血糖波動對2型糖尿病大鼠種植體骨結(jié)合影響的實驗研究
發(fā)布時間:2017-05-24 05:00
本文關(guān)鍵詞:血糖波動對2型糖尿病大鼠種植體骨結(jié)合影響的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:隨著口腔種植技術(shù)的發(fā)展,口腔種植已經(jīng)成為了治療牙列缺損與缺失的常規(guī)修復(fù)方法。然而隨著種植技術(shù)的廣泛使用,各種風(fēng)險因素也隨之出現(xiàn),既增加了種植的難度,在一定程度上又制約了種植的發(fā)展。糖尿。―M)作為口腔種植的一項風(fēng)險因素,在種植修復(fù)中失敗率較高,且近年來糖尿病發(fā)病率逐年提升,目前我國糖尿病患病人數(shù)已成為世界第一,且大部分患者為2型糖尿病,因此,糖尿病種植的相關(guān)研究成為了目前種植領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)難點(diǎn)。盡管已有很多關(guān)于2型糖尿病種植的研究,但是糖尿病影響種植體骨結(jié)合的機(jī)制尚不明確。 糖化血紅蛋白(HbA1c)一直被視為是衡量糖尿病患者血糖控制情況的金標(biāo)準(zhǔn),但近年來的研究發(fā)現(xiàn),單純的糖化血紅蛋白測定并不能完全反映血糖的真實情況,大幅度的血糖波動往往被忽視。血糖波動已被證實在糖尿病的多種并發(fā)癥中起重要作用,其對糖尿病血管并發(fā)癥的影響作用甚至高于持續(xù)性高血糖,但血糖波動在糖尿病種植的相關(guān)領(lǐng)域中尚未有研究。因此,本實驗選擇從血糖波動入手,建立血糖波動的2型糖尿病大鼠模型,探索血糖波動對種植體骨結(jié)合的影響,同時將2型糖尿病大鼠的成骨細(xì)胞分別培養(yǎng)于高糖和波動糖濃度的環(huán)境中,探索血糖波動對成骨細(xì)胞的影響作用。本實驗擬通過一系列研究確認(rèn)血糖波動對種植體骨結(jié)合有影響,從而為糖尿病對種植體骨結(jié)合影響的機(jī)制研究提供新的切入點(diǎn)和思路。主要實驗方法及結(jié)果如下: 實驗一:2型糖尿病及血糖波動動物模型的建立 將24只雄性清潔級SD大鼠隨機(jī)分為3組,一組自由進(jìn)食普通常規(guī)飼料,作為正常對照組;另兩組大鼠首先以高脂高糖飼料喂養(yǎng)3周,造成大鼠胰島素抵抗,然后腹腔小劑量(30mg/kg)注射STZ溶液,制作成2型糖尿病大鼠模型。注射3日后測取大鼠血糖,以隨機(jī)血糖大于16mmol/L作為建模成功的標(biāo)準(zhǔn)。將一組造模成功的大鼠繼續(xù)喂食高脂高糖飼料,大鼠自由攝食、飲水,并對血糖進(jìn)行監(jiān)控,血糖監(jiān)測結(jié)果顯示該組大鼠呈現(xiàn)穩(wěn)定的高血糖狀態(tài),日內(nèi)不同時間點(diǎn)血糖值無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),將該組作為持續(xù)性高血糖組;對另一組2型糖尿病造模成功的大鼠進(jìn)行飲食控制,每天晚上19:00至第二天上午7:00大鼠禁食12小時,然后給與高脂高糖飼料喂養(yǎng),人為造成大鼠每日血糖大幅度的波動,并對血糖進(jìn)行監(jiān)測,,結(jié)果顯示該組大鼠日內(nèi)血糖波動幅度較大,不同時間點(diǎn)血糖值有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),且每日血糖波動幅度與持續(xù)性高血糖組大鼠相比有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),因此將該組大鼠作為血糖波動組,三組大鼠均飼養(yǎng)于相同的環(huán)境中。至此,分別完成了2型糖尿病的持續(xù)性高血糖動物模型和血糖波動模型,為后續(xù)實驗提供動物載體。 實驗二:持續(xù)性高血糖與血糖波動對大鼠種植體周骨結(jié)合影響的對比分析 分別對實驗一所得3組共24只大鼠進(jìn)行右側(cè)脛骨骺端純鈦種植體的植入術(shù),各組大鼠手術(shù)環(huán)境相同。分別于術(shù)后4周、8周處死各組4只大鼠,截取帶有種植體的骨塊標(biāo)本制作含種植體的硬組織切片,并進(jìn)行麗春紅三色法染色。