發(fā)布時(shí)間：2017-08-18 05:04

  本文關(guān)鍵詞：高糖環(huán)境對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞壞死性凋亡及IL-6表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:通過(guò)體外實(shí)驗(yàn),觀察高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)中的RIP1、RIP3和IL-6表達(dá)情況,探討壞死性凋亡對(duì)HUVECs損傷的作用及機(jī)制。方法:通過(guò)對(duì)HUVECs的體外培養(yǎng),采用免疫熒光法測(cè)定HUVECs的標(biāo)記性抗原(凝血因子VIII)表達(dá)情況來(lái)進(jìn)行細(xì)胞鑒定,根據(jù)不同干預(yù)條件,隨機(jī)分成三組:正常組(葡萄糖含量為5.5mmol/L),高糖組(葡萄糖含量為30mmol/L),甘露醇組(葡萄糖含量為5.5mmol/L+甘露醇含量為24.5mmol/L),采用real-time PCR檢測(cè)RIP1、RIP3、IL-6的m RNA表達(dá)情況,采用免疫細(xì)胞化學(xué)與蛋白印跡法(WB)檢測(cè)RIP1、RIP3、IL-6的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:1.免疫熒光:HUVECs可表達(dá)凝血因子VIII,且主要表達(dá)于細(xì)胞漿中,細(xì)胞鑒定為HUVECs。2.RT-PCR:高糖刺激HUVECs后,RIP1、RIP3、IL-6的m RNA表達(dá)量明顯增加,均高于正常組與甘露醇組(P0.05),而在正常組與甘露醇組之間上述各指標(biāo)表達(dá)無(wú)差別(P0.05)。高糖組IL-6與RIP1、RIP3 m RNA的相對(duì)表達(dá)量均呈顯著正相關(guān)性(分別為r=0.961,P0.001;r=0.801,P=0.010)。3.免疫細(xì)胞化學(xué):RIP1、RIP3、IL-6主要在HUVECs的細(xì)胞漿中表達(dá),高糖刺激HUVECs后,RIP1、RIP3、IL-6的蛋白表達(dá)量明顯增加,均高于正常組與甘露醇組(P0.05),而在正常組與甘露醇組之間上述各指標(biāo)表達(dá)無(wú)差別(P0.05)。高糖組IL-6與RIP1、RIP3的IOD值均呈顯著正相關(guān)性(分別為r=0.755,P=0.019;r=0.810,P=0.008)。4.蛋白印跡法(Western Blot):高糖刺激HUVECs后,RIP1、RIP3、IL-6的蛋白表達(dá)量顯著增長(zhǎng),均高于正常組與甘露醇組(P0.05),而在正常組與甘露醇組之間上述各指標(biāo)表達(dá)無(wú)差別(P0.05)。高糖組IL-6與RIP1、RIP3的蛋白表達(dá)量均呈顯著正相關(guān)性(r=0.908,P0.001;r=0.966,P0.001)。結(jié)論:高糖環(huán)境下,人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的RIP1與RIP3表達(dá)量均增加,說(shuō)明細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡增加,該類(lèi)程序化死亡可能進(jìn)一步導(dǎo)致細(xì)胞炎癥因子IL-6表達(dá)量增多,壞死性凋亡和IL-6相互作用,加重了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)和損傷。
【關(guān)鍵詞】：受體相互作用蛋白激酶1 受體相互作用蛋白激酶3 白細(xì)胞介素-6 壞死性凋亡 內(nèi)皮細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 英縮略詞對(duì)照表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-22
• 結(jié)果22-35
• 討論35-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 綜述42-50
• 參考文獻(xiàn)47-50
• 致謝50-51
• 作者簡(jiǎn)介51-52

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本文編號(hào)：692761