氟是與人體健康密切相關(guān)的微量元素之一,適量攝入有益于機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育及維持骨骼、牙齒的正常結(jié)構(gòu)和生理機(jī)能;一旦被過量攝入,就會(huì)通過血液循環(huán)進(jìn)入全身各處,并在體內(nèi)蓄積,引起機(jī)體急性或慢性氟中毒效應(yīng),稱為地方性氟中毒,簡(jiǎn)稱地氟病。地氟病致病機(jī)制復(fù)雜,涉及氧化應(yīng)激、線粒體改變、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路改變等。研究表明,氟暴露致細(xì)胞凋亡異�？赡芤彩欠录�(xì)胞損傷的機(jī)制之一。細(xì)胞凋亡是一種由基因調(diào)控的程序性死亡,真核細(xì)胞主要通過內(nèi)部線粒體途徑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑和外部死亡受體途徑介導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)生。我們前期的研究提示,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體途徑參與了氟暴露致細(xì)胞凋亡異常,但氟暴露致細(xì)胞凋亡的死亡受體途徑鮮見報(bào)道,Fas/Fas L信號(hào)通路是主要死亡受體通路之一,在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用。且在許多細(xì)胞凋亡進(jìn)程中,常伴隨Ca2+濃度異常增加,特別是在凋亡早期,細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度異常升高,提示Ca2+可能是啟動(dòng)細(xì)胞凋亡的早期信號(hào)之一。而在對(duì)氟中毒動(dòng)物模型和體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)中均檢測(cè)到細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載的現(xiàn)象,并證實(shí)其與活性氧水平升高以及細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。前期在體動(dòng)物神經(jīng)電生理研究表明,細(xì)胞內(nèi)鈣超載可能是氟暴露后細(xì)胞膜上L-型...

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說明
第一章 緒論
    1 氟化物毒性作用的研究現(xiàn)狀
        1.1 氟對(duì)骨項(xiàng)器官的毒性作用
        1.2 氟對(duì)非骨項(xiàng)器官的毒性作用
    2 氟誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究進(jìn)展
        2.1 線粒體介導(dǎo)氟誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的途徑
        2.2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)氟誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的途徑
        2.3 死亡受體介導(dǎo)的氟誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡途徑
    3 抗氟藥物研究現(xiàn)狀
    4 鈣與氟中毒
        4.1 鈣的生理特性
        4.2 氟中毒對(duì)機(jī)體Ca²⁺代謝的影響
        4.3 L-型鈣通道與氟中毒的研究進(jìn)展
    5 鈣與Fas/FasL信號(hào)通路
    6 研究意義
第二章 Fas/FasL凋亡途徑在氟致PC12細(xì)胞損傷中的作用
    1 引言
    2 材料與設(shè)備
        2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)及分組
        3.2 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力
        3.3 DCFH-DA檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧
        3.4 Annexin V-FITC檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        3.5 RT-PCR檢測(cè)m RNA表達(dá)
        3.6 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)
        3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 氟暴露對(duì)PC12細(xì)胞活性的影響
        4.2 氟暴露對(duì)PC12細(xì)胞活性氧水平的影響
        4.3 氟暴露對(duì)PC12細(xì)胞凋亡率的影響
        4.4 氟暴露對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)Fas/FasL信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分子基因表達(dá)水平的影響
        4.5 氟暴露對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)Fas/FasL信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分子蛋白表達(dá)水平的影響
    5 討論
第三章 L-型鈣通道拮抗劑對(duì)氟誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的影響
    1 引言
    2 材料與設(shè)備
        2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)及分組
        3.2 DCFH-DA檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧
        3.3 Fluo-4檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平
        3.4 Annexin V-FITC檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        3.5 RT-PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)
        3.6 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)
        3.7 細(xì)胞周期檢測(cè)
        3.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的影響
        4.2 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露后對(duì)PC12細(xì)胞內(nèi)鈣離子的影響
        4.3 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對(duì)PC12細(xì)胞凋亡率的影響
        4.4 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對(duì)PC12細(xì)胞Cav1.2及Fas/FasL信號(hào)通路相關(guān)基因/蛋白表達(dá)的影響
        4.5 氟與Nifedipine聯(lián)合暴露對(duì)PC12細(xì)胞周期的影響
    5 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果



本文編號(hào)：3991349