背景:支氣管哮喘(簡(jiǎn)稱哮喘)是一種作用于呼吸氣道的異質(zhì)性疾病,同時(shí)伴有可變的氣流受限和氣道高反應(yīng)性,氣道炎癥貫穿整個(gè)疾病的發(fā)生發(fā)展過程。目前全球患病人數(shù)接近3億,且患病率仍呈現(xiàn)不斷上升的趨勢(shì),預(yù)計(jì)到2025年患病人數(shù)將達(dá)到4億。隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展,哮喘發(fā)病機(jī)制的假說也不斷更新,目前廣泛認(rèn)為哮喘的發(fā)生發(fā)展與多種機(jī)制相關(guān),主要包括氣道變態(tài)反應(yīng)、氣道炎癥機(jī)制、氣道神經(jīng)調(diào)節(jié)失衡機(jī)制及氣道重構(gòu)等,其中氣道炎癥機(jī)制在哮喘的發(fā)病過程中扮演著重要的調(diào)控作用。有研究表明,哮喘的發(fā)生發(fā)展與免疫學(xué)關(guān)鍵分子、炎癥信號(hào)通路的傳遞有著莫大的關(guān)聯(lián)。細(xì)胞間的信息傳遞在人體諸多生理功能的發(fā)揮占據(jù)重大的作用。近年來,外泌體受到了廣泛的關(guān)注,是一種能被多種細(xì)胞所釋放的囊泡狀小體,包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、mRNA和miRNA等生物活性物質(zhì),可介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊而參與免疫應(yīng)答、抗原呈遞、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞遷移等多種病理生理過程。越來越多的證據(jù)表明外泌體(exosomes)與哮喘之間有著密切的關(guān)聯(lián),并認(rèn)為外泌體有促進(jìn)哮喘炎癥反應(yīng)的作用。我們?cè)谇捌诘难芯拷Y(jié)果中發(fā)現(xiàn):哮喘的發(fā)生可能與外泌體的釋放量增多相關(guān),其可能是導(dǎo)致哮喘氣道炎癥惡化的關(guān)...

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 前言
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.1.2 主要試劑和來源
        2.1.3 主要儀器設(shè)備及耗材
        2.1.4 主要試劑及相關(guān)液體的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 動(dòng)物分組
        2.2.2 屋塵螨誘導(dǎo)哮喘豚鼠模型：HDM的致敏和激發(fā)
        2.2.3 血清的采取及后續(xù)分離操作流程
        2.2.4 BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)及細(xì)胞分類百分比的測(cè)定
        2.2.5 肺組織病理學(xué)檢查
        2.2.6 酶聯(lián)免疫吸附
        2.2.7 血清外泌體的提取
        2.2.8 TEM觀察外泌體的形態(tài)特點(diǎn)
        2.2.9 Western Blot檢測(cè)蛋白的表達(dá)
        2.2.10 細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.11 PKH67 染色外泌體和DAPI染色胞核
        2.2.12 P65 免疫熒光染色
        2.2.13 熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn)
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 兩組豚鼠癥狀觀察結(jié)果
    3.2 豚鼠肺組織病理學(xué)的變化
    3.3 兩組豚鼠BALF細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類情況
    3.4 兩組豚鼠BALF中 IL-4和IL-13 的含量對(duì)比
    3.5 豚鼠血清來源的外泌體蛋白濃度比較
    3.6 豚鼠血清來源的外泌體鑒定
    3.7 HDM組血清來源的exosomes進(jìn)入BEAS-2B細(xì)胞的觀察情況
    3.8 HDM組血清來源的exosomes對(duì) BEAS-2B細(xì)胞炎癥因子分泌的影響
    3.9 血清來源的exosomes對(duì) BEAS-2B細(xì)胞中TLR4/NF-?B信號(hào)通路的分析
    3.10 血清來源的exosomes通過TLR4 信號(hào)通路促進(jìn)細(xì)胞因子的表達(dá)
    3.11 血清來源的exosomes中 HSP70 通過TLR4 信號(hào)通路促進(jìn)細(xì)胞因子的表達(dá)
第4章 討論
第5章 結(jié)語(yǔ)
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3831022