發(fā)布時間：2024-06-08 02:58

　　氟是與人體健康密切相關的微量元素之一,適量攝入有益于機體的生長發(fā)育及維持骨骼、牙齒的正常結構和生理機能;一旦被過量攝入,就會通過血液循環(huán)進入全身各處,并在體內蓄積,引起機體急性或慢性氟中毒效應,稱為地方性氟中毒,簡稱地氟病。地氟病致病機制復雜,涉及氧化應激、線粒體改變、內質網應激、信號轉導通路改變等。研究表明,氟暴露致細胞凋亡異�？赡芤彩欠录毎麚p傷的機制之一。細胞凋亡是一種由基因調控的程序性死亡,真核細胞主要通過內部線粒體途徑、內質網途徑和外部死亡受體途徑介導細胞凋亡發(fā)生。我們前期的研究提示,內質網和線粒體途徑參與了氟暴露致細胞凋亡異常,但氟暴露致細胞凋亡的死亡受體途徑鮮見報道,Fas/Fas L信號通路是主要死亡受體通路之一,在細胞凋亡過程中起重要作用。且在許多細胞凋亡進程中,常伴隨Ca2+濃度異常增加,特別是在凋亡早期,細胞內Ca2+濃度異常升高,提示Ca2+可能是啟動細胞凋亡的早期信號之一。而在對氟中毒動物模型和體外細胞毒性試驗中均檢測到細胞內鈣離子超載的現(xiàn)象,并證實其與活性氧水平升高以及細胞凋亡密切相關。前期在體動物神經電生理研究表明,細胞內鈣超載可能是氟暴露后細胞膜上L-型...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號說明
第一章 緒論
    1 氟化物毒性作用的研究現(xiàn)狀
        1.1 氟對骨項器官的毒性作用
        1.2 氟對非骨項器官的毒性作用
    2 氟誘導細胞凋亡機制的研究進展
        2.1 線粒體介導氟誘導細胞凋亡的途徑
        2.2 內質網應激介導氟誘導細胞凋亡的途徑
        2.3 死亡受體介導的氟誘導細胞凋亡途徑
    3 抗氟藥物研究現(xiàn)狀
    4 鈣與氟中毒
        4.1 鈣的生理特性
        4.2 氟中毒對機體Ca²⁺代謝的影響
        4.3 L-型鈣通道與氟中毒的研究進展
    5 鈣與Fas/FasL信號通路
    6 研究意義
第二章 Fas/FasL凋亡途徑在氟致PC12細胞損傷中的作用
    1 引言
    2 材料與設備
        2.1 實驗細胞株
        2.2 實驗試劑與儀器
    3 實驗方法
        3.1 PC12細胞的培養(yǎng)及分組
        3.2 CCK-8檢測細胞活力
        3.3 DCFH-DA檢測細胞內活性氧
        3.4 Annexin V-FITC檢測細胞凋亡
        3.5 RT-PCR檢測m RNA表達
        3.6 Western Blot檢測蛋白表達
        3.7 統(tǒng)計學分析
    4 實驗結果
        4.1 氟暴露對PC12細胞活性的影響
        4.2 氟暴露對PC12細胞活性氧水平的影響
        4.3 氟暴露對PC12細胞凋亡率的影響
        4.4 氟暴露對PC12細胞內Fas/FasL信號轉導通路分子基因表達水平的影響
        4.5 氟暴露對PC12細胞內Fas/FasL信號轉導通路分子蛋白表達水平的影響
    5 討論
第三章 L-型鈣通道拮抗劑對氟誘導的PC12細胞凋亡的影響
    1 引言
    2 材料與設備
        2.1 實驗細胞株
        2.2 實驗試劑與儀器
    3 實驗方法
        3.1 PC12細胞的培養(yǎng)及分組
        3.2 DCFH-DA檢測細胞內活性氧
        3.3 Fluo-4檢測細胞內鈣離子水平
        3.4 Annexin V-FITC檢測細胞凋亡
        3.5 RT-PCR檢測mRNA表達
        3.6 Western Blot檢測蛋白表達
        3.7 細胞周期檢測
        3.8 統(tǒng)計學分析
    4 實驗結果
        4.1 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對PC12細胞內活性氧水平的影響
        4.2 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露后對PC12細胞內鈣離子的影響
        4.3 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對PC12細胞凋亡率的影響
        4.4 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對PC12細胞Cav1.2及Fas/FasL信號通路相關基因/蛋白表達的影響
        4.5 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對PC12細胞周期的影響
    5 討論
全文結論
參考文獻
致謝
攻讀學位期間取得的研究成果



本文編號：3991349