1型糖尿病(T1D)是一種自身免疫性疾病,患者分泌胰島素的胰腺β細(xì)胞被浸潤性免疫細(xì)胞靶向破壞,從而導(dǎo)致其對外源性胰島素的終生依賴。近年來,T1D的發(fā)病率和致死率快速上升已經(jīng)對公眾健康構(gòu)成重大的威脅。食物是影響T1D發(fā)生和發(fā)展的一個重要環(huán)境因素。食源肽不僅具有易消化、易吸收的營養(yǎng)功能,還具有增強(qiáng)免疫力、抗氧化和抗炎等生理功能,已被廣泛認(rèn)可具有應(yīng)用于藥食同源食品方面的巨大開發(fā)潛力。T1D也是一種炎癥性疾病,具有抗炎性的食源肽可能會對T1D發(fā)揮有益作用。因此,本文利用T1D小鼠動物實(shí)驗?zāi)Ｐ?考察大豆肽、綠豆肽、玉米肽、玉米肽分離純化產(chǎn)物、小麥肽和小麥肽分離純化產(chǎn)物對T1D的影響效果,闡明上述物質(zhì)的特性與降血糖效果之間的關(guān)系,并探索它們的作用機(jī)理。在此基礎(chǔ)上,從具有降糖效果的肽中篩選出具有具有保護(hù)T1D作用的純化肽。利用大豆肽、綠豆肽、玉米肽和小麥肽喂食由STZ誘導(dǎo)的C57BL/6J糖尿病小鼠,根據(jù)血糖水平、胰島形態(tài)和胰島炎結(jié)果,發(fā)現(xiàn)玉米肽和小麥肽緩解C57BL/6J小鼠糖尿病的作用比較顯著。利用玉米肽和小麥肽喂食非肥胖糖尿病(NOD)小鼠,進(jìn)一步確定它們的降血糖效果。研究發(fā)現(xiàn)玉米肽延緩NOD...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略符號對照表
第一章 緒論
    1.1 1型糖尿病概述
        1.1.1 1型糖尿病發(fā)病機(jī)理
        1.1.2 1型糖尿病與炎癥
        1.1.3 1型糖尿病細(xì)胞模型
        1.1.4 1型糖尿病動物模型
    1.2 食源肽
        1.2.1 食源肽概述
        1.2.2 食源肽的分離純化和鑒定
        1.2.3 食源肽的生理功能
        1.2.4 肽對T1D的影響
        1.2.5 肽在T1D中的臨床應(yīng)用
    1.3 大豆肽、綠豆肽、玉米肽和小麥肽在T1D方面的國內(nèi)外研究進(jìn)展
    1.4 本論文的立題意義和研究內(nèi)容
        1.4.1 立題意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
第二章 幾種谷物肽對T1D小鼠發(fā)病率的影響
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗材料與設(shè)備
        2.2.1 試劑與耗材
        2.2.2 實(shí)驗儀器
    2.3 實(shí)驗方法
        2.3.1 STZ誘導(dǎo)的C57BL/6J糖尿病小鼠和動物實(shí)驗設(shè)計
        2.3.2 NOD小鼠和動物實(shí)驗設(shè)計
        2.3.3 血糖的監(jiān)測
        2.3.4 口服糖耐量實(shí)驗
        2.3.5 ELISA法測定胰島素和細(xì)胞因子
        2.3.6 組織學(xué)評價
        2.3.7 免疫組化分析
        2.3.8 免疫熒光分析
        2.3.9 RT-qPCR
        2.3.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    2.4 結(jié)果和討論
        2.4.1 幾種谷物肽對STZ誘導(dǎo)的C57BL/6J糖尿病小鼠血糖和血清中胰島素含量的影響
        2.4.2 幾種谷物肽對STZ誘導(dǎo)的C57BL/6J糖尿病小鼠胰腺胰島的影響
        2.4.3 幾種谷物肽對STZ誘導(dǎo)的C57BL/6J糖尿病小鼠血清中細(xì)胞因子的影響
        2.4.4 玉米肽和小麥肽對NOD小鼠發(fā)病和血清中胰島素含量的影響
        2.4.5 玉米肽和小麥肽對NOD小鼠胰島炎性浸潤、β細(xì)胞增殖和面積的影響
        2.4.6 玉米肽和小麥肽對NOD小鼠血清中細(xì)胞因子含量的影響
        2.4.7 玉米肽對糖尿病NOD小鼠血糖的影響
        2.4.8 玉米肽和小麥肽的混合物對NOD小鼠發(fā)病和血清中胰島素含量的影響
        2.4.9 玉米肽和小麥肽的混合物對NOD小鼠胰島炎性浸潤和β細(xì)胞面積的影響
        2.4.10 玉米肽和小麥肽的混合物對NOD小鼠血清和胰腺中細(xì)胞因子水平的影響
