發(fā)布時(shí)間：2017-06-16 01:07

  本文關(guān)鍵詞：活血化瘀通絡(luò)方對(duì)糖尿病腎病大鼠的保護(hù)作用及對(duì)血管緊張素Ⅱ1型受體的影響實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立糖尿�。―M）的動(dòng)物模型，應(yīng)用活血化瘀通絡(luò)方對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行藥物干預(yù)性治療，通過(guò)觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的24小時(shí)尿蛋白定量、血清肌酐（Scr）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、腎臟病理學(xué)變化、免疫組化法檢測(cè)腎組織中血管緊張素II1型受體（AT1R）的表達(dá)、RT-PCR法檢測(cè)腎組織AT1R mRNA的基因水平、Western-blot方法檢測(cè)腎組織中AT1R的蛋白含量，研究活血化瘀通絡(luò)方對(duì)糖尿病腎病的治療作用及可能機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法：選用清潔級(jí)健康雄性Sprague-Dauley大鼠80只，體重90g～120g。普通飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，測(cè)定尿蛋白、尿糖均為陰性者，隨機(jī)選取15只大鼠作正常組，余65只大鼠為造模組，造模組大鼠禁食不禁水12小時(shí)后一次性腹腔注射由0.1M枸櫞酸緩沖液（PH4.5）配制成的鏈脲佐菌素（STZ）55mg／kg，正常組注射等體積的枸櫞酸緩沖液，72小時(shí)后尾靜脈取血測(cè)血糖，連續(xù)三次隨機(jī)血糖值以≥16.7mmol／L為DM模型成功，3只大鼠血糖值未達(dá)標(biāo)予以剔除。造模組在DM模型成模后，隨機(jī)分成5組：模型組、活血方治療組、化瘀通絡(luò)方治療組、活血化瘀通絡(luò)方治療組、厄貝沙坦組。其中模型組大鼠14只，余各組各大鼠12只。成模一周后予以給藥，給藥組按大鼠與人體型系數(shù)折算出各組大鼠每日所需灌胃的劑量：丹參1.2g/kg/d，川芎0.96g/kg/d，地龍0.8g/kg/d，全蝎0.48g/kg/d，水蛭0.48g/kg/d，厄貝沙坦0.024g/kg/d；正常組、模型組大鼠每天給予2ml純凈水灌胃，每日一次連續(xù)給藥共16周。16周末留取各組大鼠24小時(shí)尿液，測(cè)定24小時(shí)尿蛋白定量，大鼠尾靜脈取血測(cè)血糖及糖化血紅蛋白(HbA1c)，大鼠禁食不禁水12小時(shí)，稱量大鼠體重，10%水合氯醛麻醉動(dòng)物，腹主動(dòng)脈取血，摘取右腎剝離被膜后稱重，留取腎臟皮質(zhì)標(biāo)本，觀察腎組織超微結(jié)構(gòu)變化及AT1R的表達(dá)。 結(jié)果： 1實(shí)驗(yàn)大鼠的一般情況 正常組大鼠飲食正常，尿量正常，肌肉豐滿，毛色光澤，反應(yīng)靈敏。其余各組大鼠在注射STZ后逐漸出現(xiàn)多飲，多食、多尿癥狀，實(shí)驗(yàn)最后一周，與正常組相比，造模組及各給藥組大鼠反應(yīng)遲鈍，精神萎靡，體型偏小，模型組大鼠的癥狀比各給藥組大鼠的癥狀嚴(yán)重。給藥期間造模組及各給藥組均有大鼠死亡情況：模型組死亡6只，活血化瘀通絡(luò)方治療組死亡1只，厄貝沙坦組死亡2只，死亡原因可能是由于糖代謝障礙所致血糖過(guò)高最終導(dǎo)致多臟器衰竭。 2各組大鼠體重、右腎重、肥大指數(shù)（右腎重/體重）的比較 與正常組相比，模型組和各治療組的體重明顯減輕（P0.05），模型組與各治療組及各治療組之間體重?zé)o明顯的差異（P0.05）；右腎重各組之間無(wú)顯著性差異（P0.05）；與正常組相比，模型組和各治療組的肥大指數(shù)明顯偏高（P0.05），模型組與各治療組及各治療組之間無(wú)顯著性差異（P0.05）。 3各組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量的比較（24h UTP） 與正常組相比，模型組和各治療組24小時(shí)尿蛋白定量明顯升高（P0.05）；與模型組相比，各給藥組24小時(shí)尿蛋白定量明顯降低（P0.05）；各給藥組之間比較，活血方治療組24小時(shí)尿蛋白定量高于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡(luò)方治療組、活血化瘀通絡(luò)方治療組、厄貝沙坦組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 4各組大鼠糖化血紅蛋白（HbA1c）的比較 與正常組相比，模型組和各治療組的糖化血紅蛋白明顯升高（P0.05）；模型組與各治療組及各治療組之間的糖化血紅蛋白無(wú)顯著性的差異（P0.05）。 