發(fā)布時間：2023-02-12 14:33

　　目的探討牙骨質(zhì)蛋白1(cementum protein 1,CEMP1)基因修飾骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)與β-磷酸三鈣(β-tricalcium phosphate,β-TCP)體外復(fù)合培養(yǎng)的可行性。方法體外培養(yǎng)骨質(zhì)疏松大鼠BMSCs,將攜帶有CEMP1基因的慢病毒LV-CEMP1-EGFP轉(zhuǎn)染BMSCs,采用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染情況,通過流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染率,通過實時熒光定量PCR檢測轉(zhuǎn)染后BMSCs中CEMP1基因的表達(dá),Western Blot及免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測BMSCs中CEMP1蛋白的表達(dá)情況。將CEMP1基因修飾的BMSCs與β-TCP體外復(fù)合培養(yǎng),在熒光顯微鏡和掃描電鏡下觀察細(xì)胞的生長狀況。結(jié)果LV-CEMP1-EGFP具有較高的轉(zhuǎn)染率,CEMP1基因修飾的BMSCs可高表達(dá)CEMP1,且在β-TCP上保持良好的生長狀態(tài)。結(jié)論CEMP1基因修飾骨質(zhì)疏松大鼠BMSCs與β-TCP復(fù)合培養(yǎng),有望應(yīng)用于骨質(zhì)疏松狀態(tài)下的牙周組織再生研究。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物:
        1.1.2 主要試劑與儀器:
    1.2 方法
        1.2.1 PMO大鼠BMSCs的獲取及體外培養(yǎng):
        1.2.2 PMO大鼠BMSCs體外成骨分化能力檢測:
        1.2.3 PMO大鼠BMSCs基因轉(zhuǎn)染檢測:
        1.2.4 基因轉(zhuǎn)染PMO大鼠BMSCs與β-TCP復(fù)合培養(yǎng):
2 結(jié)果
    2.1 PMO大鼠BMSCs原代培養(yǎng)及成骨分化能力檢測
    2.2 CEMP1基因轉(zhuǎn)染PMO大鼠BMSCs檢測
    2.3 基因轉(zhuǎn)染后PMO大鼠BMSCs中CEMP1基因表達(dá)檢測
    2.4 基因轉(zhuǎn)染后PMO大鼠BMSCs中CEMP1蛋白表達(dá)檢測
    2.5 基因轉(zhuǎn)染PMO大鼠BMSCs與β-TCP復(fù)合培養(yǎng)
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