        2.4.11 玉米肽和小麥肽的混合物對NOD小鼠血清中氨基酸含量的影響
    2.5 本章小結(jié)
第三章 玉米肽和小麥肽的組分分離及對T1D小鼠發(fā)病率的影響
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗材料與方法
        3.2.1 試劑與耗材
        3.2.2 實(shí)驗儀器
    3.3 實(shí)驗方法
        3.3.1 相對分子量分布測定
        3.3.2 Sephadex G-15 凝膠柱分離玉米肽和小麥肽
        3.3.3 NOD小鼠和動物實(shí)驗設(shè)計
        3.3.4 血糖的監(jiān)測
        3.3.5口服糖耐量實(shí)驗
        3.3.6 ELISA法測定胰島素和細(xì)胞因子
        3.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 玉米肽和小麥肽的相對分子量分布
        3.4.2 玉米肽各組分相對分子量分布
        3.4.3 C1和C2對NOD小鼠發(fā)病和血清中胰島素含量的影響
        3.4.4 C1和C2對NOD小鼠血清中細(xì)胞因子含量的影響
        3.4.5 小麥肽各組分相對分子量分布
        3.4.6 W1和W2對NOD小鼠發(fā)病和血清中胰島素含量的影響
        3.4.7 W1和W2對NOD小鼠血清中細(xì)胞因子含量的影響
    3.5 本章小結(jié)
第四章 保護(hù)T1D肽的體外篩選方法的建立
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗材料與方法
        4.2.1 試劑與耗材
        4.2.2 實(shí)驗儀器
    4.3 實(shí)驗方法
        4.3.1 抗氧化性測定
        4.3.2 疏水性測定
        4.3.3 氨基酸測定
        4.3.4 MIN-6 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.3.5 CCK-8 法測細(xì)胞增殖活性
        4.3.6 RT-qPCR
        4.3.7 ELISA法測定細(xì)胞上清液中細(xì)胞因子含量
        4.3.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 肽對T1D的影響效果與抗氧化性的關(guān)系
        4.4.2 肽對T1D的影響效果與疏水性的關(guān)系
        4.4.3 肽對T1D的影響效果與氨基酸組成和含量的關(guān)系
        4.4.4 肽對T1D的影響效果與體外促進(jìn)MIN-6 細(xì)胞增殖能力的關(guān)系
        4.4.5 肽對T1D的影響效果與體外抗炎能力的關(guān)系
    4.5 本章小結(jié)
第五章 C2和W2 中肽氨基酸序列鑒定和具有保護(hù)T1D作用肽的篩選
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗材料與方法
        5.2.1 試劑與耗材
        5.2.2 實(shí)驗儀器
    5.3 實(shí)驗方法
        5.3.1 肽序列的質(zhì)譜鑒定
        5.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        5.3.3 CCK-8 法測細(xì)胞增殖
        5.3.4 RT-qPCR
        5.3.5 Western blot
        5.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 C2和W2 中肽的氨基酸序列鑒定
        5.4.2 LK和 FL對 MIN-6 細(xì)胞增殖的影響
        5.4.3 LK和 FL對體外LPS刺激的MIN-6 細(xì)胞中IL-6和TNF-α基因表達(dá)水平的影響
        5.4.4 肽保護(hù)T1D的作用機(jī)理
    5.5 本章小結(jié)
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
論文創(chuàng)新點(diǎn)
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄:作者在攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號：3809796