目的:自身免疫性甲狀腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)作為臨床甲減的主要病因,是一種常見的器官特異性自身免疫病。其明確病因雖未完全清楚解釋,但目前認為是遺傳、環(huán)境等多因素共同作用所致的免疫穩(wěn)態(tài)失衡。由胞漿內(nèi)模式識別受體及其組分組裝而成的高分子蛋白復合體被稱為炎癥小體,有相關(guān)研究報道炎癥小體參與激活T細胞等過程,NLRP3是目前研究最多的炎癥小體,NLRP3炎癥小體在AIT的發(fā)病中起作用已被本課題組證實。那么,碘是AIT發(fā)病的重要環(huán)境因素之一,AIT經(jīng)典動物模型NOD.H-2h4小鼠也證實碘是誘發(fā)和加重AIT的必要條件,但碘過量是否影響NLRP3炎癥小體分泌尚未見報道。本文旨在AIT患者外周血培養(yǎng)的PBMC原代細胞中探討碘對NLRP3炎癥小體的作用以及對輔助性T細胞分化的影響,以及觀察與炎癥小體激活有關(guān)的唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素-1(Si glec-1)在自身免疫甲狀腺炎患者外周血單個核細胞(PBMC)的表達水平,分析其與AIT炎癥反應指標的相關(guān)性;并進一步在培養(yǎng)的PBMC原代細胞中探討siglec1激活對調(diào)節(jié)輔助性T細胞分化、促進炎癥反應的作用。方法:本研...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:NLRP3炎癥小體在自身免疫性甲狀腺炎免疫細胞中的表達及其機制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器及耗材
        2.2 研究對象及標本采集
        2.3 方法
            2.3.1 密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
            2.3.2 PBMC細胞培養(yǎng)
            2.3.3 RNA提取及Real-time PCR
            2.3.4 蛋白提取及Western-Blot
            2.3.5 免疫印記(Western-Blot)
            2.3.6 流式細胞術(shù)
        2.4 統(tǒng)計學處理
    3 結(jié)果
        3.1 患者一般資料統(tǒng)計
        3.2 碘化鈉對AIT組及NC組 PBMC上 NLRP3 炎癥小體及其組分mRNA相對表達的影響
        3.3 碘化鈉對AIT組及NC組 PBMC上 NLRP3 炎癥小體及其組分蛋白表達水平的影響
        3.4 LPS刺激下碘對AIT患者單核細胞NLRP3 表達及Th1、Th17 分化比例的影響
    4 討論
第二部分:與炎癥小體激活可能相關(guān)的Siglec-1在AIT患者外周血單個核細胞高表達并與炎癥反應指標相關(guān)
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 方法
            2.2.1 分離外周血PBMCs和提取細胞總RNA
            2.2.2 PBMC細胞培養(yǎng)
            2.2.3 sSiglec-1 檢測
            2.2.4 RT-PCR檢測Siglec-1mRNA
            2.2.5 蛋白提取及Western-Blot
            2.2.6 流式細胞術(shù)
            2.2.7 統(tǒng)計學處理
    3 結(jié)果
        3.1 AIT組及正常對照組血清sSiglec-1 水平
        3.2 Siglec-1在AIT患者PBMC中表達水平升高
        3.3 Siglec-1在AIT患者單核細胞中表達水平升高
        3.4 PBMC中各T細胞亞群的比例
        3.5 PBMC中 Siglec-1 m RNA及 Th1 細胞比例(%)、Th17 細胞比例(%)表達水平與血清TPOAb/TgAb的相關(guān)性分析
        3.6 碘化鈉對AIT組及正常對照組單核細胞中Siglec-1 表達水平、PBMC中Th1細胞比例(%)、Th17 細胞比例(%)的影響
    4 討論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3960277