發(fā)布時(shí)間：2024-04-11 04:52

　　隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)社會(huì)的發(fā)展,以糖尿病和惡性腫瘤為代表的慢性、非傳染性疾病已嚴(yán)重威脅著人們的健康。2型糖尿病(T2DM)是復(fù)雜的多基因遺傳病,流行病學(xué)調(diào)查顯示,T2DM可增加某些癌癥的的患病率,最常見(jiàn)的是消化系統(tǒng)腫瘤,其中結(jié)腸癌位居首位。既往主要通過(guò)全基因組關(guān)聯(lián)研究(GWAS)確定與T2DM風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的基因,這其中就包括ADP-核糖基化樣因子(ARL15)基因。ARL15屬于ADP-核糖化因子(ARF)家族中的成員,ARF家族的功能是參與囊泡運(yùn)輸和肌動(dòng)蛋白的重組,ARL與ARF成員之間有40%～60%的序列同源性。ARL15既調(diào)節(jié)膜轉(zhuǎn)運(yùn)、脂質(zhì)組成和胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,又參與炎癥反應(yīng),而T2DM與腫瘤的相互作用機(jī)制包括高胰島素、高胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)、高血糖、肥胖以及慢性炎癥等。因此ARL15很可能參與T2DM的發(fā)病以及結(jié)腸癌的發(fā)生。本研究利用群體遺傳學(xué)方法探討ARL15基因多態(tài)性及ARL15水平與脂聯(lián)素、胰島素、生理生化指標(biāo)的相關(guān)性以及T2DM發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),但是多基因遺傳病具有微效基因累加效應(yīng)特征,因此將另一個(gè)T2DM易感基因過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α基因(PGC-1α...

【文章頁(yè)數(shù)】：117 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?１．５％瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)ＰＧＣ－ｋ基因ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)果??

ｍ時(shí)０Ｄ值為１，其ＤＮＡ濃度為６０？３００ＮＡ樣品純度ＯＤ２６Ｑ／ＯＤ２８（＾１．８，所提取的要。??膠電泳檢測(cè)ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物，２．０＾Ｌ產(chǎn)物上樣，ｒ?大小的順序?yàn)?２０００ｂｐ，ｌＯＯＯｂｐ，７５０ｂｐ，５００目的ＤＮＡ片斷長(zhǎng)度在１泳道為ＰＧＣ－ｌａ基，?２泳道為含基因ｒｓ２５....

圖2-2ARL15基因rs255758(A/C)位點(diǎn)測(cè)序圖

ｉ力太學(xué)博士學(xué)位論立第二本次實(shí)驗(yàn)共對(duì)３４２例樣本進(jìn)行不同位點(diǎn)測(cè)序，測(cè)得ｒｓ２５５７５８位點(diǎn)含有三個(gè)型，即野生純合子ＡＡ、雜合子ＡＣ及突變純合子ＣＣ?（見(jiàn)圖２－２）?；?ｒｓ７６５６２點(diǎn)的野生純合子ＣＣ、雜合子ＣＴ及突變純合子ＴＴ?（見(jiàn)圖２－３）。??

圖３－１構(gòu)建真核表達(dá)載體ｐＣＭＶ－３Ｔａｇ－２－ＡＲＬ１５的流程圖??

士學(xué)位論文錐形瓶中的培養(yǎng)液分裝至５０?ｍｌ離心管中，冰上放置ｌＯｍｉｎ，然ｉｎ離心５ｍｉｎ，棄去上清液；??個(gè)５０ｍｌ離心管中加入２０ｍｌ?ＴＦＢＩ，輕輕懸浮細(xì)胞，冰上放置ｌＯｍｉｎ離心５ｍｉｎ，棄去上清液。??個(gè)５０ｍｌ離心管中加入２ｍｌＴＦＢＩＩ，輕輕懸浮細(xì)胞，分裝至事先－８....

圖３－２構(gòu)建真核表達(dá)載體ｐＣＭＶ－３Ｔａｇ－２－ＡＲＬ１５的流程圖??

圖３－２構(gòu)建真核表達(dá)載體ｐＣＭＶ－３Ｔａｇ－２－ＡＲＬ１５的流程圖??．３引物設(shè)計(jì)和合成??根據(jù)己報(bào)到的?的基因序列（ＧｅｎｅＢａｎｋ?Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ?Ｎｕｍｂｅｒ：ＮＭ＿０１據(jù)ＰＣＲ引物設(shè)計(jì)原則，利用在線引物設(shè)計(jì)ｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｔｏｏｌ....

本文編號(hào)：3950901