哮喘疾病的異質(zhì)性因其涉及諸多自身免疫成分、外界環(huán)境因素及表觀遺傳調(diào)控等復(fù)雜的機制而始終困擾著臨床治療方法的決策并且造成相當?shù)闹滤缆�。本論文的系列研究圍繞哮喘雙亞型的發(fā)病機制以及傳統(tǒng)中藥大株紅景天改善哮喘的潛在多組學藥理學機制開展。本系列研究首先通過采集哮喘雙亞型患者(嗜酸性粒細胞性哮喘亞型,EA與非嗜酸性粒細胞性哮喘亞型,NEA)臨床樣本,利用高通量二代測序微生物組學技術(shù)以及高分辨的代謝組學技術(shù)進行了多組學分析。通過復(fù)制哮喘雙亞型動物模型開展深入的哮喘亞型發(fā)病機制研究,并且進行大株紅景天單獨或聯(lián)合地塞米松治療的免疫學及多組學藥理學機制探索。同時初步開展了大株紅景天注射液的含量測定法考察及其正丁醇提取物的潛在指紋圖譜研究。取得了諸多創(chuàng)新研究成果,現(xiàn)簡述如下:1.通過研究雙亞型哮喘患者誘導痰中微生物菌群,我們發(fā)現(xiàn)哮喘患者氣道中菌群的多樣性、豐富度及均勻度顯著下降,其中NEA亞型尤為明顯。進一步研究發(fā)現(xiàn),雙亞型哮喘之間及其與健康人之間的下呼吸道微生物菌群組成存在顯著的差別。有5個菌屬被發(fā)現(xiàn)與肺功能和疾病進程緊密相關(guān)。另外,菌群網(wǎng)絡(luò)關(guān)聯(lián)分析表明,與其他菌屬潛在相關(guān)的病原體(如嗜血桿菌屬等)在不...

【文章頁數(shù)】：259 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
前言
摘要
ABSTRACT
主要英文縮略詞表
第1章 引言·文獻綜述
    1.1 哮喘研究進展
        1.1.1 哮喘的免疫學機制
        1.1.2 哮喘表型研究進展
        1.1.3 中性粒細胞性哮喘
        1.1.4 調(diào)節(jié)性T細胞
    1.2 微生物組學研究進展
        1.2.1 微生物組學研究簡介
        1.2.2 哮喘微生物組學研究進展
    1.3 代謝組學研究進展
        1.3.1 代謝組學研究簡介
        1.3.2 哮喘代謝組學研究進展
    1.4 大株紅景天研究進展
        1.4.1 哮喘常見治療策略及預(yù)后
        1.4.2 大株紅景天
        1.4.3 大株紅景天改善哮喘的可行性分析
    1.5 本研究設(shè)計及思路
        1.5.1 本研究的研究目的與假設(shè)
        1.5.2 本研究設(shè)計及特色
        1.5.3 本研究擬解決的關(guān)鍵科學及技術(shù)問題
第2章 雙亞型哮喘患者氣道微生物組學差異研究
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器與設(shè)備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 患者招募及倫理評價
        2.3.2 樣品處理及測序文庫建立
        2.3.3 測序方法及流程
        2.3.4 數(shù)據(jù)處理及生物信息學分析
        2.3.5 統(tǒng)計學方法
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 患者信息及統(tǒng)計
        2.4.2 α多樣性分析
        2.4.3 β多樣性分析及判別分析
        2.4.4 差異性菌屬鑒定
        2.4.5 菌屬相互作用網(wǎng)絡(luò)分析
        2.4.6 PICRUSt功能預(yù)測
    2.5 討論
    2.6 結(jié)論
第3章 雙亞型哮喘患者代謝組學差異研究
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 儀器與設(shè)備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 患者招募及倫理評價
        3.3.2 樣品制備方法
        3.3.3 UPLC-QTOF-MS檢測條件及質(zhì)控方法
        3.3.4 數(shù)據(jù)處理及生物信息學分析
        3.3.5 統(tǒng)計學方法
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 患者信息及統(tǒng)計
        3.4.2 QC質(zhì)控及質(zhì)譜穩(wěn)定性
