發(fā)布時(shí)間：2023-04-25 00:54

　　背景:MiRNAs是一種22nt左右的多功能非編碼RNA,能夠與靶mRNA的3’UTR通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則進(jìn)行結(jié)合,抑制靶mRNA的翻譯或?qū)е耺RNA降解,也能夠分泌到細(xì)胞外介導(dǎo)細(xì)胞間的信息傳遞。MiRNAs能調(diào)控蛋白合成,影響多種信號(hào)通路,在腫瘤發(fā)生和代謝疾病中發(fā)揮著重要的作用,在疾病的早期檢測(cè)、治療、疾病進(jìn)展監(jiān)測(cè)以及機(jī)體對(duì)各種治療的反應(yīng)等方面具有重要的潛力和應(yīng)用價(jià)值。近期研究表明miR-30b-5p與NAFLD患者脂代謝異常密切相關(guān),在NAFLD細(xì)胞模型和小鼠模型中均觀測(cè)到miR-30b-5p的表達(dá)下降,但miR-30b-5p對(duì)脂質(zhì)代謝的影響還存在爭(zhēng)議,在脂代謝中的具體作用機(jī)制尚不清楚。本研究的目的是探討miR-30b-5p對(duì)肝癌細(xì)胞系Huh-7細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響及其機(jī)制。材料和方法:不同濃度的FFAs(油酸:棕櫚酸=2:1)處理細(xì)胞24h,提取各組細(xì)胞總RNAs并進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,通過(guò)q RT-PCR的方檢測(cè)miR-30b-5p的表達(dá)量,研究在Huh-7細(xì)胞和HepG2細(xì)胞中FFAs刺激的對(duì)mi R-30b-5p表達(dá)的影響。建立miR-30b-5p過(guò)表達(dá)和抑制的單克隆穩(wěn)定細(xì)胞株。使用...

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
    1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2 游離脂肪酸處理
    3 慢病毒感染及單克隆穩(wěn)定細(xì)胞株的建立
    4 油紅O染色
    5 細(xì)胞內(nèi)甘油三酯檢測(cè)
    6 Real-time PCR
    7 Western blot
    8 MiR-30b-5p靶點(diǎn)的確定
    9 統(tǒng)計(jì)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 游離脂肪酸處理后細(xì)胞內(nèi)miR-30b-5p的表達(dá)
    2 MiR-30b-5p穩(wěn)定過(guò)表達(dá)或抑制的單克隆細(xì)胞株的建立
    3 MiR-30b-5p調(diào)節(jié)Huh-7細(xì)胞的脂質(zhì)積累
    4 MiR-30b-5p調(diào)節(jié)Huh-7細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)
    5 MiR-30b-5p調(diào)控PPARGC1A的表達(dá)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3800376