核心巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶(Fut8)是催化N-聚糖核心巖藻糖基化唯一的酶,通過(guò)蛋白質(zhì)翻譯后修飾的方式調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)在機(jī)體中的作用。已有研究表明,Fut8在多種自身免疫性疾病中異常表達(dá),在免疫應(yīng)答方面也發(fā)揮著重要作用。CD4⁺T細(xì)胞的活化受糖基化調(diào)控,參與CD4⁺T細(xì)胞活化的大多數(shù)分子均為糖蛋白。Fut8通過(guò)核心巖藻糖基化影響蛋白質(zhì)構(gòu)象、定位及表達(dá)。T細(xì)胞受體(TCR)是富含核心巖藻糖基的糖蛋白。核心巖藻糖基化通過(guò)影響TCR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞因子及其受體的表達(dá)進(jìn)而調(diào)節(jié)T細(xì)胞的活化。適當(dāng)?shù)奶腔揎椨兄赥細(xì)胞功能的維持,然而糖基化的紊亂會(huì)引起T細(xì)胞的異�；罨�。CD4⁺T細(xì)胞過(guò)度活化與系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)等自身免疫病的發(fā)病密切相關(guān)。相關(guān)研究已經(jīng)證明,糖基化以及CD4⁺T細(xì)胞活化在自身免疫病的發(fā)病中均發(fā)揮著重要的作用,但核心巖藻糖基化在CD4⁺T細(xì)胞活化以及自身免疫病中的作用尚未完全研究清楚。目的:本研究通過(guò)建立Fut8基因敲除小鼠和OT-II轉(zhuǎn)基因小鼠模型,闡明核心巖藻糖基化對(duì)CD4

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 核心巖藻糖基化的增強(qiáng)與SLE發(fā)病相關(guān)
    (二)材料和方法
        1.實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 相關(guān)試劑配制
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 小鼠基因型鑒定
            2.2 蛋白裂解液制備
            2.3 凝集素印跡
            2.4 蛋白印跡
            2.5 細(xì)胞分選
            2.6 流式細(xì)胞術(shù)
            2.7 Fut8酶活的測(cè)定
            2.8 免疫組化
            2.9 EAE模型的建立
    (三)結(jié)果
        1.SLE患者血清中核心巖藻糖基水平顯著上調(diào)
        2.SLE患者外周血CD4⁺T細(xì)胞的核心巖藻糖基化水平明顯增強(qiáng)
        3.Fut8敲除使脾臟細(xì)胞的核心巖藻糖基缺失
        4.核心巖藻糖基的缺失通過(guò)降低CD4⁺T細(xì)胞活化進(jìn)而改善EAE癥狀
    (四)討論
    (五)結(jié)論
第二部分 核心巖藻糖基化通過(guò)調(diào)控TCR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)而影響CD4⁺T細(xì)胞的活化
    (二)材料和方法
        1. 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 相關(guān)試劑配制
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 動(dòng)物免疫
            2.2 流式細(xì)胞術(shù)
            2.3 ELISA
            2.4 免疫沉淀
            2.5 蛋白印跡
            2.6 細(xì)胞分選
            2.7 增殖實(shí)驗(yàn)
            2.8 共聚焦顯微鏡
            2.9 基因芯片
    (三)結(jié)果
        1.核心巖藻糖基缺失通過(guò)影響CD4⁺T細(xì)胞活化進(jìn)而抑制IgG類別轉(zhuǎn)換
        2.核心巖藻糖基化通過(guò)調(diào)控TCR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)而影響CD4⁺T細(xì)胞的活化和增殖
        3. 核心巖藻糖基化缺失影響T-B細(xì)胞連接的形成
    (四)討論
    (五)結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號(hào)：3827393