本文關(guān)鍵詞：microRNA-24通過下調(diào)Cdk4和CyclinD3抑制胰島β細(xì)胞增殖

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【摘要】：目的 :通過共同過表達(dá)Cdk4、CyclinD3與microRNA-24,觀察miR-24所引起的胰島β細(xì)胞增殖抑制是否得到逆轉(zhuǎn),從而判定Cdk4、CyclinD3是否介導(dǎo)了這種抑制作用。方法:在胰島β細(xì)胞系MIN6細(xì)胞中過表達(dá)miR-24,運(yùn)用WST-1法檢測(cè)細(xì)胞活力,借助于流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期,Hoechst33342染色和Brd U標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞增殖凋亡情況。Western blot檢測(cè)Cdk4、CyclinD3蛋白水平。構(gòu)建cyclinD3-p CMV5-myc,cdk4-p CMV5-myc重組質(zhì)粒,與pre-miR-24、pre-Neg miRNA precursors共轉(zhuǎn)染MIN6細(xì)胞,Brd U標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞增殖。結(jié)果:過表達(dá)miR-24引起MIN6細(xì)胞活力降低,細(xì)胞周期G2期阻滯,細(xì)胞增殖受到抑制而并沒有顯著的凋亡;過表達(dá)miR-24降低了Cdk4、CyclinD3蛋白水平;而Cdk4、CyclinD3的過表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-24引起的胰島β細(xì)胞增殖抑制。結(jié)論:miR-24通過降低Cdk4、CyclinD3蛋白水平抑制胰島β細(xì)胞增殖,該作用可被Cdk4、CyclinD3蛋白的過表達(dá)逆轉(zhuǎn)。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省人類功能基因組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;南京綠葉制藥有限公司長(zhǎng)效和靶向制劑國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： microRNA 胰島β細(xì)胞 增殖抑制
【分類號(hào)】：R329.26
【正文快照】： 胰島β細(xì)胞的總量取決于其新生、增殖、凋亡的動(dòng)態(tài)平衡[1],其所分泌的胰島素濃度升高與降低將血糖水平維持在一個(gè)很窄的區(qū)間,當(dāng)β細(xì)胞增殖受損無法維持胰島素總量水平,糖尿病繼而發(fā)生[2]。在成體小鼠中,已存在的β細(xì)胞增殖是新β細(xì)胞的主要來源,是維持β細(xì)胞總量的主要方式[3]

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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4 尤衛(wèi)絕;miR-24在糖尿病胰島β細(xì)胞損傷中的作用和機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：557441