目的:1、探討Irisin對PA誘導(dǎo)的INS-1細(xì)胞自噬水平的影響;2、探討Irisin是否通過影響PA誘導(dǎo)的INS-1細(xì)胞的自噬水平,從而影響INS-1細(xì)胞的分泌功能和凋亡水平。方法:培養(yǎng)INS-1細(xì)胞,將細(xì)胞分組為正常組、PA組、PA+100 ng/ml Irisin組(PA+I1組)、PA+500 ng/ml Irisin組(PA+I2組)、PA+1000 ng/ml Irisin組(PA+I3組)、PA+1500ng/ml Irisin組(PA+I4組)六組,通過用不同濃度的Irisin干預(yù)INS-1細(xì)胞,用Western blot觀察自噬相關(guān)蛋白p-mTOR/mTOR、p62、LC3 II/I的水平,證明Irisin可以影響PA干預(yù)的INS-1細(xì)胞的自噬水平,并篩選出最佳的Irisin干預(yù)濃度。為了觀察Irisin是否可通過自噬從而影響PA干預(yù)的INS-1細(xì)胞的胰島素分泌功能和凋亡水平,將INS-1細(xì)胞分為正常組、PA組、PA+1500ng/ml Irisin組、PA+1500ng/ml Irisin+rapamycin組、PA+1500ng/ml Irisin+3-MA組。...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1不同濃度Irisin對自噬相關(guān)蛋白水平的影響（x±s，n=3）

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文15圖2-1不同濃度Irisin對自噬相關(guān)蛋白水平的影響（x_±s，n=3）a.與NC組比較，P＜0.05；b.與PA組比較，P＜0.05；c.與PA+I1組比較，P＜0.05；d.與PA+I2組比較，P＜0.05；e.與PA+I3組比較，P＜0.05。2....

圖2-2葡萄糖刺激的胰島素分泌實(shí)驗(yàn)（x±s，n=3）

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16P=0.000]，Irisin干預(yù)組較PA組升高[3.3mmol/L：(0.138±0.012)ng/mLvs.(0.322±0.041)ng/mL，P=0.001；16.7mmol/L：(0.245±0.043)ng/mLvs.(0.414±0.03....

圖2-3Westernblot檢測自噬相關(guān)蛋白水平（x±s，n=3）

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文17的水平均增加[(0.350±0.026)vs.(0.466±0.016)，P=0.000；(0.466±0.016)vs.(0.521±0.022)，P=0.022]，而加入3-MA后，LC3II/I的水平較Irisin干預(yù)組明顯降低(0.466±0.....

圖2-4mRFP-GFP-LC3腺病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)檢測自噬流水平（x±s，n=3）

2.4Irisin對PA干預(yù)后的INS-1細(xì)胞自噬流水平的影響在本研究中，我們對INS-1細(xì)胞進(jìn)行了mRFP-GFP-LC3腺病毒轉(zhuǎn)染，PA干預(yù)組的自噬體較正常組明顯增加[(2.33±1.53)vs.(10.33±1.53)，P=0.000]，而自噬溶....

本文編號：3931664