于熒光顯微鏡下觀察各組標(biāo)本種植體周圍情況,并使用圖像軟件測量計算種植體-骨接觸率(BIC),將所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果顯示,術(shù)后4周,持續(xù)高血糖組與血糖波動組種植體周骨組織情況相似,BIC無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),且明顯低于正常對照組(P<0.05);術(shù)后8周,血糖波動組骨結(jié)合情況差于持續(xù)性高血糖組,3組之間BIC均差異明顯(P<0.05)。 實驗三:不同糖濃度培養(yǎng)對2型糖尿病大鼠成骨細(xì)胞增殖分化的影響 取2型糖尿病大鼠脛骨,采用多次消化法培養(yǎng)大鼠的成骨細(xì)胞,并取第三代細(xì)胞進(jìn)行實驗。將細(xì)胞分為兩組,分別在高糖培養(yǎng)基和高糖低糖交替培養(yǎng)基中培養(yǎng),對細(xì)胞的生長情況進(jìn)行觀察,并繪制生長曲線,同時測定兩組大鼠的堿性磷酸酶活性,并進(jìn)行對比。結(jié)果顯示,高糖濃度組細(xì)胞在第6天左右增長速度放緩,而波動糖濃度組的細(xì)胞增殖明顯較慢(P<0.05),且該組細(xì)胞堿性磷酸酶活性明顯低于高糖濃度組(P<0.05)。 實驗結(jié)論: (1)本實驗再次驗證了2型糖尿病大鼠的種植體骨結(jié)合差于正常大鼠,糖尿病大鼠種植體周圍存在較多的軟組織,影響了種植體與骨的結(jié)合; (2)血糖波動對2型糖尿病大鼠種植體骨結(jié)合有影響,且該影響作用大于持續(xù)性高血糖,血糖波動的大鼠需要更長的骨結(jié)合時間; (3)使用交替高糖濃度培養(yǎng)基培養(yǎng)的2型糖尿病大鼠成骨細(xì)胞其增殖能力和成骨活性均差于高糖培養(yǎng)基,說明血糖波動較持續(xù)高血糖對2型糖尿病大鼠成骨細(xì)胞的影響更大,由此推測,血糖波動可能是通過對成骨細(xì)胞的毒性作用進(jìn)而影響了種植體周圍的骨結(jié)合; (4)本研究通過動物實驗和體外實驗的雙重驗證,基本證實了實驗前關(guān)于血糖波動對2型糖尿病大鼠種植體骨結(jié)合影響的猜想,并提出了可能的影響因素是血糖波動影響了成骨細(xì)胞的增殖分化,為后續(xù)的深入研究打下基礎(chǔ),同時為糖尿病影響種植體骨結(jié)合的機(jī)制提供了新的線索
【關(guān)鍵詞】:種植體 血糖波動 2型糖尿病 骨結(jié)合 成骨細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R587.2;R783.6
【目錄】:
- 縮略語表4-6
- 中文摘要6-9
- Abstract9-13
- 前言13-15
- 文獻(xiàn)回顧15-27
- 實驗一 2 型糖尿病及血糖波動動物模型的建立27-35
- 1 材料27-28
- 2 方法28-30
- 3 結(jié)果30-32
- 4 討論32-35
- 實驗二 持續(xù)性高血糖與血糖波動對大鼠種植體周骨結(jié)合影響的對比分析35-42
- 1 材料35-36
- 2 方法36-38
- 3 結(jié)果38-40
- 4 討論40-42
- 實驗三 不同糖濃度培養(yǎng)對 2 型糖尿病大鼠成骨細(xì)胞增殖分化的影響42-48
- 1 材料42-43
- 2 方法43-44
- 3 結(jié)果44-46
- 4 討論46-48
- 小結(jié)48-49
- 參考文獻(xiàn)49-58
- 個人簡歷和研究成果58-59
- 致謝59
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條
1 王曉華;李利陽;;慢性波動性高血糖對頸動脈粥樣硬化的影響[J];中國社區(qū)醫(yī)師(綜合版);2007年15期
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本文關(guān)鍵詞:血糖波動對2型糖尿病大鼠種植體骨結(jié)合影響的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:389819
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