隨著我國經(jīng)濟社會的發(fā)展,以糖尿病和惡性腫瘤為代表的慢性、非傳染性疾病已嚴重威脅著人們的健康。2型糖尿病(T2DM)是復雜的多基因遺傳病,流行病學調(diào)查顯示,T2DM可增加某些癌癥的的患病率,最常見的是消化系統(tǒng)腫瘤,其中結(jié)腸癌位居首位。既往主要通過全基因組關(guān)聯(lián)研究(GWAS)確定與T2DM風險相關(guān)的基因,這其中就包括ADP-核糖基化樣因子(ARL15)基因。ARL15屬于ADP-核糖化因子(ARF)家族中的成員,ARF家族的功能是參與囊泡運輸和肌動蛋白的重組,ARL與ARF成員之間有40%～60%的序列同源性。ARL15既調(diào)節(jié)膜轉(zhuǎn)運、脂質(zhì)組成和胰島素信號轉(zhuǎn)導途徑,又參與炎癥反應,而T2DM與腫瘤的相互作用機制包括高胰島素、高胰島素樣生長因子1(IGF-1)、高血糖、肥胖以及慢性炎癥等。因此ARL15很可能參與T2DM的發(fā)病以及結(jié)腸癌的發(fā)生。本研究利用群體遺傳學方法探討ARL15基因多態(tài)性及ARL15水平與脂聯(lián)素、胰島素、生理生化指標的相關(guān)性以及T2DM發(fā)病風險,但是多基因遺傳病具有微效基因累加效應特征,因此將另一個T2DM易感基因過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α基因(PGC-1α...

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?１．５％瓊脂糖凝膠電泳檢測ＰＧＣ－ｋ基因ＰＣＲ擴增產(chǎn)物結(jié)果??

ｍ時０Ｄ值為１，其ＤＮＡ濃度為６０？３００ＮＡ樣品純度ＯＤ２６Ｑ／ＯＤ２８（＾１．８，所提取的要。??膠電泳檢測ＰＣＲ擴增產(chǎn)物，２．０＾Ｌ產(chǎn)物上樣，ｒ?大小的順序為?２０００ｂｐ，ｌＯＯＯｂｐ，７５０ｂｐ，５００目的ＤＮＡ片斷長度在１泳道為ＰＧＣ－ｌａ基，?２泳道為含基因ｒｓ２５....

圖2-2ARL15基因rs255758(A/C)位點測序圖

ｉ力太學博士學位論立第二本次實驗共對３４２例樣本進行不同位點測序，測得ｒｓ２５５７５８位點含有三個型，即野生純合子ＡＡ、雜合子ＡＣ及突變純合子ＣＣ?（見圖２－２）?；?ｒｓ７６５６２點的野生純合子ＣＣ、雜合子ＣＴ及突變純合子ＴＴ?（見圖２－３）。??

圖３－１構(gòu)建真核表達載體ｐＣＭＶ－３Ｔａｇ－２－ＡＲＬ１５的流程圖??

士學位論文錐形瓶中的培養(yǎng)液分裝至５０?ｍｌ離心管中，冰上放置ｌＯｍｉｎ，然ｉｎ離心５ｍｉｎ，棄去上清液；??個５０ｍｌ離心管中加入２０ｍｌ?ＴＦＢＩ，輕輕懸浮細胞，冰上放置ｌＯｍｉｎ離心５ｍｉｎ，棄去上清液。??個５０ｍｌ離心管中加入２ｍｌＴＦＢＩＩ，輕輕懸浮細胞，分裝至事先－８....

圖３－２構(gòu)建真核表達載體ｐＣＭＶ－３Ｔａｇ－２－ＡＲＬ１５的流程圖??

圖３－２構(gòu)建真核表達載體ｐＣＭＶ－３Ｔａｇ－２－ＡＲＬ１５的流程圖??．３引物設計和合成??根據(jù)己報到的?的基因序列（ＧｅｎｅＢａｎｋ?Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ?Ｎｕｍｂｅｒ：ＮＭ＿０１據(jù)ＰＣＲ引物設計原則，利用在線引物設計ｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｔｏｏｌ....

本文編號：3950901