目的:探索細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(Erk1/2)失活對(duì)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)調(diào)節(jié)機(jī)體血糖平穩(wěn)及改善異常血脂的影響。方法:選取8¹0周齡雄性db/db小鼠,給予Erk1/2激酶抑制劑U0126(抑制Erk1/2磷酸化,使之失活)處理1周后,再分別給予重組人FGF21蛋白和腺病毒攜帶的FGF21(Ad-FGF21)處理,觀察120 min內(nèi)及4周后小鼠血糖、血脂及其相關(guān)調(diào)控基因的變化;同時(shí),從體外細(xì)胞培養(yǎng)方面探索其分子機(jī)制。結(jié)果:給予db/db小鼠重組人FGF21蛋白處理120 min能顯著下調(diào)血糖和甘油三酯水平,但這與U0126處理與否無(wú)關(guān)。給予Ad-FGF21處理4周能顯著改善db/db小鼠異常血糖水平及葡萄糖和胰島素耐受能力,降低機(jī)體脂肪含量,并改善異常血清甘油三酯水平,然而,這些變化仍與U0126處理與否無(wú)關(guān)。此外,在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子機(jī)制方面,Ad-FGF21處理能顯著上調(diào)皮下脂肪組織Erk1/2磷酸化活性及過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)的表達(dá)水平,同時(shí)上調(diào)機(jī)體脂聯(lián)素(adiponectin)mRNA及蛋白的表達(dá)水平(P<0...

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【文章目錄】：
材料和方法
    1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 主要試劑
    3 主要方法
        3.1 小鼠分組及處理
        3.2 葡萄糖耐受試驗(yàn)
        3.3 胰島素耐受試驗(yàn)
        3.4 FGF21重組表達(dá)腺病毒的構(gòu)建包裝
        3.5 油紅O染色
        3.6 ELISA檢測(cè)
        3.7 Real-time PCR
        3.8 Western blot
        3.9 小鼠皮下脂肪細(xì)胞原代培養(yǎng)
    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1尾靜脈注射FGF21的急性實(shí)驗(yàn)及抑制Erk1/2信號(hào)通路的影響
    2腺病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染FGF21的慢性實(shí)驗(yàn)
        2.1腺病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染FGF21改善db/db小鼠異常的血糖水平, 改善葡萄糖和胰島素耐受能力
        2.2腺病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染FGF21降低db/db小鼠的異常甘油三酯水平
        2.3腺病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染FGF21對(duì)db/db小鼠各主要器官重量和組織形態(tài)學(xué)的影響
        2.4腺病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染FGF21顯著上調(diào)皮下脂肪組織Erk1/2的磷酸化及PPARγ的表達(dá)水平
        2.5腺病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染FGF21對(duì)db/db小鼠adiponectin表達(dá)的影響
    3 Erk1/2信號(hào)通路失活對(duì)FGF21抗糖尿病病變的影響
        3.1小鼠原代脂肪細(xì)胞分離培養(yǎng)及油紅O染色鑒定
        3.2抑制Erk1/2信號(hào)通路對(duì)原代培養(yǎng)小鼠皮下脂肪細(xì)胞PPARγ表達(dá)的影響
討論



本文編號(hào)：3911879