【背景與目的】在與肥胖相關(guān)的多種慢性代謝性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中,脂肪細胞肥大、氧氣彌散障礙,是造成脂肪組織缺氧和脂肪細胞壞死的首要原因。研究發(fā)現(xiàn),促進脂肪組織血管新生,能夠減輕脂肪組織缺氧,改善肥胖及其相關(guān)的糖脂代謝紊亂。本實驗旨在研究全反式維甲酸是否可上調(diào)脂肪細胞血管內(nèi)皮生長因子的分泌,促進內(nèi)皮細胞小管形成,并初步探討其作用機制。【方法】(1)以3T3-L1前脂肪細胞為研究對象,以不同濃度的全反式維甲酸(all-trans Retionic Acid,atRA)與脂肪細胞誘導(dǎo)分化液同處理3T3-L1前脂肪細胞,通過油紅O實驗及細胞內(nèi)脂肪酸水平反映脂肪細胞分化成熟的情況;(2)收集上述各組脂肪細胞的培養(yǎng)基上清液(conditioned medium of adipose cells,ACs-CM),采用Transwell實驗和內(nèi)皮細胞成管實驗檢測上清液對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)遷移和管形成的誘導(dǎo)情況;(3)采用蛋白質(zhì)免疫印跡(western blot,WB)和實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitati...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略詞索引
第1章 緒論
第2章 實驗材料
    2.1 細胞及主要試劑
    2.2 主要實驗儀器
    2.3 主要試劑配制
第3章 實驗方法
    3.1 3T3-L1小鼠前脂肪細胞的培養(yǎng)
        3.1.1 細胞復(fù)蘇
        3.1.2 細胞傳代
        3.1.3 細胞凍存
    3.2 3T3-L1小鼠前脂肪細胞誘導(dǎo)分化
    3.3 油紅O染色實驗
    3.4 3T3-L1小鼠前脂肪細胞內(nèi)TG水平測定
    3.5 人臍靜脈內(nèi)皮細胞血管形成實驗
    3.6 人臍靜脈內(nèi)皮細胞遷移實驗
    3.7 atRA對3T3-L1 細胞PI3K/AKT/mTOR/VEGF基因m RNA表達的影響
    3.8 atRA對3T3-L1 細胞PI3K/AKT/mTOR/VEGF基因和蛋白表達的影響
    3.9 數(shù)據(jù)處理與分析
第4章 實驗結(jié)果
    4.1 atRA抑制3T3-L1 前脂肪細胞分化成熟
    4.2 atRA處理組脂肪細胞上清液誘導(dǎo)HUVECs血管形成
    4.3 atRA處理組脂肪細胞上清液誘導(dǎo)HUVECs遷移
    4.4 atRA促進3T3-L1 前脂肪細胞VEGF表達
    4.5 at RA通過PI3K/AKT/mTOR信號通路促進3T3-L1 前脂肪細胞VEGF表達
        4.5.1 atRA激活PI3K/AKT/mTOR信號通路
        4.5.2 at RA促進3T3-L1 前脂肪細胞VEGF表達依賴PI3K/AKT/-m TOR信號通路
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
碩士期間發(fā)表論文
資助項目
致謝



本文編號：3925796