

7 孫雪培;極長鏈脂肪酸與2型糖尿病大鼠腦Aβ生成的關系研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

8 吳秋杰;Chemerin/ChemR23與糖尿病腎病內皮細胞—間充質細胞轉分化的關系研究[D];鄭州大學;2015年

9 楊銀玲;丁苯酞對STZ糖尿病大鼠認知功能障礙及AMPA受體表達的影響[D];河北醫(yī)科大學;2015年

10 李貞貞;8-OHdG和NADPH氧化酶p47phox G338A基因多態(tài)性與2型糖尿病腎臟病的相關性研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

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本文編號：757595