目的:探究不可溶性及可溶性的酵母β-葡聚糖對THP-1/3T3-L1細(xì)胞體系胰島素敏感性的改善作用及其相關(guān)機制。方法:利用誘導(dǎo)分化的THP-1巨噬細(xì)胞和3T3-L1脂肪細(xì)胞,構(gòu)建THP-1/3T3-L1細(xì)胞體系模擬脂肪組織炎癥狀態(tài);利用CCK-8試驗檢測細(xì)胞活性,選取合適的干預(yù)劑量和干預(yù)時間;采用干預(yù)劑量為0、10、20、50、100μg/mL的濃度梯度,干預(yù)時間為48 h,利用不可溶性酵母β-葡聚糖和可溶性酵母β-葡聚糖干預(yù)誘導(dǎo)分化完全的THP-1巨噬細(xì)胞,并提取干預(yù)后的細(xì)胞上清液,在3T3-L1脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化的全過程加入該上清液進(jìn)行干預(yù)誘導(dǎo);利用電化學(xué)發(fā)光法和ELISA試劑盒檢測干預(yù)后巨噬細(xì)胞上清液中的炎癥因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β水平;利用甘油三酯試劑盒檢測3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)的甘油三酯水平;利用熒光標(biāo)記葡萄糖類似物2-NBDG進(jìn)行胰島素刺激的葡萄糖攝取實驗;采用Western Blot實驗檢測IRS-1、p-IRs-1、AKT、p-AKT、adiponectin等蛋白質(zhì)水平。結(jié)果:(1)與對照組相比,不可溶性酵母β-葡聚糖干預(yù)后的THP-1...

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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摘要
ABSTRACT
前言
1 材料和方法
    1.1 試劑及儀器
    1.2 溶液配制
    1.3 研究方法
        1.3.1 THP-1/3T3-L1細(xì)胞體系的構(gòu)建
        1.3.2 細(xì)胞活性檢測
        1.3.3 酵母β-葡聚糖細(xì)胞干預(yù)
        1.3.4 ELISA及電化學(xué)發(fā)光法檢測細(xì)胞因子
        1.3.5 葡萄糖攝取實驗
        1.3.6 甘油三酯測定
        1.3.7 WesternBlot實驗
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞活性檢測
    2.2 酵母β-葡聚糖對THP-Ma細(xì)胞因子分泌的影響
        2.2.1 不可溶性β-葡聚糖對THP-Ma細(xì)胞因子分泌的影響
        2.2.2 可溶性β-葡聚糖對THP-Ma細(xì)胞因子分泌的影響
    2.3 THP-Ma細(xì)胞上清對3T3-L1細(xì)胞分化及胰島素敏感性的影響
    2.4 酵母β-葡聚糖對3T3-L1脂質(zhì)生成及胰島素敏感性的影響
        2.4.1 不可溶性酵母β-葡聚糖對3T3-L1脂質(zhì)生成及胰島素敏感性的影響
        2.4.2 可溶性酵母β-葡聚糖對3T3-L1脂質(zhì)生成及胰島素敏感性的影響
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3966793