發(fā)布時(shí)間：2023-02-17 21:11

　　目的明確TGF-β在哮喘中對(duì)Eos表型轉(zhuǎn)化的作用及其機(jī)制。材料與方法 1.動(dòng)物模型:利用6-8周性別相同的野生型(Wild Type,WT)小鼠,通過(guò)氣道滴注塵螨提取物(House Dust Mite,HDM)構(gòu)建哮喘模型,采用流式細(xì)胞術(shù)分析肺部、外周血和骨髓Eos的數(shù)量以及CD101-/+Eos的比例;構(gòu)建Eos特異性Tgfbr2基因敲除(Eocre-Tgfbr2f/f)小鼠,通過(guò)哮喘炎癥的差別進(jìn)一步研究TGF-β對(duì)Eos的作用及其對(duì)哮喘炎癥的影響。2.轉(zhuǎn)錄組測(cè)序:利用流式細(xì)胞分選不同亞型Eos,并通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序篩選差異表達(dá)。3.細(xì)胞實(shí)驗(yàn):利用NJ.1638(白細(xì)胞介素-5過(guò)表達(dá)小鼠)分離純化Eos進(jìn)行體外干預(yù)實(shí)驗(yàn),檢測(cè)效應(yīng)基因的表達(dá)和體外功能實(shí)驗(yàn),探究TGF-β對(duì)于Eos功能的影響及其具體機(jī)制。4.臨床標(biāo)本采集和分析:收集非哮喘者及哮喘患者外周血,利用流式細(xì)胞術(shù)分析其Eos數(shù)量和CD101表型,證實(shí)哮喘嚴(yán)重程度與Eos數(shù)量及其CD101表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果小鼠HDM哮喘模型肺部CD101+Eos增多,且由外周CD101-Eos入肺后在局部微環(huán)境中轉(zhuǎn)化而來(lái);組學(xué)分析CD101^...

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