背景脂質(zhì)代謝紊亂導(dǎo)是致諸多慢性代謝性疾病的重要危險(xiǎn)因素。Metrnl是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)全新的分泌蛋白,可從多種不同的組織細(xì)胞中分泌,提示Metrnl可能具有廣泛的生物學(xué)功能。本課題組研究發(fā)現(xiàn)Metrnl是一個(gè)全新的脂肪因子,高脂飲食可以誘導(dǎo)小鼠脂肪組織Metrnl表達(dá),脂肪組織特異性Metrnl過(guò)表達(dá)可以緩解高脂飲食誘導(dǎo)的高甘油三酯血癥和脂肪乳灌胃造成的血液甘油三酯水平急性升高,脂肪組織特異性Metrnl敲除則加重高脂飲食誘導(dǎo)的高甘油三酯血癥,提示Metrnl在脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)中扮演了重要的角色。目的研究Metrnl對(duì)各種血脂成分的調(diào)節(jié)作用,探索Metrnl調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的機(jī)制,尋找脂質(zhì)代謝紊亂治療新靶標(biāo)。方法1.依據(jù)Cre/loxp重組體系的原理,將Ella-Cre小鼠和Metrnl^loxp/loxp小鼠交配構(gòu)建Metrnl全身敲除(Metrnl^-/-)小鼠,將Alb-Cre小鼠和Metrnl^loxp/loxp小鼠交配構(gòu)建Metrnl肝臟特異性敲除(Liver-Metrnl^-/-)小鼠。熒光實(shí)時(shí)定量PCR...

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1Metrnl基因打靶策略

Metrnl在脂質(zhì)代謝中的作用及機(jī)制研究-25-實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、Metrnl基因打靶策略Cre/loxp系統(tǒng)是一種強(qiáng)大的基因編輯工具，借助它所建立起來(lái)的條件性基因敲除技術(shù)被廣泛應(yīng)用于基因功能鑒定和人類疾病動(dòng)物模型構(gòu)建[28]。應(yīng)用Cre/loxp系統(tǒng)對(duì)小鼠體內(nèi)Metrnl基因進(jìn)行敲除....

圖2Metrnl-/-小鼠的培育及鑒定

海軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文-26-DNA的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳結(jié)果如圖2b所示，根據(jù)引物在基因上的位置，擴(kuò)增得到的各基因片段長(zhǎng)度分別為EIIa-Cre100bp，β-Actin324bp，Metrnlloxp243bp，Metrnlwt150bp，Metrnlko289bp，因此....

圖3Metrnl-/-小鼠的驗(yàn)證

Metrnl在脂質(zhì)代謝中的作用及機(jī)制研究-27-圖3Metrnl-/-小鼠的驗(yàn)證。a.Metrnl-/-小鼠和對(duì)照（WT）小鼠肝臟、腸道、皮下白色脂肪（WAT）、棕色脂肪（BAT）組織MetrnlmRNA表達(dá)（n=6）。b.Metrnl-/-小鼠和WT小鼠血清Metrnl水平（n....

圖4Liver-Metrnl-/-小鼠的培育和鑒定

海軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文-28-圖4Liver-Metrnl-/-小鼠的培育和鑒定。a.Liver-Metrnl-/-小鼠的培育流程。b.小鼠鼠尾基因組DNAPCR擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳結(jié)果。Figure4.CultureandidentificationofLiver-Metnl-/....

本文編號(hào)：4020154