目的:本研究旨在體外驗(yàn)證過表達(dá)和沉默表達(dá)Caveolin-1對(duì)2型糖尿病小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)功能、PI3K和AKT表達(dá)水平的影響。闡明Caveolin-1是否參與EPCs功能的調(diào)節(jié),PI3K/AKT信號(hào)通路是否與Caveolin-1對(duì)EPCs功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。方法:(1)EPCs原代培養(yǎng)及鑒定:體外分離培養(yǎng)8周齡雄性2型糖尿病db/db小鼠骨髓EPCs,采用密度梯度離心法獲取單核細(xì)胞,再將單核細(xì)胞接種于纖維連接蛋白包被的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)傳代;通過免疫熒光鑒定EPCs。(2)轉(zhuǎn)染EPCs及檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果:分別采用過表達(dá)慢病毒空白載體、過表達(dá)慢病毒載體、沉默表達(dá)慢病毒空白載體和沉默表達(dá)慢病毒載體轉(zhuǎn)染EPCs。故本研究分為過表達(dá)空白載體組、過表達(dá)組、沉默表達(dá)空白載體組、沉默表達(dá)組和未轉(zhuǎn)染的對(duì)照組。通過慢病毒感染效率探索各組慢病毒轉(zhuǎn)染的最佳MOI值,確定轉(zhuǎn)染時(shí)加入EPCs的病毒量。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(qPCR)分別檢測(cè)各組慢病毒載體(包含3個(gè)沉默表達(dá)慢病毒載體和一個(gè)過表達(dá)慢病毒載體)轉(zhuǎn)染EPCs后Caveolin-1的mRNA表...

【文章頁數(shù)】：134 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
個(gè)人簡(jiǎn)歷
摘要
abstract
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
創(chuàng)新性與不足
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文及獲獎(jiǎng)情況



本文編號(hào)：3763661