本文關(guān)鍵詞：貽貝誘導(dǎo)線蟲(chóng)類痛風(fēng)癥狀的觀察與基因表達(dá)測(cè)定

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【摘要】：經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人們生活水平的提高,促使飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生很大的改變,海鮮的攝食量也在逐年上升,研究發(fā)現(xiàn)海鮮是引起痛風(fēng)的一種高風(fēng)險(xiǎn)因素。痛風(fēng)是體內(nèi)嘌呤代謝紊亂,血尿酸升高,尿酸以鈉鹽形式沉積在關(guān)節(jié)或組織處的一種代謝性疾病。本課題以秀麗隱桿線蟲(chóng)作為模式生物,研究貽貝的攝食是否會(huì)誘導(dǎo)線蟲(chóng)類痛風(fēng)癥狀的發(fā)生,進(jìn)而考察攝食貽貝是否影響尿酸代謝。本課題通過(guò)在線蟲(chóng)生長(zhǎng)培養(yǎng)基中添加三種不同濃度的(0.1%、1%、10%)貽貝提取液,從壽命、活性、身體僵硬度(爬行波長(zhǎng)次數(shù)、頭部擺動(dòng)頻率、爬行波長(zhǎng)振幅大小)方面對(duì)線蟲(chóng)生理特征進(jìn)行觀察、統(tǒng)計(jì)和分析,最終發(fā)現(xiàn)高濃度貽貝提取液能夠誘使線蟲(chóng)類痛風(fēng)癥狀的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)室早期研究發(fā)現(xiàn)10%文蛤、10%鮮蛤的攝食能夠顯著降低線蟲(chóng)的壽命并引發(fā)類痛風(fēng)癥狀�；诖隧�(xiàng)研究結(jié)果,本課題將10%貽貝分別與10%文蛤、10%鮮蛤提取液等比例混合喂養(yǎng)線蟲(chóng),對(duì)線蟲(chóng)的壽命、活性、身體僵硬度等生理指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,進(jìn)而判斷添加貽貝的海鮮混合液的作用效果。結(jié)果顯示雖然不同種類海鮮混合液的攝食在線蟲(chóng)壽命方面并無(wú)顯著性的改變,但是攝食混合海鮮比單一類別海鮮對(duì)線蟲(chóng)生理特征影響更為明顯。通過(guò)查詢線蟲(chóng)體內(nèi)與人類痛風(fēng)相關(guān)基因的同源基因,并在KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)中下載各個(gè)基因的生物代謝途徑,導(dǎo)入到KGML軟件中經(jīng)過(guò)編輯形成線蟲(chóng)痛風(fēng)局部基因網(wǎng)絡(luò),結(jié)果顯示有三個(gè)線蟲(chóng)痛風(fēng)相關(guān)基因成功連入網(wǎng)絡(luò),其中R151.2、Y105E8B.5兩個(gè)基因直接參與嘌呤代謝。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),分別對(duì)10%文蛤、10%鮮蛤、10%貽貝、10%貽貝+10%文蛤、10%貽貝+10%鮮蛤培養(yǎng)基中培養(yǎng)六天的線蟲(chóng)進(jìn)行痛風(fēng)相關(guān)基因定量分析以及尿酸含量檢測(cè),初步數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)貽貝的攝食能夠影響痛風(fēng)相關(guān)基因在線蟲(chóng)體內(nèi)的表達(dá),進(jìn)而影響線蟲(chóng)體內(nèi)尿酸含量變化,但其對(duì)痛風(fēng)患病機(jī)制的影響并非是單一基因的調(diào)控作用,而是多個(gè)基因相互影響共同調(diào)控的結(jié)果。海鮮攝食誘發(fā)痛風(fēng)患病的機(jī)制是個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,需要進(jìn)一步深入研究。
【關(guān)鍵詞】：痛風(fēng) 秀麗隱桿線蟲(chóng) 貽貝 局部基因網(wǎng)絡(luò) 尿酸 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R589.7
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-19
• 1.1 課題背景9-10
• 1.2 研究目的及意義10
• 1.3 國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展10-17
• 1.3.1 痛風(fēng)相關(guān)研究進(jìn)展10-12
• 1.3.2 秀麗隱桿線蟲(chóng)研究進(jìn)展12-15
• 1.3.3 貽貝簡(jiǎn)介15
• 1.3.4 基因網(wǎng)絡(luò)15-16
• 1.3.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR16-17
• 1.4 課題來(lái)源和研究?jī)?nèi)容17-19
• 1.4.1 課題來(lái)源17
• 1.4.2 研究?jī)?nèi)容17-19
• 第2章 不同濃度的貽貝提取液對(duì)線蟲(chóng)類痛風(fēng)癥狀的影響19-30
• 2.1 引言19
• 2.2 材料與方法19-24
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器19-21
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法21-24
• 2.3 結(jié)果與分析24-29
• 2.3.1 對(duì)線蟲(chóng)壽命的影響24-26
• 2.3.2 線蟲(chóng)活性統(tǒng)計(jì)與分析26-27
• 2.3.3 線蟲(chóng)身體僵硬度統(tǒng)計(jì)與分析27-29
• 2.4 討論29
• 2.5 本章小結(jié)29-30
• 第3章 添加貽貝的混合海鮮液對(duì)線蟲(chóng)類痛風(fēng)癥狀的影響30-38
• 3.1 引言30
• 3.2 材料與方法30-31
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器30
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法30-31
• 3.3 結(jié)果與分析31-36
• 3.3.1 添加貽貝的海鮮提取液對(duì)線蟲(chóng)壽命的影響31-34
• 3.3.2 線蟲(chóng)活性的統(tǒng)計(jì)與分析34
• 3.3.3 線蟲(chóng)身體僵硬度的統(tǒng)計(jì)與分析34-36
• 3.4 討論36-37
• 3.5 本章小結(jié)37-38
• 第4章 線蟲(chóng)痛風(fēng)局部基因網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建38-46
• 4.1 引言38
• 4.2 材料與方法38-41
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料38-40
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法40-41
• 4.3 結(jié)果與分析41-44
• 4.3.1 線蟲(chóng)痛風(fēng)相關(guān)基因篩查結(jié)果41
• 4.3.2 線蟲(chóng)痛風(fēng)相關(guān)基因所參與的生物代謝途徑結(jié)果41-42
• 4.3.3 線蟲(chóng)痛風(fēng)局部基因網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建42-44
• 4.4 討論44
• 4.5 本章小結(jié)44-46
• 第5章 線蟲(chóng)尿酸代謝相關(guān)基因表達(dá)研究46-63
• 5.1 引言46
• 5.2 材料與方法46-51
• 5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器46-47
• 5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法47-51
• 5.3 結(jié)果與分析51-61
• 5.3.1 Q-PCR引物篩選結(jié)果51-52
• 5.3.2 Q-PCR檢測(cè)線蟲(chóng)痛風(fēng)相關(guān)基因表達(dá)水平結(jié)果52-59
• 5.3.3 線蟲(chóng)尿酸含量的測(cè)定與分析59-61
• 5.4 討論61-62
• 5.5 本章小結(jié)62-63
• 結(jié)論63-65
• 參考文獻(xiàn)65-70
• 附錄70-76
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文76-78
• 致謝78

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本文編號(hào)：598145