目的通過體外誘導(dǎo)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化為成熟的脂肪細(xì)胞,探討肥胖個體中高水平的血清游離脂肪酸（FFA）是否抑制Krüppel樣因子15（KLF15）的表達(dá),并嘗試探索其可能的分子通路。方法 0. 8 mmol·L-1FFA混合液（棕櫚酸∶油酸=1∶2）,刺激體外培養(yǎng)的3T3-L1成熟脂肪細(xì)胞,同時運(yùn)用阻斷劑AH7614和GW1100分別阻斷游離脂肪酸受體4（FFAR4）和游離脂肪酸受體1（FFAR1）,qRT-PCR和Western Blot技術(shù)檢測脂肪細(xì)胞FFAR4、FFAR1、KLF15、Adipolin、GLUT4和磷酸化的p38 MAPK水平,葡萄糖氧化酶法檢測上清液中葡萄糖濃度。結(jié)果（1）0. 8 mmol·L-1FFA混合液能夠顯著促進(jìn)脂肪細(xì)胞FFAR4的表達(dá),抑制KLF15、Adipolin、GLUT4和FFAR1的表達(dá)和脂肪細(xì)胞葡萄糖消耗（P＜0. 05）,同時對磷酸化的p38 MAPK無影響;（2）阻斷FFAR4后,0. 8mM FFA混合液對脂肪細(xì)胞KLF15、Adipolin、GLUT4的表達(dá)和葡萄糖消耗的抑制作用消失（P＜0. 05）,對磷酸化水平的p38 ... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 3T3-L1脂肪細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
    1.2 FFA混合液的配制
    1.3 阻斷劑的使用
    1.4 葡萄糖濃度的檢測
    1.5 RNA提取和實(shí)時定量PCR
    1.6 蛋白提取和免疫印跡試驗(yàn)
    1.7 統(tǒng)計學(xué)分析
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
    2.2 不同濃度FFA混合液刺激脂肪細(xì)胞，觀察對FFAR4、FFAR1、磷酸化p38 MAPK、KLF15及葡萄糖消耗的影響
    2.3 FFA混合液刺激脂肪細(xì)胞同時阻斷FFAR4，觀察對磷酸化p38 MAPK、KLF15及葡萄糖消耗的影響
    2.4 FFA混合液刺激脂肪細(xì)胞同時阻斷FFAR1，觀察對磷酸化p38 MAPK、KLF15及葡萄糖消耗的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]KLF9和KLF15在維吾爾族網(wǎng)膜脂肪中的表達(dá)及其與炎癥相關(guān)性分析[J]. 王翠喆,哈曉丹,謝建新,許彭,李偉,張君.  中國免疫學(xué)雜志. 2016(11)



本文編號：3724080