目的:成骨細(xì)胞的增殖分化與骨質(zhì)疏松的發(fā)生有密切相關(guān),眾所周知,RUNX2可影響成骨細(xì)胞的增殖分化,有研究發(fā)現(xiàn)miR-133a-3p可靶向RUNX2,影響其表達(dá),然而,高糖環(huán)境下miR-133a-3p表達(dá)量是否有變化及其是否通過影響成骨細(xì)胞增殖分化而參與糖尿病性骨質(zhì)疏松癥（Diabetic osteoporosis,DOP）發(fā)病過程仍不明確。方法:CCK8法檢測(cè)不同糖濃度、不同時(shí)間MC3T3-E1細(xì)胞的增殖情況,以骨形成調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的重要成分miR-133a-3p和RUNX2為切入點(diǎn),對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染并分組。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)不同組別miR-133a-3p及成骨分化相關(guān)基因RUNX2,Osteorix,OCN相關(guān)mRNA的表達(dá),Western blot檢測(cè)RUNX2,Osteorix,OCN等蛋白的表達(dá),用共聚焦顯微鏡證實(shí)miR-133a-3p對(duì)RUNX2表達(dá)的調(diào)節(jié),ELISA法檢測(cè)不同組細(xì)胞中堿性磷酸酶（ALP）活性;從細(xì)胞、分子水平闡明:葡萄糖是否影響miR-133a-3p表達(dá),從而調(diào)節(jié)RUNX2,參與骨質(zhì)疏松（OP）的發(fā)病過程。結(jié)果:高糖環(huán)境中MC3T3-E1細(xì)胞增殖較正常組明顯減... 

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

miR-133a是位于18號(hào)染色體長臂1區(qū)1帶上的一段miRNA，并且在人、小鼠、恒河猴、狗等不同物種間高度保守(圖1A)

miR-133a-3p在高葡萄糖環(huán)境中高度表達(dá)

不同組中細(xì)胞增殖的比較，48h、72h高糖組增殖率較正常組減低（P≤0.05），HG+miR-133a-3p過表達(dá)組中的增殖率與陰性病毒對(duì)照組中的增殖率沒

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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