高尿酸血癥誘導(dǎo)NLRP3炎癥小體活化GSDMD對血管內(nèi)皮細胞的影響
發(fā)布時間:2024-01-18 19:34
目的分析高尿酸血癥是否通過誘導(dǎo)亮氨酸富集的核苷酸結(jié)合寡聚結(jié)構(gòu)域3蛋白(NLRP3)炎癥小體活化蛋白質(zhì)-gasdermin D(GSDMD)導(dǎo)致內(nèi)皮細胞焦亡,觀察尿酸對血管內(nèi)皮細胞的作用機制。方法選擇ATCC細胞庫的120份人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC),制備HUVEC培養(yǎng)基、內(nèi)皮細胞(ECM)培養(yǎng)基,培養(yǎng)HUVEC細胞,按隨機數(shù)表法將培養(yǎng)成功的120份HUVEC細胞分為3組,分別為HUVEC+ECM+500μmol/L濃度尿酸,HUVEC+ECM+1000μmol/L濃度尿酸,HUVEC+ECM+1500μmol/L濃度尿酸。分別將各濃度尿酸置于5%CO2 95%空氣細胞培養(yǎng)箱內(nèi)分別培養(yǎng)24 h、48 h、72 h。計算不同濃度內(nèi)皮細胞活力下降率;采用Western blot與免疫熒光測定細胞caspase-3、caspase-4、NLRP3及GSDMD表達。結(jié)果在處理12 h的實驗?zāi)P蛢?nèi),僅有1500μmol/L濃度的尿酸能夠明顯降低HUVECS的細胞活力,細胞活力下降率為50.00%;在處理24 h的實驗?zāi)P蛢?nèi),各組細胞活力下降率分別為25.00%、65.00%、80.00%,隨著...
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本文編號:3879887
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