目的:探究體外轉(zhuǎn)染克老素(Klotho,KL)基因?qū)Φ厝姿?dexamethason,DEX)誘導(dǎo)的MC3T3-E1成骨細(xì)胞凋亡的影響。方法:用攜帶KL基因的重組腺病毒(Ad-KL)及攜帶綠色熒光蛋白基因的重組腺病毒(Ad-GFP)感染細(xì)胞,并建立DEX誘導(dǎo)凋亡的細(xì)胞模型。運用熒光倒置顯微鏡觀察重組腺病毒的轉(zhuǎn)染效果,qPCR與Western blot法分析KL mRNA和蛋白表達(dá)情況;CCK-8法檢測不同濃度DEX作用于MC3T3-E1細(xì)胞后的存活率及各研究組細(xì)胞的生存情況;流式細(xì)胞儀分析各研究組細(xì)胞的凋亡率;qPCR與Western blot分析凋亡標(biāo)志物的mRNA、蛋白表達(dá);免疫熒光分析caspase-9的熒光蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:重組腺病毒成功感染MC3T3-E1成骨細(xì)胞,KL組和KL+DEX組的KLmRNA與蛋白表達(dá)量較非轉(zhuǎn)染組明顯升高。利用CCK-8法成功檢測出DEX的適宜干預(yù)濃度為2.0 mmol·L-1。DEX組、GFP+DEX組較對照組細(xì)胞存活率明顯降低、凋亡率明顯增加,促凋亡因子Bax的mRNA與蛋白表達(dá)增加而抗凋亡因子Bcl-2表達(dá)降低;KL組與KL+DEX組其細(xì)胞...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述: Klotho調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號通路的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
碩士期間發(fā)表的論文



本文編號：3776151