目的:自身免疫性甲狀腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)作為臨床甲減的主要病因,是一種常見(jiàn)的器官特異性自身免疫病。其明確病因雖未完全清楚解釋,但目前認(rèn)為是遺傳、環(huán)境等多因素共同作用所致的免疫穩(wěn)態(tài)失衡。由胞漿內(nèi)模式識(shí)別受體及其組分組裝而成的高分子蛋白復(fù)合體被稱為炎癥小體,有相關(guān)研究報(bào)道炎癥小體參與激活T細(xì)胞等過(guò)程,NLRP3是目前研究最多的炎癥小體,NLRP3炎癥小體在AIT的發(fā)病中起作用已被本課題組證實(shí)。那么,碘是AIT發(fā)病的重要環(huán)境因素之一,AIT經(jīng)典動(dòng)物模型NOD.H-2h4小鼠也證實(shí)碘是誘發(fā)和加重AIT的必要條件,但碘過(guò)量是否影響NLRP3炎癥小體分泌尚未見(jiàn)報(bào)道。本文旨在AIT患者外周血培養(yǎng)的PBMC原代細(xì)胞中探討碘對(duì)NLRP3炎癥小體的作用以及對(duì)輔助性T細(xì)胞分化的影響,以及觀察與炎癥小體激活有關(guān)的唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素-1(Si glec-1)在自身免疫甲狀腺炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的表達(dá)水平,分析其與AIT炎癥反應(yīng)指標(biāo)的相關(guān)性;并進(jìn)一步在培養(yǎng)的PBMC原代細(xì)胞中探討siglec1激活對(duì)調(diào)節(jié)輔助性T細(xì)胞分化、促進(jìn)炎癥反應(yīng)的作用。方法:本研...

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分:NLRP3炎癥小體在自身免疫性甲狀腺炎免疫細(xì)胞中的表達(dá)及其機(jī)制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器及耗材
        2.2 研究對(duì)象及標(biāo)本采集
        2.3 方法
            2.3.1 密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞
            2.3.2 PBMC細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3.3 RNA提取及Real-time PCR
            2.3.4 蛋白提取及Western-Blot
            2.3.5 免疫印記(Western-Blot)
            2.3.6 流式細(xì)胞術(shù)
        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 患者一般資料統(tǒng)計(jì)
        3.2 碘化鈉對(duì)AIT組及NC組 PBMC上 NLRP3 炎癥小體及其組分mRNA相對(duì)表達(dá)的影響
        3.3 碘化鈉對(duì)AIT組及NC組 PBMC上 NLRP3 炎癥小體及其組分蛋白表達(dá)水平的影響
        3.4 LPS刺激下碘對(duì)AIT患者單核細(xì)胞NLRP3 表達(dá)及Th1、Th17 分化比例的影響
    4 討論
第二部分:與炎癥小體激活可能相關(guān)的Siglec-1在AIT患者外周血單個(gè)核細(xì)胞高表達(dá)并與炎癥反應(yīng)指標(biāo)相關(guān)
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 方法
            2.2.1 分離外周血PBMCs和提取細(xì)胞總RNA
            2.2.2 PBMC細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.3 sSiglec-1 檢測(cè)
            2.2.4 RT-PCR檢測(cè)Siglec-1mRNA
            2.2.5 蛋白提取及Western-Blot
            2.2.6 流式細(xì)胞術(shù)
            2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 AIT組及正常對(duì)照組血清sSiglec-1 水平
        3.2 Siglec-1在AIT患者PBMC中表達(dá)水平升高
        3.3 Siglec-1在AIT患者單核細(xì)胞中表達(dá)水平升高
        3.4 PBMC中各T細(xì)胞亞群的比例
        3.5 PBMC中 Siglec-1 m RNA及 Th1 細(xì)胞比例(%)、Th17 細(xì)胞比例(%)表達(dá)水平與血清TPOAb/TgAb的相關(guān)性分析
        3.6 碘化鈉對(duì)AIT組及正常對(duì)照組單核細(xì)胞中Siglec-1 表達(dá)水平、PBMC中Th1細(xì)胞比例(%)、Th17 細(xì)胞比例(%)的影響
    4 討論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3960277