背景:MiRNAs是一種22nt左右的多功能非編碼RNA,能夠與靶mRNA的3’UTR通過堿基互補配對的原則進行結(jié)合,抑制靶mRNA的翻譯或?qū)е耺RNA降解,也能夠分泌到細胞外介導細胞間的信息傳遞。MiRNAs能調(diào)控蛋白合成,影響多種信號通路,在腫瘤發(fā)生和代謝疾病中發(fā)揮著重要的作用,在疾病的早期檢測、治療、疾病進展監(jiān)測以及機體對各種治療的反應(yīng)等方面具有重要的潛力和應(yīng)用價值。近期研究表明miR-30b-5p與NAFLD患者脂代謝異常密切相關(guān),在NAFLD細胞模型和小鼠模型中均觀測到miR-30b-5p的表達下降,但miR-30b-5p對脂質(zhì)代謝的影響還存在爭議,在脂代謝中的具體作用機制尚不清楚。本研究的目的是探討miR-30b-5p對肝癌細胞系Huh-7細胞脂質(zhì)代謝的影響及其機制。材料和方法:不同濃度的FFAs(油酸:棕櫚酸=2:1)處理細胞24h,提取各組細胞總RNAs并進行反轉(zhuǎn)錄,通過q RT-PCR的方檢測miR-30b-5p的表達量,研究在Huh-7細胞和HepG2細胞中FFAs刺激的對mi R-30b-5p表達的影響。建立miR-30b-5p過表達和抑制的單克隆穩(wěn)定細胞株。使用...

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
實驗材料與方法
    1 細胞培養(yǎng)
    2 游離脂肪酸處理
    3 慢病毒感染及單克隆穩(wěn)定細胞株的建立
    4 油紅O染色
    5 細胞內(nèi)甘油三酯檢測
    6 Real-time PCR
    7 Western blot
    8 MiR-30b-5p靶點的確定
    9 統(tǒng)計
實驗結(jié)果
    1 游離脂肪酸處理后細胞內(nèi)miR-30b-5p的表達
    2 MiR-30b-5p穩(wěn)定過表達或抑制的單克隆細胞株的建立
    3 MiR-30b-5p調(diào)節(jié)Huh-7細胞的脂質(zhì)積累
    4 MiR-30b-5p調(diào)節(jié)Huh-7細胞內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達
    5 MiR-30b-5p調(diào)控PPARGC1A的表達
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號：3800376