肥胖作為一種全球性的公共衛(wèi)生問題,主要是由能量攝入與支出的不平衡造成的。表沒食子兒茶素沒食子酸酷((-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)作為茶葉中含量最高、生理活性最強(qiáng)、研究最廣泛的兒茶素成分,已有諸多文獻(xiàn)報(bào)道其有助于預(yù)防肥胖和減輕肥胖相關(guān)的慢性疾病的功效。然而,EGCG在高脂飲食誘發(fā)的能量代謝紊亂及調(diào)控相關(guān)活動(dòng)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙中的作用仍有待闡明。本論文就EGCG對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)肥胖的棕色脂肪組織產(chǎn)熱和小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的下丘腦中樞炎癥反應(yīng)的作用效果與作用機(jī)制開展研究,建立相關(guān)細(xì)胞模型與動(dòng)物模型,檢測(cè)了肥胖相關(guān)代謝指標(biāo)、棕色脂肪組織活性、適應(yīng)性產(chǎn)熱能量消耗、主要炎癥細(xì)胞因子釋放情況、下丘腦小膠質(zhì)標(biāo)記物Iba-1免疫熒光染色以及NF-κB和JAK2/STAT3信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白的磷酸化水平等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,EGCG能夠有效抑制高脂飲食造成的肥胖反應(yīng),增加小鼠棕色脂肪產(chǎn)熱與能量消耗,并減少小膠質(zhì)細(xì)胞的過度活化和下丘腦的炎癥反應(yīng),為EGCG降脂減肥功效的作用機(jī)理及相關(guān)的神經(jīng)調(diào)控機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)參考。主要研究結(jié)果如下:(1)建立高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠模型。將C57...

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮寫、符號(hào)清單、術(shù)語表
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 肥胖概述
        1.1.1 肥胖的影響因素
        1.1.2 肥胖的危害
        1.1.3 肥胖的預(yù)防與治療
    1.2 肥胖與慢性炎癥
        1.2.1 脂肪組織慢性炎癥及其發(fā)生機(jī)制
        1.2.2 肥胖與肝臟組織慢性炎癥
        1.2.3 肥胖與腸道菌群紊亂所致炎癥反應(yīng)
        1.2.4 肥胖與中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)
    1.3 EGCG的生物活性與研究現(xiàn)狀
        1.3.1 EGCG的抗氧化作用
        1.3.2 EGCG的抗腫瘤作用
        1.3.3 EGCG的神經(jīng)保護(hù)作用
        1.3.4 EGCG的心腦血管保護(hù)作用
        1.3.5 EGCG的抗菌抗病毒作用
    1.4 EGCG降脂減肥作用機(jī)制
        1.4.1 EGCG抑制消化酶活性并影響能量吸收
        1.4.2 EGCG對(duì)腸道菌群的影響
        1.4.3 EGCG對(duì)脂質(zhì)合成代謝的影響
        1.4.4 EGCG對(duì)能量消耗的影響
        1.4.5 EGCG對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響
        1.4.6 EGCG對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響
    1.5 本課題研究目的和內(nèi)容
        1.5.1 研究目的與意義
        1.5.2 主要研究?jī)?nèi)容
        1.5.3 研究技術(shù)路線
    1.6 創(chuàng)新點(diǎn)
2 EGCG對(duì)高脂喂養(yǎng)小鼠體重、攝食量、血糖血脂和脂肪積累的影響
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器與設(shè)備
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼料
        2.2.4 動(dòng)物分組與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.2.5 血液與組織樣本采集
        2.2.6 血液生化指標(biāo)檢測(cè)
        2.2.7 脂肪組織蘇木精-伊紅(HE)染色
        2.2.8 數(shù)據(jù)處理
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 EGCG對(duì)小鼠體重、攝食量和食物熱量利用率的影響
        2.3.2 EGCG對(duì)小鼠血糖血脂的影響
        2.3.3 EGCG對(duì)小鼠脂肪積累的影響
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
3 EGCG對(duì)高脂喂養(yǎng)小鼠棕色脂肪活性及產(chǎn)熱能力的影響
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 儀器與設(shè)備
        3.2.3 棕色脂肪組織樣本采集
        3.2.4 HE染色
        3.2.5 小鼠低溫暴露實(shí)驗(yàn)
        3.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)目的基因表達(dá)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.1 EGCG對(duì)小鼠棕色脂肪組織形態(tài)的影響
        3.3.2 EGCG對(duì)低溫暴露小鼠體溫與熱量分布的影響
        3.3.3 EGCG對(duì)小鼠棕色脂肪組織產(chǎn)熱關(guān)鍵基因表達(dá)的影響
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
4 EGCG對(duì)棕櫚酸誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 儀器與設(shè)備
        4.2.3 試劑配制
        4.2.4 小鼠BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.2.5 實(shí)驗(yàn)分組
        4.2.6 MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖率
        4.2.7 油紅O染色
        4.2.8 酶聯(lián)免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)相關(guān)炎癥因子水平
        4.2.9 RT-PCR檢測(cè)目的基因表達(dá)
        4.2.10 蛋白免疫印跡法(Western Blot,WB)檢測(cè)目的蛋白表達(dá)
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.3.1 EGCG對(duì)BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞活力的影響
        4.3.2 EGCG對(duì)PA誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞脂質(zhì)積累的影響
        4.3.3 EGCG對(duì)PA誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥因子釋放水平的影響
        4.3.4 EGCG對(duì)PA誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞NF-κB和JAK2/STAT3通路關(guān)鍵基因表達(dá)的影響
        4.3.5 EGCG對(duì)PA誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞NF-κB和JAK2/STAT3通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)的影響
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
5 EGCG對(duì)高脂喂養(yǎng)小鼠下丘腦炎癥反應(yīng)的影響
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 材料與試劑
        5.2.2 儀器與設(shè)備
        5.2.3 試劑配制
        5.2.4 動(dòng)物分組與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        5.2.5 心臟灌流取腦
        5.2.6 腦組織冰凍切片
        5.2.7 免疫熒光染色
        5.2.8 ELISA檢測(cè)相關(guān)炎癥因子水平
        5.2.9 WB檢測(cè)目的蛋白表達(dá)
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 EGCG對(duì)小鼠下丘腦小膠質(zhì)細(xì)胞激活情況的影響
        5.3.2 EGCG對(duì)高脂喂養(yǎng)小鼠下丘腦炎癥因子釋放水平的影響
        5.3.3 EGCG對(duì)高脂喂養(yǎng)小鼠下丘腦NF-κB和JAK2/STAT3通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)的影響
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
6 總結(jié)與展望
    6.1 總結(jié)
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3775327