        3.4.3 多元協(xié)變量模型及分析
        3.4.4 差異性代謝產(chǎn)物鑒定
        3.4.5 相關(guān)代謝通路鑒定
    3.5 討論
    3.6 結(jié)論
第4章 大株紅景天注射液質(zhì)量標準驗證及改善哮喘的免疫學機制研究
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 儀器與設(shè)備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 色譜條件及樣品制備
        4.3.2 穩(wěn)定性試驗
        4.3.3 重復(fù)性試驗
        4.3.4 中間精密度試驗
        4.3.5 線性考察
        4.3.6 準確度回收率試驗
        4.3.7 含量測定及色譜指紋圖譜的初探
        4.3.8 實驗動物及倫理學評價
        4.3.9 雙亞型哮喘動物模型的復(fù)制及給藥方案
        4.3.10 肺功能及氣道高反應(yīng)性檢測
        4.3.11 炎癥狀態(tài)評價
        4.3.12 免疫平衡狀態(tài)評價
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 穩(wěn)定性評價結(jié)果
        4.4.2 重復(fù)性評價結(jié)果
        4.4.3 中間精密度評價結(jié)果
        4.4.4 線性評價結(jié)果
        4.4.5 回收率評價結(jié)果
        4.4.6 含量測定及指紋圖譜初探結(jié)果
        4.4.7 肺功能及氣道高反應(yīng)性結(jié)果
        4.4.8 氣道H&E染色結(jié)果
        4.4.9 輔助性T淋巴細胞群失衡及調(diào)節(jié)
        4.4.10 調(diào)節(jié)性T淋巴細胞群失衡及調(diào)節(jié)
        4.4.11 炎癥介質(zhì)定量結(jié)果
    4.5 討論
    4.6 結(jié)論
第5章 地塞米松聯(lián)合大株紅景天改善哮喘的組學機制研究
    5.1 引言
    5.2 實驗材料
        5.2.1 材料與試劑
        5.2.2 儀器與設(shè)備
    5.3 實驗方法
        5.3.1 微生物組學研究
        5.3.2 代謝組學研究
    5.4 實驗結(jié)果
        5.4.1 測序質(zhì)量及統(tǒng)計
        5.4.2 α多樣性及β多樣性分析
        5.4.3 判別分析及差異性種屬鑒定
        5.4.4 PICRUSt功能預(yù)測
        5.4.5 代謝組學多元協(xié)變量模型及分析
        5.4.6 差異性代謝產(chǎn)物鑒定
        5.4.7 相關(guān)代謝通路及網(wǎng)絡(luò)藥理學挖掘
    5.5 討論
    5.6 結(jié)論
第6章 多組學關(guān)聯(lián)分析初探
    6.1 引言
    6.2 實驗數(shù)據(jù)
        6.2.1 微生物組學數(shù)據(jù)
        6.2.2 代謝組學數(shù)據(jù)
    6.3 研究方法
        6.3.1 方法學概述
        6.3.2 數(shù)據(jù)處理
        6.3.3 網(wǎng)絡(luò)關(guān)聯(lián)
        6.3.4 數(shù)據(jù)導出
    6.4 實驗結(jié)果
        6.4.1 臨床患者樣本多組學關(guān)聯(lián)
        6.4.2 實驗動物疾病模型組多組學關(guān)聯(lián)
        6.4.3 氣道菌群及局部微環(huán)境代謝模式關(guān)聯(lián)
        6.4.4 大株紅景天網(wǎng)絡(luò)藥理學機制
    6.5 討論
    6.6 結(jié)論
第7章 本研究局限性分析
第8章 結(jié)論
參考文獻
附錄
    附圖
    附表
    附代碼
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
    作者簡介
    在學期間發(fā)表的學術(shù)論文
    在學期間承擔科研項目
    在學期間獲得的獎勵
    在學期間參加的學術(shù)會議及國際交流
致謝



本文編號：3869177