目的:觀察給予不同濃度的阿托伐他汀鈣作用24小時(shí)后,對(duì)體外培養(yǎng)的成骨前體細(xì)胞3T3-E1增殖與分化影響,分析該過程與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通路的關(guān)系,初步探討骨骼疾病的治療靶點(diǎn)。方法:1.顯微鏡下觀察成骨前體細(xì)胞3T3-E1形態(tài)結(jié)構(gòu)和生長(zhǎng)狀態(tài)。2.3T3-E1細(xì)胞培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期,設(shè)置對(duì)照組(不加入阿托伐他汀鈣),實(shí)驗(yàn)組加入含不同濃度阿托伐他鈣(10^-8mol/L、10^-7mol/L、10^-6mol/L)的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞,24小時(shí)后利用CCK-8比色法觀察阿托伐他汀鈣對(duì)3T3-E1細(xì)胞增殖能力的影響,測(cè)定吸光度值。3.3T3-E1細(xì)胞培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期,設(shè)置對(duì)照組(不加入阿托伐他汀鈣),實(shí)驗(yàn)組加入含不同濃度阿托伐他鈣(10^-8mol/L、10^-7mol/L、10^-6mol/L)的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞,24小時(shí)后利用堿性磷酸酶測(cè)定試劑盒測(cè)定ALP活力,測(cè)定吸光度值。4.向3T3-E1細(xì)胞中加入對(duì)細(xì)胞增殖及分化作用最明顯的10^-6mol/L阿托伐他汀鈣,...

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一章 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    1.2 主要儀器
    1.3 試劑與藥品
第二章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 阿托伐他汀鈣干預(yù)濃度的配置
    2.2 成骨前體細(xì)胞3T3-E1的復(fù)蘇、傳代及凍存
        2.2.1 成骨前體細(xì)胞3T3-E1的復(fù)蘇
        2.2.2 成骨前體細(xì)胞3T3-E1的傳代培養(yǎng)
        2.2.3 成骨前體細(xì)胞3T3-E1的凍存
    2.3 CCK-8比色法檢測(cè)成骨前體細(xì)胞3T3-E1增殖能力
    2.4 成骨前體細(xì)胞3T3-E1ALP活力測(cè)定
    2.5 qRT-PCR檢測(cè)Runx2、Osterix及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通路標(biāo)志性基因Bip、PERK、eIF2a在mRNA水平的表達(dá)
        2.5.1 總RNA的提取
        2.5.2 cDNA的合成
        2.5.3 RT-PCR反應(yīng)步驟
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 顯微鏡下成骨前體細(xì)胞3T3-E1細(xì)胞的形態(tài)
    3.2 阿托伐他汀鈣對(duì)成骨前體細(xì)胞3T3-E1細(xì)胞增殖的影響
    3.3 阿托伐他汀鈣對(duì)成骨前體細(xì)胞3T3-E1細(xì)胞成骨分化的影響
    3.4 mRNA水平顯示：阿托伐他汀鈣作用于3T3-E1細(xì)胞過程中,促進(jìn)Runx2、Osterix的表達(dá)
    3.5 mRNA水平顯示：阿托伐他汀鈣作用于3T3-E1細(xì)胞過程中,促進(jìn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性基因Bip、PERK、eIF2α的表達(dá)
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄或縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3752747