【研究目的】脂肪作為儲存和釋放全身能量的重要代謝器官,可以根據(jù)機體熱量攝入的變化,而改變自身的大小和體積。脂肪組織的這種可塑性對全身性脂質(zhì)代謝和胰島素敏感性起著重要作用。隨著脂肪細胞大小和體積變化,特別是在營養(yǎng)過剩條件下脂質(zhì)堆積的過程中,脂肪細胞壁的所承受的機械壓力也會相應改變。在這里,我們探討了機械敏感離子通道Piezo1在調(diào)節(jié)全身脂質(zhì)代謝和胰島素敏感性中的作用�！痉椒ā渴占胀嬍骋吧托∈蟾鹘M織臟器,測量Piezo1/Piezo2在各組織臟器的表達豐度;普通或高脂飲食飼養(yǎng)普通野生型小鼠連續(xù)16周以上,分離其各脂肪組織中的成熟脂肪細胞和原代前脂肪細胞,測量Piezo1的表達變化。通過將adiponectin-Cre轉(zhuǎn)基因小鼠和Piezo1^flox/flox轉(zhuǎn)基因小鼠進行雜交,以構(gòu)建脂肪組織Piezo1基因特異性敲除小鼠Adipoq-Cre^+/-,Piezo1^flox/flox(adipose-Piezo1^-/-)及其對照Adipoq-Cre^-/-,Piezo1^fl...

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
一、前言
二、實驗材料和方法
    實驗材料
        1.實驗儀器
        2.實驗耗材
        3.實驗動物
        4.實驗試劑
        5.試劑配制
    實驗方法
        1.小鼠模型構(gòu)建和基因型鑒定
        2.動物實驗的分組
        3.小鼠代謝相關(guān)表型的測量
        4.血清胰島素、NEFA、甘油三脂水平測定
        5.肝臟甘油三酯水平測定
        6.動物組織標本收集
        7.提取和培養(yǎng)原代前脂肪細胞
        8.提取成熟脂肪細胞
        9.實時熒光定量PCR
        10.蛋白質(zhì)免疫印跡
        11.石蠟標本制備、切片及HE染色
        12.統(tǒng)計
三、實驗結(jié)果
    1.Piezo1 在脂肪組織中高表達
    2.高脂飲食可以誘導脂肪Piezo1 進一步表達增加
    3.增加的Piezo1 主要來源于成熟脂肪細胞
    4.Piezo2 在脂肪組織中的表達
    5.構(gòu)建脂肪細胞特異性Piezo1 敲除小鼠
    6.脂肪特異性Piezo1 敲除對小鼠體重影響
    7.脂肪特異性Piezo1 敲除小鼠的代謝表型
    8.脂肪特異性Piezo1 敲除對小鼠脂肪組織重量和脂肪細胞大小的影響
    9.脂肪特異性Piezo1 敲除對小鼠基礎脂解作用的影響
    10.脂肪特異性Piezo1 敲除誘導脂肪肝形成
    11.脂肪特異性Piezo1 敲除不影響細胞凋亡
    12.脂肪特異性Piezo1 敲除參與脂肪組織炎癥反應和脂解作用的調(diào)控
    13.Piezo1 調(diào)控脂肪細胞炎癥反應
    14.TLR4 抑制劑TAK-242 可以減輕由于Piezo1 抑制引起的脂肪細胞炎癥反應
四、結(jié)果討論
五、實驗結(jié)論
六、參考文獻
綜述 脂肪組織影響衰老及老年病的研究進展
    參考文獻
附錄：主要英文縮略詞表
攻讀學位期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號：3770144