目的:馬凡綜合征心血管病變是導(dǎo)致患者死亡的主要原因,而存在于主動脈血管壁外膜的血管祖細(xì)胞在血管損傷后的修復(fù)中發(fā)揮著重要作用,因此本研究旨在探討TGF-β介導(dǎo)的馬凡綜合征血管祖細(xì)胞早衰機(jī)制,揭示馬凡綜合征患者血管穩(wěn)態(tài)降低的原因,為臨床早期干預(yù)馬凡綜合征主動脈病變提供新的靶點(diǎn)和理論依據(jù)。方法:分別選取器官捐獻(xiàn)供體以及行主動脈手術(shù)的馬凡綜合征患者主動脈組織,原代培養(yǎng)及免疫磁珠法篩選出c-kit⁺血管祖細(xì)胞。運(yùn)用Ki67增殖實(shí)驗(yàn)、Transwell遷移實(shí)驗(yàn)、SA-β-gal染色檢測兩組血管祖細(xì)胞的增殖、遷移能力以及衰老程度。并運(yùn)用RNA測序方法比較兩組細(xì)胞差異表達(dá)的基因,進(jìn)行功能富集分析。對正常供體血管祖細(xì)胞予以TGF-β1(50ng/ml)干預(yù)48h,馬凡綜合征血管祖細(xì)胞予以TGF-β1-siRNA沉默TGF-β的表達(dá),檢測兩種細(xì)胞的衰老情況,探討TGF-β在血管壁干細(xì)胞衰老中的作用。在正常細(xì)胞培養(yǎng)基中分別加入TGF-β1和TGFβ1+Mito-Tempo,馬凡細(xì)胞中加入Mito-Tempo(10uM)干預(yù)48h,探討Mito-SOX在細(xì)胞衰老中的作用。在正常血管祖細(xì)胞...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1人血管祖細(xì)胞的分離與培養(yǎng)示意圖

的培養(yǎng)箱中，每隔3天更換培養(yǎng)基。血管祖細(xì)胞分離培養(yǎng)流程如圖2-1。圖2-1人血管祖細(xì)胞的分離與培養(yǎng)示意圖Figure2-1TheschematicdiagramofhumanVPCsisolationandculture.2.3.4主動脈組織切片c....

圖2-2主動脈組織H&E和Masson染色Figure2-2TheH&EandMassonstainingoftheaortic注：H&E染色中紅色為細(xì)胞質(zhì)，藍(lán)色為細(xì)胞核；Masson染色中紅色為肌纖維、胞漿，藍(lán)綠色為膠

BMI:身高體重指數(shù)；BSA:體表面積；Control：器官捐獻(xiàn)供體組；MFS:馬凡綜合征組。2.4.2馬凡綜合征患者主動脈中膜囊性變、結(jié)構(gòu)破壞圖2-2主動脈組織H&E和Masson染色Figure2-2TheH&EandMassonstainingo....

圖2-3主動脈組織外膜c-kit免疫熒光染色Figure2-3Theimmunofluorescencestainingofc-kitintheadventitiaoftheaortic注：A圖中紅色代表c-kit蛋白，藍(lán)色代表細(xì)胞核，Adv代表血管壁外膜，Control代表供體，MFS

的血管祖細(xì)胞存在（圖2-3A），而且與正常供體組相比，馬凡綜合征的VPCs數(shù)量減少（圖2-3B）。圖2-3主動脈組織外膜c-kit免疫熒光染色Figure2-3Theimmunofluorescencestainingofc-kitintheadven....

圖2-4表面標(biāo)志物的流式細(xì)胞術(shù)鑒定Figure2-4Surfacemarkerprofilingdeterminedbyfluorescenc-eactivatedcellsorting(FACS)

也表達(dá)血管祖細(xì)胞標(biāo)志物c-kit，而不表達(dá)白細(xì)胞（CD34）和內(nèi)皮細(xì)胞（CD31）標(biāo)志物（圖2-4）。圖2-4表面標(biāo)志物的流式細(xì)胞術(shù)鑒定Figure2-4Surfacemarkerprofilingdeterminedbyfluorescenc-eactiva....

本文編號：3985865