本文關(guān)鍵詞：肥胖對(duì)鼻內(nèi)滴注大腸桿菌致小鼠肺臟炎癥的影響研究

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【摘要】：通過向高脂飼料誘導(dǎo)的肥胖小鼠鼻內(nèi)滴注不同數(shù)量大腸桿菌,旨在探討肥胖對(duì)機(jī)體免疫調(diào)控及局部組織防御狀態(tài)的影響,為后期開展肥胖對(duì)機(jī)體免疫功能的研究提供一定的理論依據(jù)。(1)將30只24-25日齡的昆明雄鼠隨機(jī)分為：10只飼喂常規(guī)飼料作為正常組(ND組),20只飼喂高脂飼料作為高脂組(HD組),連續(xù)飼喂8周后,檢測(cè)小鼠血清中抵抗素、葡萄糖、胰島素濃度、肺泡灌洗液(BALF)中白細(xì)胞數(shù)量和肺組織形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果顯示,8周后,HD組小鼠體重、附睪脂肪量、血糖、血清胰島素、RETN濃度、Lee's指數(shù)、BALF 中 WBC、GRA、LYM、MID數(shù)量均顯著高于ND組,支氣管和肺泡周圍炎性細(xì)胞浸潤較ND組明顯增加。(2)取肥胖與非肥胖小鼠各32只,肥胖小鼠分為：A(6只)、B(20只)、C(6只)組,非肥胖小鼠分為：D(6只)、E(20只)、F(6只)組。A、D組鼻內(nèi)滴注40μL濃度為1×10~8 CFU/μL大腸桿菌菌液,B、E組鼻內(nèi)滴注4OμL 1×10~9 CFU/μL大腸桿菌菌液,C、F組鼻內(nèi)滴注40μL生理鹽水。24h后,每組取6只小鼠,采集肺臟,進(jìn)行大腸桿菌計(jì)數(shù)、觀察病理形態(tài)。結(jié)果顯示,大腸桿菌滴鼻后,A、B、D、E組小鼠出現(xiàn)了典型的呼吸道感染癥狀,其中A、D組無死亡,B、E組死亡率分別為25%和10%;肺臟中大腸桿菌數(shù)量比較,A組顯著高于D組,B、E組無顯著性差異；各試驗(yàn)組小鼠肺臟均出現(xiàn)了不同程度的充血出血、炎性細(xì)胞浸潤等病理變化,且A組損傷大于D組,B組大于E組。(3)將180只肥胖小鼠分為：0h(6只)、Ⅰ(42只)、Ⅲ(90只)、Ⅴ(42只)組,150只非肥胖小鼠分為：0h(6只)、Ⅱ(42只)、Ⅳ(60只)、Ⅵ(42只)組。0h不做任何處理,Ⅰ、Ⅱ組鼻內(nèi)滴注40μL1×10~8 CFU/μL的大腸桿菌菌液,Ⅲ、Ⅳ組鼻內(nèi)滴注40μL1×10~9 CFU/μL的大腸桿菌菌液,Ⅴ、Ⅵ組鼻內(nèi)滴注40gL生理鹽水。于0h和感染后2、6、12、24、48、72、96h,各組隨機(jī)選取6只小鼠,采集檢測(cè)血液和BALF中白細(xì)胞數(shù)量,血清和肺組織中的細(xì)胞因子濃度,觀察肺臟組織病理學(xué)變化。大腸桿菌滴鼻后,結(jié)果顯示：①Ⅰ、Ⅱ組血液中WBC先升高,后降低,在24h降至最低,隨后逐漸升高：Ⅲ、Ⅳ組WBC在2h時(shí)降低,后逐漸升高再降低,至48h時(shí)降至最低后稍有回升：②各組小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10、RETN迅速升高并維持至48h后逐漸降低：24h內(nèi)的細(xì)胞因子,Ⅰ組顯著高于Ⅱ組、Ⅲ組顯著高于Ⅳ組：96h時(shí),Ⅰ組IL-10和RETN顯著低于Ⅱ組,Ⅲ組IL-6、IL-10顯著高于Ⅳ組。③各組小鼠BALF中WBC、GRA、LYM、MID迅速增加,至24h達(dá)到峰值后急劇下降：整個(gè)試驗(yàn)期間,Ⅰ組白細(xì)胞數(shù)量高于Ⅱ組,Ⅲ組高于Ⅳ組。④各組小鼠肺臟中的RETN、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、MIP-2、IL-12和MCP-1先略降低,后在24h或48h升至峰值后下降：肺臟中檢測(cè)的細(xì)胞因子比較,整個(gè)試驗(yàn)期間,Ⅲ組高于Ⅳ組;72h內(nèi),Ⅰ組高于Ⅱ組；至96h,Ⅰ組TNF-α、IL-10、IL-12顯著低于Ⅱ組,而MIP-2和IL-6顯著高于Ⅱ組。⑤各組小鼠的肺臟出現(xiàn)了不同程度的充血出血、炎性浸潤等病理變化,隨后炎癥消散,組織結(jié)構(gòu)清晰。6h和24h時(shí),Ⅰ組較Ⅱ組、Ⅲ組較Ⅳ組,肺臟中炎性細(xì)胞浸潤更多,組織損傷更明顯：96h時(shí),Ⅱ組較Ⅰ組、Ⅲ組較Ⅳ組,組織結(jié)構(gòu)更紊亂。結(jié)論：1.昆明小鼠通過連續(xù)飼喂高脂飼料8周,可成功建立肥胖模型。2.鼻內(nèi)滴注40μL1×10~8 CFU/μL的大腸桿菌,成功建立了小鼠非致死性肺部感染模型；滴江40μL 1×10~9 CFU/μL的大腸桿菌,建立了昆明小鼠致死性肺部感染模型。3.肥胖提高了機(jī)體對(duì)病原菌刺激的敏感性,促進(jìn)了非致死性感染小鼠肺臟的炎癥消散和組織結(jié)構(gòu)修復(fù),卻加劇了致死性感染小鼠肺部的炎性損傷,抑制肺臟結(jié)構(gòu)與功能的恢復(fù),延長了機(jī)體的痊愈時(shí)間。
【關(guān)鍵詞】：肥胖 昆明小鼠 大腸桿菌 肺部感染 抵抗素
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R589.2
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 縮略詞表10-14
• 第一章 文獻(xiàn)綜述14-22
• 1 肥胖對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病的影響14-15
• 2 肥胖影響呼吸系統(tǒng)抗感染的機(jī)制15-20
• 2.1 機(jī)械因素15-16
• 2.2 生物因素16-20
• 2.2.1 糖脂代謝紊亂16
