背景和目的前期課題組運(yùn)用酵母雙雜交技術(shù)發(fā)現(xiàn)Par-4與hTERT有相互作用。Par-4有明確的促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用,且存在其特定的促進(jìn)凋亡功能區(qū)域。那么hTERT與Par-4結(jié)合的區(qū)域是否為其特定的促進(jìn)凋亡的區(qū)域呢?我們首先用分子生物膜層干涉技術(shù)檢測(cè)Par-4和hTERT的直接結(jié)合區(qū)域。過(guò)表達(dá)TERT可以在胰島β細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)抗凋亡作用,但TERT抗凋亡的機(jī)制尚不清楚。Par-4與多種增齡性疾病相關(guān),且Par-4可以通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。我們首先從細(xì)胞水平研究Par-4和TERT相互作用及其在胰島β細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制。再進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步探索TERT與Par-4相互作用參與2型糖尿病小鼠胰島β細(xì)胞凋亡的機(jī)制。方法:1.根據(jù)hTERT的功能結(jié)構(gòu)域,將hTERT分為4個(gè)片段,構(gòu)建其四個(gè)缺失突變體。首先構(gòu)建Par-4全長(zhǎng)基因,待測(cè)出與hTERT有相互作用后,再根據(jù)Par-4的功能分區(qū)構(gòu)建Par-4的3個(gè)缺失突變體。確定基因片段的位點(diǎn)后由德泰生物科技有限公司完成基因構(gòu)建、合成和質(zhì)檢。hTERT四個(gè)缺失突變體、Par-4全長(zhǎng)、Par-4三個(gè)缺失突變體蛋白在大腸桿菌系統(tǒng)中表達(dá)與純化;成功后...

【文章頁(yè)數(shù)】：122 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
英文摘要
中文摘要
第一章 前言
第二章 TERT與 Par-4 的直接相互作用
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 討論
第三章 TERT與 Par-4 相互作用參與高糖高脂誘導(dǎo)的胰島β細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
第四章 TERT與Par-4 相互作用參與2 型糖尿病小鼠胰島β細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.4 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述一 Par-4 促凋亡機(jī)制的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述二 2型糖尿病β細(xì)胞凋亡研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
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本文編號(hào)：3772853