類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身性免疫性疾病。免疫細(xì)胞在RA病程的不同階段充當(dāng)了重要角色,它們之間形成一個(gè)細(xì)胞-細(xì)胞相互作用的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò),控制RA的發(fā)生與發(fā)展,包括釋放炎癥介質(zhì)、誘導(dǎo)細(xì)胞增殖以及血管生成等。細(xì)胞藥動(dòng)學(xué)的研究已逐漸成為傳統(tǒng)藥動(dòng)學(xué)的一個(gè)分支,并且越來越受到關(guān)注。藥物通常通過被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)或主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞,但同時(shí)又會(huì)被轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白外排出細(xì)胞,轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的過表達(dá)是某些藥物產(chǎn)生耐藥性的主要原因,這往往會(huì)引起細(xì)胞中藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)的改變,降低藥物在細(xì)胞中的累積量。多藥耐藥性(MDR)被普遍認(rèn)為是導(dǎo)致腫瘤和感染性疾病患者治療失敗的一個(gè)重要原因。然而最近的研究發(fā)現(xiàn)這種現(xiàn)象也存在于RA這種自身免疫性疾病中。P-糖蛋白(P-gp)作為ABC轉(zhuǎn)運(yùn)超家族中的重要一員,與MDR密切相關(guān),參與轉(zhuǎn)運(yùn)多種改善病情抗風(fēng)濕藥(DMARDs)。研究表明芍藥苷(Pae)是P-gp的底物,同時(shí)Pae可以下調(diào)腫瘤細(xì)胞P-gp的表達(dá)。芍藥苷-6-氧-苯磺酸酯(CP-25)作為一個(gè)新型活性單體化合物,免疫細(xì)胞是其發(fā)揮抗炎免疫調(diào)控作用的重要靶細(xì)胞。本所正在進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)CP-25可以和免疫細(xì)胞胞質(zhì)中的GRK2相結(jié)合,抑制炎癥相關(guān)信號通路的...

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表(Abbreviation)
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 CP-25在PBMC的吸收特性以及藥物濃度-時(shí)間曲線的研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 藥品和試劑
        1.2 儀器和設(shè)備
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 大鼠PBMC的制備
        2.2 大鼠血漿和PBMC樣品中CP-25和Pae的UPLC-MS/MS分析方法的建立
        2.3 細(xì)胞增殖反應(yīng)的檢測
        2.4 細(xì)胞外濃度和時(shí)間對PBMC轉(zhuǎn)運(yùn)CP-25和Pae的影響
        2.5 溫度對PBMC轉(zhuǎn)運(yùn)CP-25和Pae的影響
        2.6 單次給藥后檢測CP-25和Pae在血漿和PBMC中的濃度
        2.7 多次給藥后檢測CP-25在血漿和PBMC中的濃度
        2.8 正常和AA大鼠單次和多次給藥后檢測CP-25在PBMC中的濃度
        2.9 CP-25在血漿和PBMC中濃度的相關(guān)性研究
        2.10 細(xì)胞總蛋白的測定
        2.11 檢測指標(biāo)
        2.12 數(shù)據(jù)處理及分析
    3 結(jié)果
        3.1 方法學(xué)結(jié)果
        3.2 CP-25和Pae對PBMC活性的影響
        3.3 細(xì)胞總蛋白的測定
        3.4 細(xì)胞外濃度和時(shí)間對PBMC轉(zhuǎn)運(yùn)CP-25和Pae的影響
        3.5 溫度對PBMC轉(zhuǎn)運(yùn)CP-25和Pae的影響
        3.6 單次給藥后CP-25和Pae在血漿和PBMC中濃度的比較
        3.7 多次給藥后CP-25在血漿和PBMC中的藥物濃度-時(shí)間曲線
        3.8 正常和AA大鼠單次和多次給藥后CP-25在PBMC中的藥物濃度-時(shí)間曲線及藥動(dòng)學(xué)參數(shù)
        3.9 血漿和PBMC中CP-25濃度的相關(guān)性研究
第二部分 CP-25在PBMC外排的特性以及對PBMCP-gp表達(dá)和功能的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 藥品和試劑
        1.2 儀器和設(shè)備
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 維拉帕米對CP-25在PBMC中濃度的影響
        2.2 時(shí)間對CP-25在PBMC上外排的影響
        2.3 時(shí)間對轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑影響CP-25在PBMC上外排的研究
        2.4 濃度對轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑影響CP-25在PBMC上外排的研究
        2.5 時(shí)間和濃度對TNF-α影響正常PBMCP-gp表達(dá)的研究
        2.6 P-gp對CP-25在PBMC上外排的影響
        2.7 CP-25對TNF-α刺激的PBMCP-gp表達(dá)的影響
        2.8 CP-25對TNF-α刺激的PBMC的P-gp功能的影響
        2.9 CP-25影響自身在TNF-α刺激的PBMC中的濃度
        2.10 檢測指標(biāo)和數(shù)據(jù)處理及分析
    3 結(jié)果
        3.1 維拉帕米增加CP-25在PBMC中的濃度
        3.2 時(shí)間對CP-25在PBMC上外排的影響
        3.3 五種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑對CP-25在PBMC上外排的影響
        3.4 TNF-α對PBMC上P-pg表達(dá)的影響
        3.5 P-gp對CP-25在PBMC上外排的影響
        3.6 CP-25降低TNF-α刺激的PBMC上P-pg的表達(dá)
        3.7 CP-25降低TNF-α刺激的PBMC上P-pg的功能
        3.8 CP-25增加自身在TNF-α刺激的PBMC中的濃度
第三部分 CP-25對AA大鼠PBMC和組織中P-gp表達(dá)的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 藥品和試劑
        1.2 儀器和設(shè)備
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 AA對大鼠PBMC中P-gp表達(dá)的影響以及CP-25的抑制作用
        2.2 AA大鼠給藥后體內(nèi)PBMC中CP-25濃度的變化
        2.3 正常和AA及給藥治療的大鼠各組織P-gp表達(dá)的研究
        2.4 檢測指標(biāo)和數(shù)據(jù)處理及分析
    3 結(jié)果
        3.1 CP-25對AA大鼠整體指標(biāo)的影響
        3.2 CP-25降低AA大鼠PBMCP-gp的表達(dá)
        3.3 AA大鼠給藥后PBMC中CP-25濃度的變化
        3.4 正常和AA及給藥治療的大鼠各組織P-gp表達(dá)
討論
結(jié)論
課題創(chuàng)新點(diǎn)
下一步工作設(shè)想
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3792469