不同成熟狀態(tài)下樹突狀細(xì)胞與TRAF6間的關(guān)系
本文關(guān)鍵詞:不同成熟狀態(tài)下樹突狀細(xì)胞與TRAF6間的關(guān)系
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【摘要】:目的:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一種常見的慢性、損傷性自身免疫性疾病,其發(fā)病機(jī)制被認(rèn)為是由于體內(nèi)免疫平衡打破,體液免疫亢進(jìn)。樹突狀細(xì)胞(Dendritic Cell,DC)是體內(nèi)抗原提呈能力最強(qiáng)也是唯一能激活初始T細(xì)胞誘發(fā)正向免疫應(yīng)答的細(xì)胞,成熟DC被認(rèn)為在RA的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)是DC發(fā)育、生長、成熟的關(guān)鍵分子,研究TRAF6與DC成熟程度之間的關(guān)系,為將來治療RA提供新的藥物靶點(diǎn)及方向。方法:細(xì)胞因子rmGM-CSF、rmIL-4誘導(dǎo)C57小鼠骨髓細(xì)胞定向分化為未成熟DC,然后用細(xì)胞因子rmGM-CSF、rmIL-4、TNF-?、LPS、FK506分成四組分別誘導(dǎo)DC分化為不同成熟狀態(tài),用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-II分子證明DC處于不同成熟程度;ELISA檢測DC不同成熟狀態(tài)下IL-12的表達(dá)情況;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白免疫印跡法(Western-blot)檢測各組DC中TRAF6的mRNA以及蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:細(xì)胞因子rm GM-CSF、rmIL-4成功誘導(dǎo)骨髓細(xì)胞定向分化為DC,四組中表面分子CD80、CD86、MHC-II的表達(dá)量都有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P?0.05),其中以CD86表現(xiàn)得最為明顯;四組中IL-12的分泌量隨著DC的分化程度越高,分泌量也逐漸增加,組間存在明顯的統(tǒng)計學(xué)而差異(P?0.05),D組中IL-12分泌量達(dá)到10620.73?276.73pg/ml;D組中mRNA-TRAF6的表達(dá)水平顯著高于其它三組(P0.01);B、C兩組之間mRNA-TRAF6的表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異,但都高于對照組(A組)(P0.01);D組中TRAF6的蛋白表達(dá)量最高,與其它三組有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),B、C組與A組比較也存在明顯的統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),C組的表達(dá)比B組高(P0.01)。結(jié)論:不同分化成熟狀態(tài)下DC表面共刺激分子的表達(dá)量逐漸增加;IL-12、mRNA-TRAF6、Protein-TRAF6的表達(dá)量與DC的成熟程度呈正相關(guān)。TRAF6在DC的發(fā)育、分化、成熟中發(fā)揮重要的作用。
【關(guān)鍵詞】:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 樹突狀細(xì)胞 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6
【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R593.22
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- ABSTRACT7-9
- 英漢縮略詞對照表9-10
- 前言10-11
- 第一部分 利用細(xì)胞因子體外誘導(dǎo)C57小鼠骨髓中樹突狀細(xì)胞的分化并刺激成熟11-19
- 1 材料與方法11-15
- 1.1 實驗材料與儀器11-12
- 1.2 實驗方法12-15
- 1.3 統(tǒng)計分析15
- 2 結(jié)果15-18
- 2.1 樹突狀細(xì)胞的培養(yǎng)15-16
- 2.2 DC的成熟表現(xiàn)變化16-17
- 2.3 不同成熟狀態(tài)下IL-12 的表達(dá)17-18
- 3 討論18
- 4 結(jié)論18-19
- 第二部分 TRAF6在小鼠不同成熟度樹突狀細(xì)胞中的表達(dá)19-31
- 1 材料與方法19-27
- 1.1 實驗材料與儀器19-20
- 1.2 實驗方法20-27
- 1.3 結(jié)果的檢測和分析27
- 2 結(jié)果27-28
- 2.1 mRNA-TRAF6電泳情況27-28
- 2.2 DC中TRAF6蛋白表達(dá)情況28
- 3 討論28-30
- 4 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-37
- 綜述37-44
- 參考文獻(xiàn)41-44
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄44-45
- 致謝45-46
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10 張文;張p,
本文編號:723259
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