代謝綜合征患者腸道菌群特征及其與脾虛痰濕證的相關(guān)性研究
本文關(guān)鍵詞:代謝綜合征患者腸道菌群特征及其與脾虛痰濕證的相關(guān)性研究
更多相關(guān)文章: 腸道菌群 代謝綜合征 辨證分型 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
【摘要】:研究背景代謝綜合征(Metabolic Syndrome,MS)在全球及我國均廣泛流行并呈現(xiàn)明顯的上升趨勢,目前,MS病因及發(fā)病機(jī)制尚不十分明確,治療上亦無明顯突破。近年,腸道“微生態(tài)失衡”學(xué)說與代謝性疾病發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性已成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn),研究表明,腸道菌群失調(diào)在糖尿病、肥胖癥的發(fā)生發(fā)展中起重要作用;而MS與糖尿病、肥胖有著共同土壤——胰島素抵抗;傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為脾胃與腸道菌群直接相關(guān),而MS與“脾”的關(guān)系最為密切。這些均提示MS發(fā)生、發(fā)展可能與腸道菌群之間存在某種相關(guān)性。目前,國內(nèi)外關(guān)于腸道菌群與代謝性疾病的研究大多集中在肥胖癥、2型糖尿病,而與MS相關(guān)性的研究較少,且僅局限于動物實(shí)驗(yàn)水平,關(guān)于人體腸道菌群結(jié)構(gòu)和數(shù)量的研究尚未見系統(tǒng)報(bào)道,MS作為多種重大慢性疾病的“高!币蛩丶啊扒捌凇睜顟B(tài),對其進(jìn)行深入研究意義重大。研究目的1)本研究擬采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(Q-PCR),通過對中老年MS患者及健康對照者腸道內(nèi)的4大菌門的9類主要菌群進(jìn)行定量分析,進(jìn)而比較MS患者與健康人在腸道菌群數(shù)量上的差異,以闡述腸道菌群與MS的相關(guān)性,為MS的發(fā)病機(jī)制尋找新線索,為其防治尋求新靶點(diǎn)。2)同時(shí)探討MS脾虛痰濕證腸道菌群特征,為MS的中醫(yī)辨證分型提供理論依據(jù),探討脾虛證的實(shí)質(zhì),并指導(dǎo)今后治療。研究方法根據(jù)CDS(2013)MS西醫(yī)學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn),選取MS患者80例(脾虛痰濕證患者40例,氣陰兩虛證40例),并選取30例健康人作對照,留取糞便標(biāo)本,提取糞便基因組DNA,應(yīng)用16sr RNAV3序列設(shè)計(jì)各菌屬特異性引物,以質(zhì)粒作為標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過Q-PCR反應(yīng),對各目標(biāo)菌屬進(jìn)行絕對定量分析。研究結(jié)果1)MS與健康組各目標(biāo)菌屬數(shù)量的比較:MS患者在腸道總菌屬、雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸球菌屬數(shù)量低于健康對照組(P0.05),球形梭菌、柔嫩梭菌、大腸桿菌數(shù)量高于對照組(P0.05)。2)MS脾虛痰濕證組、氣陰兩虛證組及健康對照組3組間各目標(biāo)菌屬數(shù)量比較:3組在總菌屬、球形梭菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌、柔嫩梭菌、腸球菌屬、大腸桿菌差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),進(jìn)一步對有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的菌屬進(jìn)行兩兩比較:(1)MS脾虛痰濕證組與健康對照組相比在總菌屬、雙歧桿菌、乳酸桿菌含量均降低,球形梭菌、柔嫩梭菌、腸球菌屬、大腸桿菌顯著增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)MS脾虛痰濕證與氣陰兩虛證相比雙歧桿菌含量顯著降低,大腸桿菌含量顯著增高(P0.05)。(3)MS氣陰兩虛證組與健康組相比腸道總菌群數(shù)量減少,腸球菌屬數(shù)量增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1)MS患者存在菌群失調(diào),腸道菌群的失調(diào)可能與MS的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。2)MS不同中醫(yī)證型間腸道菌群存在差異。3)腸道菌群失調(diào)在脾虛痰濕證MS中起重要作用,腸道菌屬的變化可以作為MS脾虛證的客觀指標(biāo)之一。
【關(guān)鍵詞】:腸道菌群 代謝綜合征 辨證分型 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
【學(xué)位授予單位】:大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R589
【目錄】:
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-12
- 前言12-14
- 資料及方法14-26
- 1 實(shí)驗(yàn)材料14-17
- 1.1 研究對象14-15
- 1.2 研究菌群15-16
- 1.3 主要試劑16
- 1.4 主要儀器16-17
- 1.5 人體測量及標(biāo)本采集17
- 2 實(shí)驗(yàn)步驟17-26
- 2.1 糞便樣品中總DNA提取17-19
- 2.2 糞便細(xì)菌總DNA純度及濃度測定19
- 2.3 標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建19-24
- 2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作24-25
- 2.5 各菌群的定量分析25-26
- 2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析26
- 結(jié)果26-35
- 3.1 研究對象的基本信息及代謝指標(biāo)統(tǒng)計(jì)結(jié)果26-27
- 3.2 DNA 的純度、完整性檢測結(jié)果27
- 3.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果27-33
- 3.4 MS與健康對照組各菌屬數(shù)量比較33-34
- 3.5 MS脾虛痰濕證組與氣陰兩虛組及健康組各菌屬數(shù)量的比較34-35
- 討論35-39
- 結(jié)論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-43
- 綜述 代謝綜合征研究概況43-53
- 參考文獻(xiàn)49-53
- 附件53-54
- 致謝54-55
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,本文編號:671546
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