目的檢測Triad1(two RING fingers and DRIL[double RING finger linked]1)在人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)膝關(guān)節(jié)滑膜中的表達(dá),分析其與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞(Rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA FLS)凋亡的關(guān)系,并探索其參與RA FLS凋亡的可能信號通路。方法1.選取15例RA病人作為實(shí)驗(yàn)組,6例脛骨平臺骨折病人作為對照組(脛骨平臺骨折病人無RA病史,無半月板和交叉韌帶損傷史)。2.使用免疫組化、免疫熒光和Western blot方法檢測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人和脛骨平臺骨折病人膝關(guān)節(jié)滑膜中Triad1的表達(dá)情況。3.從接受膝關(guān)節(jié)置換的RA病人滑膜中分離培養(yǎng)RA FLS,并用阿霉素(Adriamycin,ADR)誘導(dǎo)其凋亡。4.用Western blot方法檢測阿霉素刺激RA FLS后,在不同時(shí)間點(diǎn)(0h,6h,12h,24h,36h)Triad1、p53以及Cleaved caspase3(C-caspase3)的表達(dá)情況。5...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 課題來源、研究的目的和意義
    1.2 國內(nèi)外研究概況
    1.3 論文的主要研究內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 研究資料及儀器設(shè)備
        2.1.1 滑膜來源
        2.1.2 主要儀器、試劑與耗材
    2.2 實(shí)驗(yàn)流程與方法
        2.2.1 RA及對照組滑膜組織的免疫組織化學(xué)染色
        2.2.2 RA及對照組滑膜組織的免疫熒光檢測
        2.2.3 RA FLS的分離培養(yǎng)
        2.2.4 阿霉素誘導(dǎo)RA FLS凋亡
        2.2.5 滑膜組織蛋白的制備
        2.2.6 Western印跡法檢測蛋白的表達(dá)
        2.2.7 細(xì)胞免疫熒光
        2.2.8 RA FLS轉(zhuǎn)染
        2.2.9 EDU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷，5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）染色檢測下調(diào)RA FLS中Triad1的表達(dá)后對其增殖的影響
        2.2.10 TUNEL（末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記測定法，Terminal dexynucleotidyl transferase（Td T）-mediated d UTP nick endlabeling）檢測上調(diào)RA FLS中Triad1的表達(dá)對其凋亡的影響
        2.2.11 流式凋亡分析
        2.2.12 溶液的配制
        2.2.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
    3.1 驗(yàn)證Triad1在人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜組織中的表達(dá)
    3.2 Triad1與RA FLS凋亡的可能關(guān)系
    3.3 下調(diào)RA FLS中Triad1的表達(dá)影響其凋亡相關(guān)蛋白的水平
    3.4 下調(diào)RA FLS中Triad1的表達(dá)對其增殖的影響
    3.5 上調(diào)RA FLS中Triad1的表達(dá)對其凋亡的影響
    3.6 Triad1可能通過p53通路誘導(dǎo)RA FLS的凋亡
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英文縮寫詞表
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
在攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文與參加的項(xiàng)目
    A：在國內(nèi)外刊物上發(fā)表的論文
    B：所參加的項(xiàng)目
    C：所獲得的榮譽(yù)
致謝



本文編號：3824544