5各組大鼠血清肌酐（SCr）的比較 各組大鼠血清肌酐水平無(wú)顯著性差異（P0.05）。 6腎臟病理學(xué)改變 6.1光鏡觀察 正常組大鼠腎臟腎小球結(jié)構(gòu)清晰完整，未見(jiàn)明顯肥大，未見(jiàn)基底膜增厚，未見(jiàn)系膜增生；模型組大鼠腎臟腎小球明顯肥大，腎小囊腔呈裂隙狀，基底膜明顯增厚，系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)彌漫增生、系膜區(qū)增寬；與模型組比較，各治療組大鼠腎小球均輕度肥大，腎小球基底膜均輕度增厚，均可見(jiàn)系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)輕度增生，活血方治療組表現(xiàn)略重于其他治療組。 6.2電鏡觀察 正常組大鼠腎小球基底膜結(jié)構(gòu)完整，足細(xì)胞足突分布均勻，未見(jiàn)融合；模型組大鼠腎小球基底膜顯著性均質(zhì)樣增厚，足細(xì)胞足突廣泛融合；與模型組相比，各治療組大鼠也有類似的病理改變，但程度較輕，活血方治療組表現(xiàn)略重于其他治療組。 7免疫組化觀測(cè)腎組織AT1R的表達(dá) 正常組AT1R在大鼠腎臟的表達(dá)主要位于腎小管內(nèi)，以近端腎小管為主，遠(yuǎn)端腎小管、腎小球、腎血管周圍也可見(jiàn)少量表達(dá)。與正常組相比，模型組及各治療組的表達(dá)明顯增加（P0.05）；與模型組相比，各治療組的表達(dá)明顯降低（P0.05）；活血方治療組的表達(dá)強(qiáng)于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡(luò)方治療組、活血化瘀通絡(luò)方治療組、厄貝沙坦組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 8Western-blot方法檢測(cè)腎組織AT1R蛋白的表達(dá) 與正常組相比，模型組和各治療組蛋白表達(dá)量均增加（P0.05）；與模型組相比，各治療組蛋白表達(dá)量均減少（P0.05）；活血方治療組的蛋白表達(dá)量多于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡(luò)方治療組、活血化瘀通絡(luò)方治療組、厄貝沙坦組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 9RT-PCR方法檢測(cè)腎組織AT1R mRNA表達(dá)水平 與正常組相比，，模型組和各治療組AT1R mRNA表達(dá)均增高（P0.05）；與模型組相比，各治療組AT1R mRNA表達(dá)均降低（P0.05）；活血方治療組AT1R mRNA表達(dá)高于其他治療組（P0.05）；化瘀通絡(luò)方治療組、活血化瘀通絡(luò)方治療組、厄貝沙坦組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 1活血化瘀通絡(luò)方具有對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟的保護(hù)作用。 2活血化瘀通絡(luò)方可以抑制AT1R的表達(dá)，與厄貝沙坦作用相似，提示活血化瘀通絡(luò)中藥對(duì)DN的治療作用可能與阻斷腎臟局部RAS系統(tǒng)途徑有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病腎病 血管緊張素Ⅱ1型受體 厄貝沙坦 動(dòng)物模型 活血化瘀通絡(luò)中藥
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R587.2;R285.5
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• ABSTRACT7-12
• 前言12
• 材料與方法12-22
• 結(jié)果22-25
• 附圖25-34
• 附表34-36
• 討論36-42
• 結(jié)論42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 綜述 RAS 系統(tǒng)與糖尿病腎病45-54
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 致謝54-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：453979