• 2.2.2 炎性細(xì)胞浸潤16-17
• 2.2.3 細(xì)胞因子平衡被破壞17-20
• 2.2.3.1 肥胖對(duì)TNF-α的影響17-18
• 2.2.3.2 肥胖對(duì)IL-6的影響18-19
• 2.2.3.3 肥胖對(duì)IL-10的影響19
• 2.2.3.4 肥胖對(duì)抵抗素的影響19-20
• 3 大腸桿菌感染呼吸系統(tǒng)的研究進(jìn)展20-21
• 4 研究目的與意義21-22
• 第二章 高脂誘導(dǎo)昆明小鼠肥胖模型的建立及其對(duì)肺臟的影響22-30
• 1 材料和方法22-24
• 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物22
• 1.2 飼料配方22-23
• 1.3 主要儀器和試劑23
• 1.4 小鼠營養(yǎng)性肥胖模型的建立23
• 1.5 樣本采集和指標(biāo)檢測(cè)23-24
• 1.5.1 體質(zhì)量測(cè)定23
• 1.5.2 計(jì)算Lee's肥胖指數(shù)23
• 1.5.3 血液樣本處理及指標(biāo)檢測(cè)23
• 1.5.4 附睪脂肪含量檢測(cè)23
• 1.5.5 肺泡灌洗液(BALF)中白細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)23-24
• 1.5.6 組織形態(tài)學(xué)檢查24
• 1.6 數(shù)據(jù)分析24
• 2 結(jié)果24-27
• 2.1 各組小鼠的體質(zhì)量變化24-25
• 2.2 小鼠存活和成模情況25
• 2.3 小鼠肥胖相關(guān)指標(biāo)的比較25-26
• 2.4 高脂飲食對(duì)氣道炎癥的影響26-27
• 2.5 高脂飲食對(duì)肺組織炎癥的影響27
• 3 討論27-28
• 4 小結(jié)28-30
• 第三章 肥胖昆明小鼠肺部感染模型的建立30-36
• 1 材料和方法30-31
• 1.1 試驗(yàn)菌株及菌液配制30
• 1.2 試驗(yàn)動(dòng)物30
• 1.3 主要試劑和儀器30-31
• 1.4 試驗(yàn)動(dòng)物分組與處理31
• 1.5 檢測(cè)指標(biāo)及方法31
• 1.5.1 臨床觀察31
• 1.5.2 肺臟中大腸桿菌計(jì)數(shù)31
• 1.5.3 肺臟病理形態(tài)學(xué)變化31
• 1.6 數(shù)據(jù)分析31
• 2 結(jié)果31-34
• 2.1 小鼠感染大腸桿菌后的臨床癥狀31
• 2.2 小鼠感染大腸桿菌后的死亡情況31-32
• 2.3 感染小鼠肺組織中大腸桿菌計(jì)數(shù)32
• 2.4 滴鼻大腸桿菌小鼠肺組織的病理形態(tài)學(xué)變化32-34
• 3 討論34-35
• 4 小結(jié)35-36
• 第四章 肥胖對(duì)昆明小鼠鼻內(nèi)滴注大腸桿菌感染的影響36-64
• 第一節(jié) 肥胖對(duì)鼻內(nèi)滴注大腸桿菌小鼠血液白細(xì)胞及炎癥細(xì)胞因子的影響36-47
• 1 試驗(yàn)材料與方法36-37
• 1.1 試驗(yàn)菌株及菌液配制36
• 1.2 試驗(yàn)動(dòng)物36
• 1.3 主要試劑和儀器36-37
• 1.4 試驗(yàn)動(dòng)物分組與處理37
• 1.5 檢測(cè)指標(biāo)及方法37
• 1.5.1 血液白細(xì)胞的檢測(cè)37
• 1.5.2 血清細(xì)胞因子的測(cè)定37
• 1.6 數(shù)據(jù)分析37
• 2 結(jié)果37-44
• 2.1 肥胖對(duì)大腸桿菌感染小鼠血液白細(xì)胞數(shù)量的影響37-41
• 2.2 肥胖對(duì)大腸桿菌感染小鼠血清炎癥細(xì)胞因子的影響41-44
• 3 討論44-46
• 3.1 肥胖對(duì)鼻內(nèi)滴注大腸桿菌感染小鼠血液中白細(xì)胞數(shù)量的影響44-45
• 3.2 肥胖對(duì)鼻內(nèi)滴注大腸桿菌感染小鼠血清細(xì)胞因子的影響45-46
• 4 小結(jié)46-47
• 第二節(jié) 肥胖對(duì)鼻內(nèi)滴注大腸桿菌小鼠肺臟細(xì)胞因子及組織形態(tài)學(xué)的影響47-64
• 1 材料和方法47-48
• 1.1 試驗(yàn)菌株及菌液配制47
• 1.2 試驗(yàn)動(dòng)物47
• 1.3 主要試劑和儀器47
• 1.4 試驗(yàn)動(dòng)物分組與處理47
• 1.5 檢測(cè)指標(biāo)及方法47-48
• 1.5.1 BALF中白細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)47
• 1.5.2 肺組織細(xì)胞因子檢測(cè)47-48
• 1.5.3 組織形態(tài)學(xué)檢查48
• 1.6 數(shù)據(jù)分析48
• 2 結(jié)果48-60
• 2.1 肥胖對(duì)大腸桿菌感染小鼠BALF中白細(xì)胞數(shù)量的影響48-51
• 2.2 肥胖對(duì)大腸桿菌感染小鼠肺組織中細(xì)胞因子濃度的影響51-56
• 2.3 肥胖對(duì)大腸桿菌感染小鼠肺臟病理形態(tài)學(xué)的影響56-60
• 3 討論60-63
• 3.1 肥胖對(duì)大腸桿菌感染初期肺臟敏感性的影響60-62
• 3.2 肥胖對(duì)大腸桿菌感染后期損傷肺組織的影響62-63
• 4 小結(jié)63-64
• 結(jié)論64-65
• 參考文獻(xiàn)65-77
• 致謝77-78
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄78

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 姜小麗;楊寶輝;楊婷;王莉佳;符州;劉恩梅;羅征秀;;肺炎鏈球菌感染小鼠早期肺組織細(xì)胞因子變化研究[J];免疫學(xué)雜志;2013年06期

2 申瑞玲;馬婧;;四種肥胖動(dòng)物造模方法的比較[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2007年03期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李曉娟;溫和灸對(duì)小鼠細(xì)菌感染炎癥的影響及其自噬機(jī)制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2014年

2 張莉莉;辣椒素及其受體TRPV1預(yù)防肥胖的機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 鄭晟琳;ZAG質(zhì)粒注射聯(lián)合運(yùn)動(dòng)干預(yù)對(duì)肥胖小鼠脂肪組織ZAG和骨骼肌UCP-3基因表達(dá)的影響[D];上海體育學(xué)院;2014年

2 孫曉飛;棕點(diǎn)石斑魚中草藥免疫增強(qiáng)劑的篩選及其非特異性免疫增強(qiáng)效果研究[D];海南大學(xué);2014年

3 王冬娟;肥胖及飲食控制對(duì)哮喘發(fā)生的影響及機(jī)制探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

4 吳鵬;竹鼠大腸桿菌病的病原特性及其綜合防治研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 葉澤慧;肥胖對(duì)小鼠氣道反應(yīng)性和肺部炎癥的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

6 張弦;槲皮素對(duì)小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞浸潤和炎性的作用及其調(diào)控機(jī)制研究[D];合肥工業(yè)大學(xué);2013年

7 白靜;白藜蘆醇對(duì)高脂誘導(dǎo)肥胖與肥胖抵抗小鼠氧化還原狀態(tài)及肝臟基因表達(dá)的影響[D];江南大學(xué);2012年

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